长春市2013年手足口病病原学监测结果及分析

孙炳欣，许　爽，崔　薇，刘　红，孙　宇，吴　静*

(1.长春市疾病预防控制中心，吉林 长春130033;2.吉林省疾病预防控制中心，吉林 长春 130033)



长春市2013年手足口病病原学监测结果及分析

孙炳欣1，许爽2，崔薇1，刘红1，孙宇1，吴静1*

(1.长春市疾病预防控制中心，吉林 长春130033;2.吉林省疾病预防控制中心，吉林 长春 130033)

摘要：目的了解2013年长春市手足口病流行的病原学及分布特征，为今后手足口病防治工作提供参考依据。方法用实时定量PCR(Real-time PCR)法对临床诊断手足口病例标本进行核酸检测。结果2013年1月-12月共采集病例标本376例手足口病例的标本，阳性率为68.94%，96.05%的病例在6岁以下，高发期在5月-9月。结论2013年长春市手足口患者以小于6岁的儿童为主，其主要病原是柯萨奇6型(CA6)，其次是肠道病毒71型(EV71)。

(ChinJLabDiagn,2015,19:0762)

手足口病( hand,foot and mouth disease,HFMD)通常是由肠道病毒引起的儿童急性传染病，在人口密度较高的亚太地区广泛流行[1，2]。其主要临床特征为发热和手、足、口腔和臀部等部位出现皮疹，患者主要为学龄前儿童。绝大多数HFMD患者预后良好，但少数严重的患者会出现脑炎、心肌炎、肺水肿和急性弛缓性麻痹等症状，个别危重患儿可导致死亡[3]。

手足口病的致病原因主要是由病毒引起，病毒主要是小RNA病毒科肠道病毒属，包括柯萨奇病毒A(CVA)组的2,4,5,6,8,9,10,16型，柯萨奇病毒B(CVB)组的1,2,3,4,5型，肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)，埃可病毒(ECHO)等，其中以EV71及CA16最为常见[4]。目前根据国内手足口病监测结果的报道，各地均有非EV71非CA16型肠道病毒的检出，但其型别和所占比例却不清楚[5-7]。日本、芬兰等国曾发生由非EV71非CA16肠道病毒引起的手足口病疫情，因此深入了解并日常监测这部分肠道病毒，对手足口病的防治具有重要意义。

2013年，长春市在手足口病常规监测的基础上，对非EV71非CA16肠道病毒阳性标本送吉林省疾病预防控制中心病毒所进一步检测分型，并对检测结果进行分析。

1材料与方法

1.1　标本来源

2013年1月-12月长春市手足口病监测哨点医院及长春地区各县(市)区疾控中心采集的367例手足口病例的粪便，肛拭子，咽拭子标本。

1.2　方法

1.2.1标本的处理

粪便标本用含10%氯仿的生理盐水处理，震荡，2 000 rpm离心20 min后取上清进行RNA提取；其它标本充分震荡后直接用于RNA提取。

1.2.2核酸提取

使用QIAGEN 公司的QIAamp○RViral RNA Mini Kit 试剂盒提取RNA。

1.2.3Real-time PCR反应

使用江苏硕士生物科技有限公司的肠道病毒通用型/肠道病毒71型/柯萨奇A16型核酸检测试剂盒，在QIAGEN Rotor-Gene Q Real-time PCR仪上对标本进行检测同时分型。

1.2.4柯萨奇A6的检测

对检测结果为肠道病毒通用型阳性，肠道病毒71型与柯萨奇A16型阴性的标本一部分送吉林省疾病预防控制中心病毒所进一步分型检测，检测结果反馈给长春市疾病预防控制中心。另一部分标本使用江苏硕士生物科技有限公司的柯萨奇A6型核酸检测试剂盒，在QIAGEN Rotor-Gene Q Real-time PCR仪上对标本进行检测。

2结果

2.1　Real-time PCR检测结果

2013年共对367例手足口病例标本进行病原学检测，有253例核酸检测为阳性，总阳性率为68.94%。在253例核酸检测阳性病例中， CA6型阳性158例，占阳性检出的62.45%； EV71型阳性58例，占阳性检出的22.92%；CA16型阳性20例，占阳性检出的7.91%；其它型别肠道病毒阳性17例，占阳性检出的6.72%。

2.2　肠道病毒型别与手足口病重症的关系

367例手足口病病例中，18例为重症患者，无死亡病例。18例重症患者中，6例感染EV71，6例感

染CA6，1例感染CA16，还有5例感染其他型别肠道病毒。

2.3　病例的时间分布

2013年我们对长春地区手足口病进行了全年监测，经检测结果显示5月份病例数急剧增多，6月-8月份达到高峰，10月份病例数明显降低。从时间分布上分析长春地区2013年手足口病高发期在5月-9月份(见图1)。

图1　2013年长春市手足口病原体检测结果的时间分布

2.4　病例的年龄分布

在送检手足口病病例中，阳性病例的最小年龄为8个月，最大年龄为11岁。患者年龄主要集中在0岁-6岁，此年龄段病例数为243例，占病例总数的96.05%(243/253)(见表1)。

表1　病原体检测结果的年龄分布

2.5　病例的性别比例

采集的367例手足口病例中，男性225例，女性142例，男女比例1.58∶1。在核酸检测阳性的253例患者中，男性151例，女性102例，男女比例1.48∶1(见表2)。

