静脉输注脂肪乳对微柱凝胶法交叉配血的影响

冯力彬　武艳　邢军锋(石家庄市藁城人民医院检验科　河北　石家庄　0560;河北医科大学第一医院检验科　河北　石家庄　0500;石家庄市藁城人民医院重症医学科　河北　石家庄　0560)

静脉输注脂肪乳对微柱凝胶法交叉配血的影响

冯力彬1武艳2邢军锋3
(1石家庄市藁城人民医院检验科河北石家庄052160;2河北医科大学第一医院检验科河北石家庄050031;3石家庄市藁城人民医院重症医学科河北石家庄052160)

摘要目的:探讨静脉输注脂肪乳对微柱凝胶法交叉配血的影响。方法:运用微柱凝胶法对45例拟输血患者静脉输注脂肪乳前后两组标本进行ABO、RhD血型鉴定、不规则抗体检测和交叉配血试验。结果:输注脂肪乳后，45例患者标本各试验未发现有明显的异常凝集现象，只有1例出现1 +以下的异常凝集现象，输注脂肪乳前后两组无显著性差异( P＞0. 05)。结论:静脉输注脂肪乳后采集的标本对微柱凝胶法交叉配血试验的影响较小，可以按通常标本进行交叉配血试验。

关键词拟输血;脂肪乳;微柱凝胶;交叉配血

常见的交叉配血方法主要有盐水法、抗人球蛋白法、凝聚胺法、微柱凝胶试验法。微柱凝胶试验( MGT)是20世纪90年代进入国内实验室并用于交叉配血的新方法。在一些先进国家已成为常规的红细胞血型血清学检测技术［1］。微柱凝胶法具有标准化程度高、重复性强、试验结果明确可靠、患者血标本用量少、操作简单、结果易于观察及保存时间长等优点［2］。笔者运用微柱凝胶法对45例拟输血患者静脉输注脂肪乳前后标本进行ABO、RhD血型鉴定、不规则抗体检测和交叉配血试验，报告如下:

1.　资料与方法

1. 1一般资料

选择2014年4月－10月本院45例拟输血患者，在静脉输注脂肪乳前后分别采集静脉血EDTA抗凝标本。这45例患者分别来自普通外科、骨科、重症医学科、血液内科。交叉配血标本均来自河北省血液中心无偿自愿献血，实验完毕立即置4℃冰箱保存。

1. 2试剂与仪器

( 1) ABO、RhD血型定型检测卡

( 2)交叉配血抗人球蛋白检测卡

( 3)不规则抗体抗人球蛋白检测卡

( 4) ABO血型反定型试剂

包括4%A1红细胞，4%B红细胞

实验时需稀释为0. 5%－0. 8%浓度。

以上检测试剂生产厂家:长春博讯生物技术有限公司

( 5)不规则抗体筛检细胞

包括检测细胞Ⅰ、检测细胞Ⅱ、检测细胞Ⅲ

实验时需稀释为0. 5%－0. 8%浓度。

生产厂家:长春博德生物技术有限公司

( 6) TD－3A型血型血清学用离心机

( 7) FYQ型免疫微柱37℃孵育器

以上仪器生产厂家:长春博研科学仪器有限公司

1. 3检测方法

对45例拟输血患者静脉输注脂肪乳前后标本分别进行ABO、RhD血型鉴定、不规则抗体检测和交叉配血试验，严格按照微柱凝胶法检测试剂盒说明书操作。各项操作步骤如下:

( 1)将微柱凝胶试剂卡的6只凝胶微管标号。

( 2)将待检者0. 5%－0. 8%红细胞悬液分别加入第一至第四只微管中，每管50ul。

( 3)将待检者血清分别加入第五只和第六只微管，每管50ul。

( 4)将已知A型和B型红细胞0. 5%－0. 8%浓度悬液分别加入第五只和第六只微管中，每管50ul。

( 5)即刻使用TD－3A型血型血清学用离心机离心5分钟，900rpm 2分钟，1500 rpm 3分钟，取出，观察结果。

1. 3. 2不规则抗体检测

( 1)将试剂卡做好标记。

大月亮，细月亮，哥哥在堂屋里学篾匠，嫂嫂在厨房里蒸淘饭，淘饭蒸得喷喷香。不把得哥哥呷，不把得哥哥尝，提起袋里撞你咯娘。

( 2)分离被检者血清(或血浆)。

( 3)用低离子溶液将筛检红细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分别配成0. 5%－0. 8%浓度，分别加入标记好的微管中，各1滴(或50 ul)。

