微波提取金线莲中总生物碱的应用研究

高岐

（广东省韶关学院化学与环境工程学院，广东韶关512005）

金线莲大多分布在我国东南沿海地区，具有保肝、降血糖、降血压等功效，在民间素有“药王”、“神草”、乌人参”等美称。金线莲富含有生物碱、多糖、黄酮类化合物等多种成分，常用的提取方法有加热回流提取法、水煎煮法、超临界CO2法等。本文利用微波加热技术，对金线莲中总生物碱进行了微波提取，讨论了料液比、微波提取时间、微波提取功率等因素对提取结果的影响，确定了最佳的提取条件。与常规的回流提取法对照，测定速度提高了数十倍，并大大简化了操作步骤，提高了分析效率，结果令人满意。

1 主要仪器与试剂

1.1 主要仪器

美的牌KJ23C-AN2型微波炉：广东美的微波炉制造有限公司；722S型可见分光光度计：上海棱光技术有限公司；电热恒温水浴锅（HH-SZ1—6）：北京长安科学仪器厂。

1.2 主要试剂

盐酸麻黄碱对照品（购于中国药品生物制品检定所，批号：171242-200405）；氯仿；柠檬酸；柠檬酸钠；溴百里香酚蓝。以上试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。

pH5.4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液：称取柠檬酸20.01 g，水配制并定容 1000 mL，柠檬酸三钠29.41 g，水配制并定容 1000 mL，以1∶2体积混合。

0.1%溴百里香酚蓝：称取溴百里香酚蓝0.1 g，用乙醇定容100 mL。

金线莲样品：（购于韶关药业集团公司同康连锁药店）将金线莲用蒸馏水洗净后，在110℃下干燥2 h后，将其研磨成粉，过60目筛，置于干燥器中保存备用。

2 实验方法

2.1 标准曲线的绘制

精密称取盐酸麻黄碱对照品0.0200g，置于100mL容量瓶中，加水定容至刻度，得含盐酸麻黄碱浓度为200 μg/mL对照品溶液，精密量取盐酸麻黄碱对照品标准溶液 1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL 分别置于干燥的分液漏斗中，分别加水至5.00 mL，再加入5.00 mL pH5.4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，1.00 mL 0.1%溴百里香酚蓝溶液，氯仿10.00 mL，振摇混匀。精确量取萃取液2.00 mL于10 mL容量瓶中，用氯仿定容至刻度、摇匀。于722S分光光度计413 nm处测定其吸光度，同时做空白，以取样量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘出标准曲线（见图）。

图1 标准曲线Fig.1 Standard curve

2.2 回流法测定

精确称取金线莲样品5.0 g左右，加入蒸馏水100 mL，于85℃回流提取2 h后，过滤。滤液定容于100 mL容量瓶中，精确移取滤液10.00 mL，置于干燥的分液漏斗中，其它操作同2.1，由标准曲线计算样品中生物碱含量。

2.3 微波法测定

准确称取一定量的金线莲样品，置于聚四氟乙烯消解罐中，加入一定量蒸馏水、密封，放入微波炉中，根据设置的功率和时间，提取一定时间后，取出，冷却至室温，开罐，过滤，其它操作同2.2，由标准曲线计算样品中生物碱含量。

3 结果与讨论

3.1 正交试验

以料液比、微波功率、微波时间为影响因素，提取量为指标，进行L9（33）正交试验，讨论了因素对提取结果的影响。其因素—水平及正交试验结果见表1及表2。

表1 正交试验方案Table 1 Orthogonal experimentaldesign

表2 正交试验结果Table 2 Orthogonal experiment results

由表2极差分析可知，各因素影响提取量的程度大小顺序为A＞B＞C，即最大影响因素是料液比，依次是提取功率，提取时间。同时，根据正交试验结果分析可知最佳提取条件为 A1、B3、C2，即料液比 1 ∶15，提取功率616 W，提取时间6 min。

3.2 回流提取与微波提取结果的比较

在最佳条件下，做微波提取实验，并与回流提取结果对照，见表3。

从表3可以看出，微波提取法有明显的优点，其提取时间大大缩短，约为回流法的1/20，结果令人满意。

表3 微波提取与回流提取结果的比较（n=11，置信度为0.95）Table 3 Comparison of microwave extraction and reflux extraction results（n=11，the confidence level is 0.95）

4 结论

微波提取不仅速度快，提取时间短、操作简便，减少样品和溶剂的消耗量，节约了人力、物力，同时还减少对环境的污染和环境的干扰，与常规的加热回流法相比，更适应现代科技发展对化学工艺的要求。由于微波加热是里外同时进行，提取温度低，样品受热均匀，不会糊化，有效成分不受分解，从而提高产品的产量和质量。该法不失为是一种快速、高效、节能的新型提取工艺，有着比常规方法更好的优势和应用前景。

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