紫癜颗粒定性鉴别研究*

张 颖，赵，乔菊久，尤献民

（辽宁省中医药研究院，辽宁 沈阳 110034）

紫癜颗粒由黄芪、大黄、太子参、阿胶和甘草等9味中药组方，临床用于治疗免疫性血小板减少性紫癜。为快速、有效控制药品质量，笔者建立了处方中黄芪、大黄、甘草和当归的薄层色谱鉴别方法，现报道如下。

1 仪器与试药

Goodsee－Ⅰ型薄层色谱分析仪（上海科哲生化科技有限公司）；YOKO－XR显色加热器（武汉药科新技术开发公司）；3102型电子分析天平（天津市天马仪器厂）。黄芪甲苷对照品（批号为110781－200613），大黄（掌叶）对照药材（批号为 121249－201003），大黄酸对照品（批号为 110757－200606），甘草次酸对照品（批号为110723－200612），当归对照药材（批号为120927－201014），藁本内酯对照品（批号为 111737－201103），均购自中国药品食品检定研究院；供试品紫癜颗粒（辽宁省中医药研究院药学室，批号分别为 20120801，20120802，20120803）；硅胶 G（ 批号为20110608），硅胶GF254（批号为20100702），购自青岛海洋化工厂；所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。

2 方法与结果

2．1 黄芪

取本品10 g，研细，加甲醇100 mL，超声提取30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水50 mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次50 mL，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次50 mL，弃去氨试液，再用50 mL正丁醇饱和水洗涤1次，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取不含黄芪的阴性样品，同法制备阴性对照品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中国药典（一部）》附录Ⅵ B]试验，吸取上述3种溶液各5～10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－水（15∶40∶22∶10）10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，置紫外光灯（365 nm）下检视，显相同颜色的荧光斑点，且阴性对照品溶液无干扰（见图1）。

图1 黄芪的薄层色谱图

2．2 甘草[1]

取本品10 g，研细，加氨水5 mL与80%乙醇100 mL回流提取 30 min，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加 2．5 mol／L硫酸的50%乙醇溶液100 mL使溶解，回流提取1 h，放冷，用石油醚（30～60℃）提取2次，每次50 mL，合并石油醚液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取不含甘草的阴性样品，同法制备阴性对照品溶液另取甘草次酸对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各10～15 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（30～60℃）－乙酸乙酯－丙酮 －甲酸（35 ∶5 ∶5 ∶0．5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，且阴性对照品溶液无干扰（见图2）。

2．3 大黄[2]

取本品10 g，研细，加甲醇100 mL，超声30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，再加盐酸2 mL，加热回流30 min，立即冷却，用乙醚分2次振摇提取，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1 mL使溶解，作为供试品溶液。取不含大黄的阴性样品，同法制备阴性对照品溶液。另取大黄对照药材0．5 g，同法制成对照药材溶液。再取大黄酸对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述4种溶液各5～10 μL，分别点于同一硅胶H薄层板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏后检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材、对照品溶液色谱相应位置上显相同的红色斑点，且阴性对照品溶液无干扰（见图3）。

图3 大黄的薄层色谱图

图2 甘草的薄层色谱图（254nm）

2．4 当归

取本品100 g，研细，加水500 mL，水蒸气蒸馏，收集蒸馏液约150 mL，用乙醚提取2次，每次30 mL，合并乙醚提取液，挥干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液。取不含当归的阴性样品，同法制备阴性对照品溶液。另取当归对照药材1．0 g，加乙醚20 mL，超声处理10 min，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为对照药材溶液。再取藁本内酯对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述三种溶液各 5～10 μL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以甲苯－乙酸乙酯（30∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材、对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，且阴性对照品溶液无干扰（见图4）。

图4 当归的薄层色谱图

3 讨论

用薄层色谱法鉴别制剂中的黄芪、大黄、甘草，薄层图谱清晰，专属性强，阴性对照无干扰，因此该法可定性控制该制剂的质量。由于当归药材在成品中含量较低，故在提取过程中采用水蒸气蒸馏，取样量增加到100 g，蒸馏液再用乙醚进行提取，收集到的乙醚液挥干，残渣加乙酸乙酯复溶，作为供试品溶液。展开剂先后试用了正己烷－乙酸乙酯（4∶1）、甲苯－乙酸乙酯（30∶1），石油醚（30～60℃）－乙酸乙酯（4∶1）、环己烷 －二氯甲烷－乙酸乙酯 －甲酸（4∶1∶1∶0．1），根据分离效果考虑，最后确定以甲苯－乙酸乙酯（30∶1）为展开剂。

[1]王光函，赵，邹桂欣．化胃舒颗粒的定性鉴别研究[J]．时珍国医国药，2012，23（8）：1 978 － 1 979．

[2]国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）[M]．北京：中国医药科技出版社，2010：22．