VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS患者血清中的表达及意义

卢志贤，王亚萍，谢敏瑚

(无锡市第三人民医院 检验科,江苏 无锡214041)



VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS患者血清中的表达及意义

卢志贤，王亚萍，谢敏瑚

(无锡市第三人民医院 检验科,江苏 无锡214041)

摘要：目的探讨血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C，VEGF-C)、环氧化酶-2(cyclooxygenase 2，COX-2)、组织蛋白酶-D(cathepsin-D，Cath-D)在骨髓增生异常综合症(myelodysplastic syndromes,MDS)患者血清中的表达水平及意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测44例MDS患者、50例正常健康人血清中的VEGF-C、COX-2、Cath-D含量并进行比较。结果MDS患者血清中VEGF-C、COX-2、Cath-D的表达水平明显高于正常健康对照组，差异有显著统计学意义(均P<0.01)。VEGF-C、COX-2、Cath-D的表达在不同性别、年龄比较中无统计学意义(均P>0.05)，而在不同临床分型比较中VEGF-C、COX-2、Cath-D的表达与MDS分型呈正相关性。结论联合检测血清VEGF-C、COX-2、Cath-D的表达对MDS疾病的发展、治疗、预后有重要的作用。

(ChinJLabDiagn,2015,19:0780)

骨髓增生异常综合征(MDS) 是一组造血干细胞恶性克隆性疾病，造血功能紊乱是其特征，导致无效造血及恶性转化危险性增高。病态造血主要表现在粒、红、巨三系，也可是两系或一系，骨髓功能异常而导致三系细胞病态发育及增生异常活跃，但同时又伴有显著的无效造血。目前MDS的诊断主要靠骨髓象的改变及活检，诊断依据是病态造血现象，但病态造血又不是MDS所特有。本文则通过ELISA法定量检测血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、环氧化酶-2(COX-2)、组织蛋白酶-D(Cath-D)来探讨这些指标在MDS患者血清中的表达水平及意义，现报告如下：

1资料与方法

1.1临床资料44例MDS患者均来自我院住院患者，其中男26例，女18例，年龄28-74岁，平均53.2岁。其中MDS-RA18例，MDS-RAS5例，MDS-RAEB-I8例，MDS-RAEB-II13例，所有病例经病理、临床、骨髓细胞学及骨髓活检证实，均符合MDS的诊断标准[1]。同时收集我院50例正常健康体检者，男25例，女25例，年龄25-72岁，平均51.4岁。

1.2实验方法所有实验对象清晨空腹抽取静脉血5 ml，离心1 000 r/min，5 min，吸取血清分装后于-70℃保存备用。采用酶联免疫吸附法定量检测VEGF-C、COX-2、Cath-D，严格按照操作说明书操作，每次测定标本时，同时进行阴性、阳性质控物对照。VEGF-C、COX-2试剂盒购自上海沪峰化工有限公司，Cath-D试剂盒购自武汉中美科技有限公司，酶标仪为德国HAMILTON MICRO LAB○RFAME。

2结果

2.1VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS组中的表达分别为382.52±96.53ng/L、282.33±52.62pg/ml、19.47±7.21μg/L，显著高于对照组的表达(均P< 0.01)。见表1。

组别nVEGF-C(ng/L)COX-2(pg/mL)Cath-D(μg/L)MDS组44382.52±96.53282.33±52.6219.47±7.21正常对照组50126.18±42.35108.19±27.388.52±3.39t值6.4818.8374.486P值0.0000.0000.000

2.2VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS不同临床特征中的表达，它们在性别、年龄比较中无统计学意义(均P>0.05)，而在不同临床分型比较中VEGF-C、COX-2、Cath-D的表达与MDS分型呈正相关性。见表2。

项目例数(n)VEGF-C(ng/L)COX-2(pg/ml)Cath-D(μg/L)性别 男26384.22±92.31279.46±49.6719.72±7.18 女18381.16±91.15284.18±56.4319.03±6.35年龄(岁) ≥5032378.49±96.38285.67±58.4219.91±7.28 <5012384.18±92.46278.86±54.6319.32±6.86临床分型 MDS-RA18225.64±76.39177.39±38.6414.21±5.29 MDS-RAS5278.32±82.11*208.22±45.19*17.33±6.38* MDS-RAEB-I8345.31±91.96*268.35±42.49*20.61±8.32* MDS-RAEB-II13403.22±95.48*311.19±45.66*24.85±8.67*

