越鞠丸对大鼠胃酸胃蛋白酶的影响

王雪，李文，唐丹，陆勇，刘霞，余海波

·药理毒理·

越鞠丸对大鼠胃酸胃蛋白酶的影响

王雪1，李文1，唐丹1，陆勇1，刘霞1，余海波2

目的：观察越鞠丸对大鼠胃酸、胃蛋白酶的影响。方法：将SD大鼠50只随机分为正常组、空白对照组、越鞠丸低剂量组、中等剂量组和高剂量组，每组10只。末次灌胃后收集胃液，测定各组大鼠胃液胃酸、胃蛋白酶浓度和胃蛋白酶活力的变化。结果：各实验组胃酸、胃蛋白酶浓度和胃蛋白酶活力均较正常组增加（P＜0.05），同时胃蛋白酶浓度和胃蛋白酶活力在低剂量组和高剂量组之间比较有显著差异（P＜0.05）。结论：越鞠丸通过提高胃液酸度、胃蛋白酶浓度及胃蛋白酶活力发挥行气解郁的生理功效，并且与高剂量相比，低剂量使用效力相当。

越鞠丸；胃酸；胃蛋白酶；胃蛋白酶活力

越鞠丸出自《丹溪心法》，是治疗郁证的代表方剂，由香附、川芎、苍术、栀子、神曲五味药组成，行气解郁，主治气、血、痰、火、湿、食之郁证，广泛适用于胸膈痞闷、脘腹肚胀、吞酸呕吐、饮食不消、胸脘刺痛、嗳气腹胀等症[1,2]。虽其临床应用广泛，但对其引起的生理改变机制研究报道甚少，本文报道其对大鼠胃酸、胃蛋白酶的影响，拟为越鞠丸的临床应用提供进一步的生理机制研究的理论支持，有利于越鞠丸的进一步推广使用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 SPF级SD大鼠50只，雌雄各半，体重为（180～220）g，由成都中医药大学动物实验中心提供。

1.1.2 药品 越鞠丸的准备方法：香附、苍术、川芎、栀子、神曲各10 g。先用乙醇提取， 挥发去酒精， 然后将全部药渣加水800 mL，普通方法煎煮，将提取液与煎煮液混合， 浓缩成所需浓度。

1.1.3 试剂 大鼠胃蛋白酶（PP）ELISA试剂盒，购自艾莱萨生物 （Elisa Biotech）公司，货号：EIA-3170。血红蛋白（CAS号：9008-02-0）、酪氨酸（CAS号：60-18-4）购于上海谱振生物科技有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 分组与给药 大鼠随机分为正常组、空白对照组、越鞠丸低剂量组、中等剂量组、高剂量组。空白对照组灌服生理盐水，越鞠丸低中高剂量分别为

10 g/kg 、20 g/kg 、30 g/kg体重，各组1次/d灌胃，每次用药体积均按1 mL/100g计算。连续灌胃14天。1.2.2 胃液标本的收集 于最后1次给药后2 h，禁食(不禁水)12 h，以25 mg．kg-1戊巴比妥钠麻醉大鼠，解剖上腹部，从幽门向胃插入一直径约为2 mm的塑料管，在胃靠近幽门球部结扎固定，以收集胃液，并由口腔经食管用塑料管插入前胃，与食管一起结扎，以pH 为7.0、35℃ 的生理盐水用蠕动泵按10 mL．h-1的速度进行胃内灌流，收集1小时流出液，供实验用。

1.2.3 指标观察与方法

（1）胃液酸度测定：采集到的胃液用pH测定仪直接测定pH值。

（2）胃蛋白酶含量测定：按照ELISA试剂盒说明书操作，测定胃蛋白酶含量。

（3）胃蛋白酶活性单位测定：参考文献[3]应用酪氨酸法测定胃蛋白酶的活性：先制备酪氨酸标准曲线，然后分别取酪氨酸对照液， 胃液各1 mL，置37℃ 水浴中， 保温5分钟，精密加入预热至37℃的血红蛋白试液5 mL，摇匀，立即计时，在37℃水浴中反应10分钟，立即精密加入5 % 三氯醋酸5 mL，摇匀，滤清，在275 nm处测定吸收度（同时分别做空白对照）。胃蛋白酶活力按CP90方法的公式计算即得：在规定的条件下每分钟能酶解血红蛋白生成1mg的酪氨酸为1个胃蛋白酶活力单位。