( 4)分别立即加入被检者血清(或血浆) 1滴(或50 ul)。

( 5)加样后的试剂卡，置37℃中孵育15分钟。

( 6)使用TD－3A型血型血清学用离心机离心5分钟，900rpm 2分钟，1500 rpm 3分钟，取出，观察结果。

1. 3. 3交叉配血试验

( 1)将受血者和献血者的红细胞和血清(或血浆)分离。

( 2)用低离子溶液分别将受血者与献血者红细胞配成0. 5%－0. 8%浓度红细胞悬液。

( 3)将献血者红细胞1滴(或50 ul)与受血者血清(或血浆) 1滴(或50 ul)加入到主侧管中。

( 4)将受血者红细胞1滴(或50 ul)与献血者血清(或血浆) 1滴(或50 ul)加入到次侧管中。

( 5)加样后的试剂卡，置37℃中孵育15分钟。

( 6)使用TD－3A型血型血清学用离心机离心5分钟，900rpm 2分钟，1500 rpm 3分钟，取出，观察结果。

1. 3. 4统计学方法采用SPSS17. 0统计软件对数据资料进行X2检验，P＜0. 05时差异有统计学意义。

2.　结果

2. 1这45例标本分别来自普通外科8例、骨科6例、重症医学科16例、血液内科15例，血型分布: A型10例、B型16例、AB型6例、O型12例、以上RhD均阳性，有1例标本O型，RhD阴性(标本科室分布见表1)。

2. 2静脉输注脂肪乳前，45例标本各试验无异常凝集现象，包括血型正反定型均相符，与相同血型的标本交叉配血均相合，即无凝集无溶血，不规则抗体检测阴性。静脉输注脂肪乳后，45例患者标本各试验未发现有明显的异常凝集现象，只有1例出现1 +以下的异常凝集现象，来自血液内科(具体结果详见表2)。

3.　讨论

凝胶分子筛是微柱凝胶技术的核心，凝胶分子之间存在着间隙，而这个间隙只可让单个红细胞通过。如果红细胞发生凝集，凝胶微柱层析分子就会将其阻滞于凝胶之内，而没有发生凝集的红细胞就会穿过凝胶分子之间的间隙运动至柱底，以此来区别有无凝集。

脂肪乳是一种营养补充药，为人体提供能量和必需的脂肪酸，三甘油酯、卵磷脂和甘油是脂肪乳的主要成分。脂肪乳粒子体内清除的速度与乳糜微粒相近，其大小也和乳糜微粒相差不多。而乳糜微粒在人血浆脂蛋白颗粒中体积是最大的。

从表2我们可以看出，45例标本输注脂肪乳前后对比，通过X2检验，P＞0. 05，两组无显著性差异.

以上试验出现的1例异常凝集标本，不排除有其他因素造成的异常凝集(如标本污染等)。当然，也存在另一种可能:在短时间内输注大量或高浓度脂肪乳时，血液中大量脂肪乳粒子积聚，在这个时候采集血标本，用微柱凝胶法进行ABO、RhD血型鉴定、不规则抗体检测和交叉配血，脂肪乳粒子就有可能聚集在凝胶分子间隙，阻碍红细胞穿过微孔运动至柱底。从而在外观上出现类似凝集的现象，影响判断交叉配血所有试验的结果。本试验两组对比虽然无显著性差异，但输注脂肪乳对微柱凝胶法交叉配血试验的影响还需进一步研究.

综上所述，静脉输注脂肪乳对微柱凝胶法交叉配血试验的影响无统计学意义，说明静脉输注脂肪乳后采集的标本对微柱凝胶法交叉配血试验的影响较小，输过脂肪乳的标本可以按通常标本进行交叉配血。但是，静脉输注脂肪乳对微柱凝胶法交叉配血试验影响的可能性还是存在的.如果微柱凝胶法交叉配血有凝集现象，可以用其他方法(如凝聚胺法等)重新交叉配血，或者在患者体内脂肪乳降解后重新采集血标本进行交叉配血。在实际工作中，建议临床医师在静脉输注脂肪乳前或脂肪乳在人体内被降解吸收后再采血，然后进行交叉配血，以避免脂肪乳对微柱凝胶法交叉配血试验可能的影响。

参考文献

［1］李勇，杨贵贞.人类红细胞血型学实用理论与实验技术［M］.北京，中国科学技术出版社，1999:274.

［2］王德付.微柱凝胶试验在交叉配血中的应用［J］.检验医学与临床，2011，8( 16) :2045－2046.

【中图分类号】R446. 11

【文献标识码】B

【文章编号】1009－6019( 2015) 12－0045－02

作者简介:冯力彬，男，39岁，工作单位:石家庄市藁城人民医院检验科，职称:主管检验师。