注：VEGF-C、COX-2、Cath-D在性别、年龄比较中，均P> 0.05。与MDS-RA组比较，*P<0.01。

3讨论

VEGF-C是近年来新发现的血管内皮生长因子家族成员，也是目前已知作用最强的促血管生成因子之一[2]，具有很强的血管生成和增强血管通透性的作用，能刺激肿瘤新生血管内皮细胞的增殖。VEGF-C在恶性肿瘤的生长、发展及转移中起着重要的调节作用，其表达的强弱直接影响肿瘤的生长、侵袭和转移。文献报道其在膀胱癌、胃癌、大肠癌、胰腺癌等多种恶性肿瘤细胞中均有表达[2]，且VEGF-C的表达还是结肠癌肝转移、胃癌肝转移及其他肿瘤发生转移的预测指标[3,4]。COX-2是催化膜磷脂花生四烯酸转化为前列腺素类物质的限速酶，是一种膜结合蛋白酶，存在于核膜和微粒体膜中，主要位于细胞质内及细胞核周[5]。正常生理情况下，大多数正常组织中表达极少，在多种恶性肿瘤组织中呈高表达，并参与多种疾病发生发展的病理过程[6]。环氧化酶有两种同工酶：COX-1和COX-2。 近年来研究发现，COX-2在肺癌、乳腺癌、消化道恶性肿瘤、前列腺癌等多种肿瘤中过度表达，通过多种机制参与肿瘤的发生、发展和转移[7]。Cath-D是一种相对分子量为34kD 的天门冬氨酸内切蛋白酶,为一种酸性溶酶体蛋白酶，广泛存在于各种组织细胞溶酶体和内体中，其主要作用为降解蛋白质[8]。Cath-D能溶解基底膜细胞外基质和结缔组织，促进肿瘤脉管生成，并刺激癌细胞生长，并参与肿瘤的侵袭和转移[9]。Cath-D在正常组织表达极少，而在恶性肿瘤呈高表达[10]。

本实验结果显示VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS患者血清中呈高表达，并且与MDS分型呈正相关性，三者协调一致的表达。COX-2能催化产生PGE2可刺激VEGF-C的产生，从而促进肿瘤血管生成[11]。也有观点认为两者通过配体-受体的相互作用，起到化学趋化的作用，促进肿瘤细胞以淋巴管内皮细胞为目标，引起淋巴道转移[12]。Cath-D可以提高VEGF-C的表达，而 Cath-D 可以通过VEGF-C的间接作用，诱导肿瘤淋巴管生成[13]，所以三者之间互相作用，共同参与了MDS的发生、发展。我们的研究发现，VEGF-C、COX-2、Cath-D在MDS组中的表达显著高于对照组的表达(均P<0.01)，且其在不同临床分型中的表达呈递增式表达。MDS具有较高的转化急性白血病(AML)的风险，约30%最终转化为AML[14]，所以目前除了骨髓移植治疗外，尚未发现更好的治疗方法。本文中的MDS发病平均年龄为53.2岁，与文献报道相符[15-16]，因此早期发现、诊断、治疗MDS为当前医学研究者的所希望看到的。综上所述，联合检测血清VEGF-C、COX-2、Cath-D的表达对MDS疾病的发展、治疗、预后有重要的作用。

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关键词：VEGF-C;COX-2;Cath-D;MDS

The expression of serum vascular endothelial growth factor-C,cyclooxygenase 2 and cathepsin-D in myelodysplastic syndromes patientsLUZhi-xian,WANGYa-ping，XIEMin-hu.(ClinicalLaboratory，WuxiNo.3Hospital，Wuxi214041，China)

Abstract:ObjectiveTo discuss the significance of serum vascular endothelialgrowth factor-C(VEGF-C),cyclooxygenase 2(COX-2) and cathepsin-D(Cath-D) in myelodysplastic syndromes(MDS) patients.MethodsSerum VEGF-C,COX-2 and Cath-D were detected by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) in 44 patients with MDS,to compare with 50 healthy people (Control group).ResultsSerum VEGF-C,COX-2 and Cath-D level in MDS patients group were all increased significantly compared with the control group (allP<0.01).To these markers,there were not significant difference in sex and age to the two groups，and the results of correlation analysis show that VEGF-C,COX-2 and Cath-D had a positive correlation with Clinical typing.ConclusionTo evaluate the advancing,treatment and Prognosis of MDS,There are more value to test the serum level of VEGF-C,COX-2 and Cath-D.

Key words:VEGF-C;COX-2;Cath-D;MDS

(收稿日期：2014-05-19)

作者简介：卢志贤(1976-)，男，副主任技师，主要从事临床检验工作研究。

文献标识码：A

中图分类号：R552

文章编号：1007-4287(2015)05-0780-03