表2　病原体检测结果的性别分布

3讨论

从长春市2013年手足口病病原体检测结果可以看出，其主要病原体是柯萨奇6型(CA6)，其次是肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇16型(CA16)。长春市2012年手足口主要病原是CA16，其次是EV71，还有非CA16、非EV71型肠道病毒核酸阳性的检出[8]。而长春市2011年1月-8月手足口病主要病原体是EV71，其次是CA16[9]。根据近三年长春市手足口病主要病原体的检测结果，说明CA6型肠道病毒已成为引起长春市手足口病除EV71型或CA16型病毒之外的又一主要病原体。2005年日本曾报道CA6和CA10的流行[10]。2008年新加坡手足口病暴发期间，检测到的主要流行病原体为EV71，其次为CA6和CA10[1]。2010年对上海部分地区440例手足口病的标本检测，结果显示引起手足病的肠道病毒主要为 EV71和CA16，其次为CA6和CA10[11]。目前，国内引起手足口病的主要肠道病毒为EV71和CA16，关于CA6型肠道病毒引起手足口病流行的报道较少，长春市2013年手足口病检测结果提示我们应加强对非EV71和非CA16型尤其是CA6型肠道病毒的监测。同时，应深入研究长春市手足口病的病原谱和主要病原体的分子流行病学特征，为手足口病的预测、预警和防治提供准确依据。

从手足口病发病时间看，2013年5月-9月份手足口病患者数量明显高于同年的其它月份。与2012年发病时间上相同[7]。分析CA6和EV71阳性病例的月份分布，发现CA6和EV71在流行月份上略有不同，EV71主要流行在5-8月，而CA6主要流行在5-9月。分析原因一方面可能由于长春市每年这几个月的气候条件较利于病毒生长繁殖，另一方面CA6可能存在较强的传播性。

结合临床特征来看，引起18例手足口病重症感染主要病原体是EV71和CA6，其次是其他肠道病毒型和CA16。提示我们除EV71外，CA6和其他型别的肠道病毒也能引起手足口病重症。感染CA6引起手足口病的临床症状值得关注。

从不同年龄患者的检测结果来看，主要以6岁以下儿童为主，发病数占总发病数的96.05%，其中1-3岁儿童发病数最高。男性发病数高于女性。这与长春市2012年检测结果一致[7]。说明6岁以下儿童最易感染手足口病，是肠道病毒主要的易感人群。应加大对该类人群的监测力度，做到早发现、早隔离、早治疗。同时应加强手足口病防病知识的宣传教育，建立良好的个人卫生习惯，从而采取有效的预防措施，以避免手足口病的大规模流行。

参考文献：

[1]Wu Y,Yeo A,Phoon MC,et al.The largest outbreak of hand,foot and mouth disease in Singapore in 2008:The role of enterovirus 71 and coxsackievirus A strains[J].Int J Infect Dis,2010,14(12):1076.

[2]Monto Ho,MD,Eng-Rin Chen,et al.An Epidemic of Enterovirus 71 Infection in Taiwan[J]．N Engl J Med,2003，41(13):929.

[3]翁育伟,严延生.肠道病毒EV71型研究进展[J].中国人兽共患病学报[J].2014,30(1):79.

[4]Blomqvist S,Klemola P,Kaijalainen S,et al.Co-crcirculation of coxsackieviruses A6 and A10 in hand,foot and mouth disease outbreak in Finland[J].J Clin Virol,2010,48(1):49.

[5]廖亦红,陈长河,何云,等.2011年-2012年龙岩市手足口病标本病毒检测结果分析[J].中国卫生检验杂志,2013,23(16):3263.

[6]邱惠芳,刘丹,刘青,等.浦东新区2012年手足口病检测结果分析[J].海军医学杂志，2013,34(3):176.

[7]姚光海,郭军,王丹,等.贵州省2013年上半年手足口病病原监测分析[J].中国卫生检验杂志，2014,24(3):428.

[8]崔薇,刘红,孙炳欣,等.长春市2012年手足口病病原学监测结果及分析[J].中国实验诊断学，2013,17(9):1721.

[9]乔凤娟，刘红，刘汉芬.实时荧光PCR技术检测手足口病EV71与CA 16病毒核酸[J].中国卫生工程学.2011,10(3):253.

[10]Yamashita T,Ito M,Taniguchi A,et al.Prevalence of coxsackievirus A5，A6，and A10 in patients with herpangina in Aichi Prefecture [J].Jpn J Infect Dis,2005，58(6):390.

[11]张晓玲,俞慧菊,余耀,等.2010年上海部分地区440例手足口病病例的病原谱及分子流行病学分析[J].微生物与感染,2011,6(4):214.

关键词：手足口病；PCR；CA6；EV71

The analysis of the etiological surveillance results of Hand-foot-mouth Disease in Changchun in 2013SUNBing-xin1,XUShuang2,CUIWei1,etal.(1.ChangchunCentreforDiseaseControlandPrevention,Changchun130033；2.JiLinProvinceCentreforDiseaseControlandPrevention)

Abstract:ObjectiveTo grasp the etiological characteristics and the distribution of HFMD in Changchun,and to provide a basis for further prevention and control of HFMD.MethodsSpecimens collected from clinically diagnosed HFMD cases were tested by real-time PCR.Results376 specimens were collected from January to December and the positive rate was 68.94%.96.05% of the cases were under 6 years old and the incidence peak occurred during May and September.ConclusionHFMD occurred mostly at the children under 6 years old.The major pathogen of HFMD was CA6,followed by EV71 in Changchun during 2013.

Key words:Hand foot mouth disease;PCR;CA6;EV71

(收稿日期：2014-05-06)

作者简介：孙炳欣(1979-)，女，研究生，长春市疾病预防控制中心主管检验技师，从事病毒监测工作。

文献标识码：A

中图分类号：R72

文章编号：1007-4287(2015)05-0762-03

*通讯作者

基金项目：吉林省卫生厅立项课题(2010ZC025)