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苍耳草的薄层鉴别研究

2014-05-30刘婷王仕平

知识窗·教师版 2014年9期
关键词:薄层色谱绿原酸

刘婷 王仕平

摘要:本文通过实验,采用薄层色谱法,对不同产地的10批苍耳草药材进行了系统的定性分析,研究和建立了苍耳草的薄层色谱方法。这种方法灵敏、准确、专属性强、重复性好,可用于苍耳草的质量控制。

关键词:苍耳草 薄层色谱 绿原酸

苍耳草为菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patrin.干燥地上部分具有祛风散热、除湿解毒的功效,用于治疗感冒、头风、头晕、鼻渊、目赤、风湿痹痛、拘挛麻木、目翳、风癞、疔肿、热毒疮疡、皮肤瘙痒,痢疾等症状。全草含苍耳苷(strumaroside)、隐苍耳内酯(xanthinin)、苍耳内酯(xanthumin)、8-(3-异戊烯基)-5,7,3,4-四羟基黄酮、咖啡酸(caffeic acid)、1,4-二咖啡酰奎宁酸、β-谷甾醇、豆甾醇、二十八醇、β-香树脂醇等。苍耳草分布在全国各地,山东、江西宜春、湖北、江苏及安徽等都是它的主产区。该品种类型多收载于各地方的药材标准中,如《江西省中药材标准》1996年版。为了更有效地控制苍耳草的质量,笔者参考了相关文献,研究和建立了苍耳草的TLC鉴别法。

一、仪器与试药

仪器包括BP211D Sartorius電子天平(十万分之一,由德国赛多利斯公司制造);FA2004电子天平(万分之一,由上海天平仪器公司制造);KH-250DB型数控超声波清洗器(由昆山禾创超声仪器有限公司制造);CAMAG紫外观测箱(254 nm/365 nm)(由瑞士卡玛公司制造);929型薄层铺板仪。

试药包括绿原酸对照品(由中国食品药品检定研究院提供,批号是110753-201214,含量为96.6%);苍耳草对照药材(自采,经本草考证为菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patrin的干燥地上部分);苍耳草药材(自采或市场购买);硅胶GF254(由青岛海洋化工厂生产);聚酰胺薄膜(由台州市路桥私家生化塑料厂生产);其他试剂均为分析纯。

二、方法与结果

第一步,取苍耳草粉末(过三号筛)1g,置具塞锥形瓶中,加50%甲醇25 mL,超声(功率250 W,频率40 kHz)30 min,进行过滤,然后滤液蒸干,残渣加50%甲醇1mL进行溶解,作为供试品溶液。另外,取苍耳草对照药材粉末(过三号筛)约1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述对照药材溶液、供试品溶液、空白试剂溶液各2μL,分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(16:4:1)为展开剂,展开,取出晾干,在紫外光灯(254 nm/365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显现相同颜色的荧光斑点,空白试剂无影响(见图1)。

1~5.供试品;6.对照药材;7~9.供试品;10.空白;11~12.供试品

图1 薄层色谱图

第二步,取苍耳草粉末(过三号筛)2g,置具塞锥形瓶中,加乙醚25 mL,超声(功率250 W,频率40 kHz)20 min,进行过滤,滤液低温挥至约1 mL,作为供试品溶液。另外,取苍耳草对照药材粉末(过三号筛)约2 g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述对照药材溶液、供试品溶液、空白试剂溶液各2 μL,分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上,以环己烷-乙酸乙酯-甲酸(10:2:0.2)为展开剂,展开,取出晾干,分别在日光和紫外光灯(254 nm/365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显现相同颜色的斑点或荧光斑点,空白试剂无影响(见图2)。

1~5.供试品;6.对照药材;7~9.供试品;10.空白;11~12.供试品

图2 薄层色谱图

第三步,取苍耳草粉末(过三号筛)1g,置具塞锥形瓶中,加石油醚(30℃~60℃)25mL,超声10 min(功率250 W,频率40 kHz),放冷,弃去石油醚液,药渣挥干,残渣加稀盐酸1mL与乙酸乙酯20 mL,摇匀,超声30 min,进行过滤,滤液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取苍耳草对照药材粉末1g,同法制成对照药材溶液。取绿原酸对照品适量,加甲醇制成2 mg·mL-1的溶液,作为对照品溶液。按照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述对照药材溶液、对照品溶液、供试品溶液、空白试剂溶液各2μL,分别点于同一聚酰胺薄膜上,以醋酸为展开剂,展开,取出晾干,在紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品和对照药材色谱相应的位置上,分别显现相同颜色的荧光斑点,空白试剂无影响(见图3)。

4.绿原酸;5.对照药材 7.空白(A图);其他为供试品

图3 薄层色谱图

三、讨论

在苍耳子的薄层鉴别中,有的文献采用芦丁作为对照品。但是,在本文中,笔者采用了对照药材和绿原酸对照品作为参照。

在第一个试验中,笔者分别考察了甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(16:4:1)、正丁醇-冰醋酸-水(4:1: 5)上层溶液、乙酸乙酯-丁酮-甲醇-水(6:2:1:1)展开系统;在第二个试验中,笔者分别考察了环己烷-乙酸乙酯-甲酸(10:2:0.2)和正己烷-乙酸乙酯(9:1)展开系统;在第三个试验中,笔者分别考察了乙酸丁酯-甲酸-水(7:2.5:2.5)上层溶液、乙酸乙酯-甲醇-甲酸(8:1:1)、醋酸展开系统,并同时采用了硅胶GF254薄层板及聚酰胺薄膜试验。

结果表明:在第一个实验中,以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(16:4:1)展开的效果最好;在第二个实验中,以环己烷-乙酸乙酯-甲酸(10:2:0.2)为展开系统的效果最好;在第三个实验中,采用醋酸为展开剂,聚酰胺薄膜展开的效果最好。

综上所述,本文采用了两种不同极性的溶剂提取后展开,能够很好地鉴别出苍耳草的不同成分,可作为鉴别苍耳草药材的方法,同时也可以作为以苍耳草为原料,采用不同提取工艺制剂的鉴别方式。

参考文献:

[1]江西省卫生厅.江西省中药材标准(1996年版)[M].南昌:江西科学技术出版社,1996.

[2]南京中医药大学.中药大辞典(第二版)[M].上海:上海科学技术出版社,2006.

[3]沈连生.中药图典[M].北京:华夏出版社,2006.

[4]孟繁智.新编中草药图谱大典[M].贵州:贵州科技出版社,2003.

[5]朱圣和.中国药材商品学[M].北京:人民卫生出版社,1990.

[6]中华人民共和国药典编委会.中国药典(2010年版)[M]. 北京:中国医药科技出版社,2010.

[7]尹靖先,邓晓鸿,车晓彦等.苍耳子的薄层层析鉴别研究[J].华西药学杂志,2005,(1).

[8]杨柳,吴金雄,许舜军等.苍耳子中酚酸类化合物的鉴别及绿原酸的含量测定[J].中国实验方剂学,2011, (19).

[9]吴建伟,付小梅,谭道朋等.苍耳子药材薄层鉴别与含量测定[J].江西中医药,2011,(4).

[10]尹靖先,车晓彦,邓晓鸿.苍耳子质量标准研究[J].成都中医药大学学报,2004,(3).

(作者单位:刘婷 宜春职业技术学院;王仕平 宜春市食品药品检验所 )

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