苍耳草的薄层鉴别研究

刘婷 王仕平

摘要：本文通过实验，采用薄层色谱法，对不同产地的10批苍耳草药材进行了系统的定性分析，研究和建立了苍耳草的薄层色谱方法。这种方法灵敏、准确、专属性强、重复性好，可用于苍耳草的质量控制。

关键词：苍耳草 薄层色谱 绿原酸

苍耳草为菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patrin.干燥地上部分具有祛风散热、除湿解毒的功效，用于治疗感冒、头风、头晕、鼻渊、目赤、风湿痹痛、拘挛麻木、目翳、风癞、疔肿、热毒疮疡、皮肤瘙痒，痢疾等症状。全草含苍耳苷（strumaroside）、隐苍耳内酯（xanthinin）、苍耳内酯（xanthumin）、8-（3-异戊烯基）-5，7，3，4-四羟基黄酮、咖啡酸（caffeic acid）、1，4-二咖啡酰奎宁酸、β-谷甾醇、豆甾醇、二十八醇、β-香树脂醇等。苍耳草分布在全国各地，山东、江西宜春、湖北、江苏及安徽等都是它的主产区。该品种类型多收载于各地方的药材标准中，如《江西省中药材标准》1996年版。为了更有效地控制苍耳草的质量，笔者参考了相关文献，研究和建立了苍耳草的TLC鉴别法。

一、仪器与试药

仪器包括BP211D Sartorius電子天平（十万分之一，由德国赛多利斯公司制造）；FA2004电子天平（万分之一，由上海天平仪器公司制造）；KH-250DB型数控超声波清洗器（由昆山禾创超声仪器有限公司制造）；CAMAG紫外观测箱（254 nm/365 nm）（由瑞士卡玛公司制造）；929型薄层铺板仪。

试药包括绿原酸对照品（由中国食品药品检定研究院提供，批号是110753-201214，含量为96.6%）；苍耳草对照药材（自采，经本草考证为菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patrin的干燥地上部分）；苍耳草药材（自采或市场购买）；硅胶GF254（由青岛海洋化工厂生产）；聚酰胺薄膜（由台州市路桥私家生化塑料厂生产）；其他试剂均为分析纯。

二、方法与结果

第一步，取苍耳草粉末（过三号筛）1g，置具塞锥形瓶中，加50%甲醇25 mL，超声（功率250 W，频率40 kHz）30 min，进行过滤，然后滤液蒸干，残渣加50%甲醇1mL进行溶解，作为供试品溶液。另外，取苍耳草对照药材粉末（过三号筛）约1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述对照药材溶液、供试品溶液、空白试剂溶液各2μL，分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（16：4：1）为展开剂，展开，取出晾干，在紫外光灯（254 nm/365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显现相同颜色的荧光斑点，空白试剂无影响（见图1）。

1～5.供试品；6.对照药材；7～9.供试品；10.空白；11～12.供试品

图1 薄层色谱图

第二步，取苍耳草粉末（过三号筛）2g，置具塞锥形瓶中，加乙醚25 mL，超声（功率250 W，频率40 kHz）20 min，进行过滤，滤液低温挥至约1 mL，作为供试品溶液。另外，取苍耳草对照药材粉末（过三号筛）约2 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述对照药材溶液、供试品溶液、空白试剂溶液各2 μL，分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲酸（10：2：0.2）为展开剂，展开，取出晾干，分别在日光和紫外光灯（254 nm/365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显现相同颜色的斑点或荧光斑点，空白试剂无影响（见图2）。

1～5.供试品；6.对照药材；7～9.供试品；10.空白；11～12.供试品

图2 薄层色谱图

第三步，取苍耳草粉末（过三号筛）1g，置具塞锥形瓶中，加石油醚（30℃～60℃）25mL，超声10 min（功率250 W，频率40 kHz），放冷，弃去石油醚液，药渣挥干，残渣加稀盐酸1mL与乙酸乙酯20 mL，摇匀，超声30 min，进行过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取苍耳草对照药材粉末1g，同法制成对照药材溶液。取绿原酸对照品适量，加甲醇制成2 mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液。按照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述对照药材溶液、对照品溶液、供试品溶液、空白试剂溶液各2μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出晾干，在紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显现相同颜色的荧光斑点，空白试剂无影响（见图3）。

4.绿原酸；5.对照药材 7.空白（A图）；其他为供试品

图3 薄层色谱图

三、讨论

在苍耳子的薄层鉴别中，有的文献采用芦丁作为对照品。但是，在本文中，笔者采用了对照药材和绿原酸对照品作为参照。

在第一个试验中，笔者分别考察了甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（16：4：1）、正丁醇-冰醋酸-水（4：1： 5）上层溶液、乙酸乙酯-丁酮-甲醇-水（6：2：1：1）展开系统；在第二个试验中，笔者分别考察了环己烷-乙酸乙酯-甲酸（10：2：0.2）和正己烷-乙酸乙酯（9：1）展开系统；在第三个试验中，笔者分别考察了乙酸丁酯-甲酸-水（7：2.5：2.5）上层溶液、乙酸乙酯-甲醇-甲酸（8：1：1）、醋酸展开系统，并同时采用了硅胶GF254薄层板及聚酰胺薄膜试验。

结果表明：在第一个实验中，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（16：4：1）展开的效果最好；在第二个实验中，以环己烷-乙酸乙酯-甲酸（10：2：0.2）为展开系统的效果最好；在第三个实验中，采用醋酸为展开剂，聚酰胺薄膜展开的效果最好。

综上所述，本文采用了两种不同极性的溶剂提取后展开，能够很好地鉴别出苍耳草的不同成分，可作为鉴别苍耳草药材的方法，同时也可以作为以苍耳草为原料，采用不同提取工艺制剂的鉴别方式。

参考文献：

[1]江西省卫生厅.江西省中药材标准（1996年版）[M].南昌：江西科学技术出版社，1996.

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[9]吴建伟，付小梅，谭道朋等.苍耳子药材薄层鉴别与含量测定[J].江西中医药，2011，（4）.

[10]尹靖先，车晓彦，邓晓鸿.苍耳子质量标准研究[J].成都中医药大学学报，2004，（3）.

（作者单位：刘婷 宜春职业技术学院；王仕平 宜春市食品药品检验所 ）