探究溶血标本对酶联免疫法检测HBsAg的影响

陈燕

(江苏无锡江阴市人民医院　江苏　无锡　214400)

探究溶血标本对酶联免疫法检测HBsAg的影响

陈燕

(江苏无锡江阴市人民医院江苏无锡214400)

摘要目的：探讨溶血标本对酶联免疫法检测HBsAg的影响。方法：选取2013年12月-2015年3月来我院进行治疗的患者126例，其中阴性标本51个，乙型肝炎患者标本75个，进行常规检测后认为造成溶血情况，使用酶联免疫法进行检测，观察HBsAg的具体情况。结果：经过检验后发现，溶血情况的发生对测定结果有一定的干扰，从乙肝患者的血液标本吸光度情况方面来看，受到的干扰较大，但是并不影响对疾病结果的判定，P>0.05，无显著性差异和统计学意义。结论：溶血标本对酶联免疫法检测HBsAg的影响不大，在血红蛋白小于10g/L的情况下并不会对异性肝炎病毒表面的抗原测定的结果产生影响，但是患者的标本产生溶血情况依然不能忽视。

关键词溶血标本；酶联免疫法；HBsAg的影响；吸光度情况；血红蛋白

为了探讨溶血标本对酶联免疫法检测HBsAg的影响，我院特进行了一次研究，取得了较为良好的效果，现将具体情况报告如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2013年12月-2015年3月来我院进行治疗的患者126例，其中阴性标本51个，乙型肝炎患者标本75个。

1.2 方法

进行常规检测后认为造成溶血情况，使用酶联免疫法进行检测。酶联免疫法使用的仪器有：sysmex kx-21N血球分析仪、RT-600酶标分析仪、RT-300洗板机、振荡器、乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂，乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂主要由万泰生物药业提供。

1.3 操作方式

收集所有患者标本的红细胞，将期分别放在冰箱中进行冷冻，造成溶血情况。使用含量为0.9%的NaCl溶液对标本的血红蛋白含量进行调整，将其控制在5g/L、10g/L。进行酶联免疫法检测按照使用的说明书进行即可，采用样本吸光度值和临界值进行比较，对患者阴阳性情况进行判定。

1.4 统计学方法

对上述患者各项记录数据进行分类和汇总处理，采取统计学软件SPSS19.0对上述汇总数据进行分析和处理，计量资料采用t检验，计数资料采用卡方检验，P<0.05，具有显著性差异和统计学意义。

2.结果

经过检验后发现，血红蛋白小于5g/L时阳性检出的例数有3例，阴性检出的例数有48例，检出率为5.88%。血红蛋白小于10g/L时阳性检出的例数有3例，阴性检出的例数有48例，检出率为5.88%。

将上述情况与空白标本的结果进行对比，将相关结果输入统计学软件，X2=2.134，P<0.05，具有显著性差异和统计学意义。

在HBsAg炎性标本测定结果方面，所有患者的检测结果均为阳性，P>0.05，无显著性差异和统计学意义。在乙肝患者的标本结果中，溶血情况的发生会使吸光度情况产生波动，在本次研究中，乙型肝炎患者血红蛋白5g/L的标本吸光度增加了13.04%；乙型肝炎患者血红蛋白10g/L的标本吸光度增加了15.08%。

3.讨论

酶联免疫检测测定的方式主要是以抗原和抗体分子为测定靶标的方法，亦是目前最为常用的实验室诊断方法之一，属于标记免疫技术的一种。侧重测定发生需要经过采样、保温、洗涤、比色等步骤进行性操作。如果在操作的过程中稍有差池就会出现溶血情况[1]。

溶血情况的发生会给检验的结果造成较为严重的影响，为了降低此种情况发生的几率，在实验的各个步骤中都需要特别注意：1、在加样时需要直接将样本加到反应杯的底部，不能将其加到反应杯的上部和边缘，尤其是酶试剂[2]，这样能够减少非特异性吸附现象的发生；2、加样步骤完成之后需要将其放置在振荡器中，但是需要注意的是振荡器的速度不能过快，放置发生液体飞溅的情况发生；3、在洗涤的过程中需要采用洗板机，并且需要将程序设置为双吸，清洗液的剂量为350μl，将潜水泵的压力调整到合适的范围内[3]。另外需要注意的是，清洗反应杯之后需要确认反应杯之间是否发生污染现象，这样才能够减少非特异性吸附情况发生的几率；4、酶标分析仪比色过程中采用双波长，双波长的应用能够大大减少非特异性吸附对结果的影响，另外还能够减少反应杯外壁是否存在手印等不易察觉的赃物，降低了对结果的影响。

综上所述，溶血标本对酶联免疫法检测HBsAg的影响不大，在血红蛋白小于10g/L的情况下并不会对异性肝炎病毒表面的抗原测定的结果产生影响，但是患者的标本产生溶血情况依然不能忽视，尤其是在比色结果处在临界值的标本，需要采取相应的措施进行补救，这样才能够在最大程度上提高疾病诊断的正确率，减少漏诊、误诊情况的发生。上述观点具有极强的临床推广价值，值得在临床中大力推广应用。

参考文献

[1]张海军. 类风湿因子对酶联免疫法检测HBsAg的影响[J]. 内蒙古医学杂志,2013,03:295-297.

[2]张金凤,刘春娃. 溶血标本对酶联免疫法检测HBsAg的影响[J]. 中国当代医药,2011,07:92.

[3]李建华,王万仓. 溶血和带血细胞标本对HBsAg结果的影响[J]. 检验医学与临床,2008,18:1122-1123.

【中图分类号】R556.7

【文献标识码】B

【文章编号】1009-6019(2015)15-0043-02