2 结果

2.1 越鞠丸对实验各组大鼠胃液酸度、胃蛋白酶浓度、胃蛋白酶活力的影响的比较，结果见表1。

表1 越鞠丸对各组大鼠胃液酸度、胃蛋白酶浓度、胃蛋白酶活力的影响比较

3 讨论

越鞠丸出自朱震亨《丹溪心法》，为治疗“ 六郁” 之名方。朱震亨认为： “气血冲和，万病不生，一有佛郁，诸病生焉。故人身诸病，多生于郁” ( 丹溪心法·六郁》)。郁者， 结聚而不得发越，当升者不得升，当降者不得降，当变化者不得变化。此为传化失常，六郁( 气、湿、痰、热、食、血) 之病作矣。郁证多缘于思虑不伸，而气先受病，故用越鞠丸总解诸郁。方中用香附快气，以调诸气的佛郁，苍术健脾燥湿以除痰， 神曲和中助化以消食，桅子清郁火，川芍开血分之郁结。朱震亨认为，凡郁在中焦，以苍术、川芍开提其气以升散之，并随证加入诸药。桅子“ 泻三焦火，清胃脘血，治热厥心痛，解郁热，行气结” 。气不郁则痰不生，用越鞠丸以开胃肠三焦之郁，从而使胸隔痞闷、脱腹胀痛、暖腐吞酸、恶心呕吐、饮食不消等症消失， 继而命名气、湿、痰、热、食、血“六郁” 得到宣发， 促进机体的新陈代谢，改善全身的病理状态，从而达到治疗消化不良、慢性胃炎、消化性溃疡、肝胆病症、心脑病症、肺病症、气血津液病症和经络肢体病症等诸多病症。胃酸是由胃腺壁细胞分泌，能激活胃蛋白酶原，使之成为有活性的胃蛋白酶，并为胃蛋白酶提供适宜的酸性环境，可助消化。胃蛋白酶是由胃腺主细胞分泌，胃液中的重要消化酶，它在酸性条件下能对蛋白质进行初步的消化分解，起到促消化的作用。胃酸和胃蛋白酶的分泌量反映了胃对食物的消化功能[4]。同时，不同的酶最适pH值不同，胃蛋白酶的最适pH值为1.8[5]，本实验与之相符。实验结果表明：越鞠丸能使实验组大鼠胃液氢离子浓度增加（即胃液酸度增加，pH值降低）、胃蛋白酶浓度增加以及胃蛋白酶活力增加，并且低剂量组胃蛋白酶浓度和胃蛋白酶活力与高剂量组比较均有差别，低剂量组胃蛋白酶活力最高。因此，通过该实验，可以初步认为越鞠丸通过提高胃液酸度、胃蛋白酶浓度及胃蛋白酶活力发挥行气解郁的生理功效，并且与高剂量相比，低剂量使用效力相当。

[1] 朱洪海.越鞠丸临床应用研究进展述略[J].实用中医内科杂志,2010,24(11):36.

[2] 潘洪峰,叶沐镕. 近十年越鞠丸的临床研究进展[N]. 贵阳中医学院学报,2007,29(1):28.

[3] 张利民,盛惟,刘宏,等.酪氨酸法测定大鼠胃蛋白酶实验方法的探讨[J].中国药品标准,2003,4(4):49.

[4] 蒙卡斯尔VB.医学生理学[M].北京: 科学出版社,1990:1281.

[5] 王继峰.生物化学[M].北京: 中国中医药出版社,2003:78.

（责任编辑：蒋淼）

Effect of YueJu Pill on gastric acid and pepsin in rats/

WANG Xue1, LI Wen1, TANG Dan1, LU Yong1, Liu Xia1, YU Hai-bo2// ( Chengdu University of Traditional Chinese medicine ,Chengdu 610075, Sichuan; 2. Mianyang Fulin Hospital, Mianyang 621000, Sichuan )

Objective:To observe the effect of YueJu Pill on gastric acid and pepsin in rats.Method:50 SD rats were randomly divided into normal group, control group, YueJu Pill low-dose group,YueJu Pill middle-dose group and YueJu Pill high-dose group. The contents of gastric acid, the contents of pepsin and pepsin activity of all groups were detected after the last intragastric administration.Result:Compared with normal group, the contents of gastric acid, the contents of pepsin and pepsin activity were obviously increased in experimental groups. And Signifcant differences of pepsin contents and pepsin activity was found between low-dose group and high-dose group.Conclusion:YueJu Pill plays physiological functions by increasing the gastric acid contents, pepsin contents and pepsin activity. In addition, low-dose YueJu Pill has the same effects with high-dose.

YueJu Pill; gastric acid; pepsin; pepsin activity

R 285.5

A

1674-926X(2015)02-015-02

成都中医药大学校基金(编号:ZRMS201253)

1.成都中医药大学，四川 成都 610075

2.绵阳市富临中心医院，四川 绵阳 621000

王雪(1981-)，女，医学硕士，研究方向：消化系统疾病的临床、基础研究

Tel:18708142297 Email:xuezaizaixian@163.com

李文（1982-），女，硕士，研究方向：中药药剂学 Tel:13982279194 Email:wander1210@sina.cn

2014-11-11