高效液相色谱法测定复方锌布颗粒中马来酸氯苯那敏含量

黄玉昌 ，曾庆伟，吴芳花，邝美婷

（1．广东省河源市食品药品检验所，广东 河源 517000； 2．广东医学院，广东 东莞 523808）

复方锌布颗粒主要成分是葡萄糖酸锌、布洛芬和马来酸氯苯那敏。该药在临床上为感冒用药类非处方药，用于治疗普通感冒或流行性感冒引起的发热、头痛、鼻塞等症[1]。其中，马来酸氯苯那敏为抗组胺药，能减轻由感冒或流感引起的鼻塞、流涕、打喷嚏等症状。该药的现行检验依据为国家药品标准[2]，用紫外可见分光光度法测定马来酸氯苯那敏含量[3]。但在实际操作中发现，试验中所用的试剂苯有挥发性、高毒性与致癌性，一旦吸入，易致呼吸困难，对人体危害极大；且试验流程复杂，花费时间长，测得的试验结果偏差也大。笔者采用高效液相色谱法对该药中的马来酸氯苯那敏含量进行测定，结果样品处理简单，检测方法灵敏度高、误差小、重复性好、专属性强。

1 仪器与试药

LC－20AT型高效液相色谱仪(日本岛津，L20114916219AE)，SPD－M20A型检测器(L20154908803AE)，CP225D型电子分析天平(51061464)，Intersil ODS－SP型(十八烷基硅烷建合硅胶柱，C ／N:5020－02746，S／N:OAI92654）。马来酸氯苯那敏对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100047－200606）；复方锌布颗粒（海南先声药业有限公司，规格为每包含葡萄糖酸锌0．1 g，布洛芬 0．15 g，马来酸氯苯那敏 2 mg，批号分别为 09－120701，09－120706，09－120710）；乙腈（美国 Honeywell Burdick＆ Jackson）为色谱纯，其余试剂均为分析纯；纯化水。

2 方法与结果

2．1 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱：十八烷基硅烷建合硅胶柱(250 mm×4．6 mm，5 m)；流动相：磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢铵 11．5 g，加水适量使溶解，加磷酸 1 mL，用水稀释至 1 000 mL）－乙腈（80∶20）；流速：1．0 mL ／min；柱温：40 ℃ ；检测波长：262 nm；取样量：10 μL。精密量取对照品溶液10 μL注入高效液相色谱仪，理论板数按氯苯那敏峰计算为13 892，与马来酸峰分离度大于1．5。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2．2 溶液制备

取马来酸氯苯那敏对照品适量，精密称定，置容量瓶中，加流动相溶解并稀释制成质量浓度为0．08 g／L的对照品溶液，摇匀，即得对照品溶液。精密称取本品适量（约相对于马来酸氯苯那敏2 mg），置25 mL容量瓶中，加流动相适量，振摇使马来酸氯苯那敏溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。按处方比例取除马来酸氯苯那敏外的其余组分，按供试品制备工艺和供试品溶液制备方法，制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性试验：按处方比例，制成缺马来酸氯苯那敏的阴性对照品溶液，滤过，精密量取10 μL注入高效液相色谱仪，测定，结果见图1 A。结果表明，阴性样品、流动相在马来酸氯苯那敏色谱相应位置上无干扰峰出现，说明处方中其他成分对测定结果无影响，故本品用此色谱条件测定无干扰。

线性关系考察：精密称取马来酸氯苯那敏对照品适量，用流动相溶解并稀释成质量浓度为0．8 g／L的对照品溶液。分别精密量取适量，用流动相稀释成质量浓度分别为 0．008，0．04，0．08，0．4，0．8 g／L 的对照品溶液。分别精密量取上述溶液各 10 μL 注入高效液相色谱仪，按拟订色谱条件分别测定，以峰面积（Y）对质量浓度（X）作线性回归，得回归方程 Y＝8．9×106X－8 834．7，r＝1．000 0。结果表明，马来酸氯苯那敏质量浓度在0．008 415～0．841 5 g／L范围内与峰面积呈良好线性关系。

精密度试验：取线性试验项下质量浓度为0．008 g／L的对照品溶液，连续进样6次。结果的 RSD为0．04%，表明仪器精密度良好。

重复性试验：取同一批（批号为09－120706）样品 6份，照2．2项下方法制备供试品溶液，依法测定其含量。结果含量平均值为98．82%，RSD为0．74%，表明方法重复性良好。

稳定性试验：取上述同一供试品溶液（质量浓度约为0．08g／L），分别于 0，1，4，8，16，24 h 时在拟订色谱条件下进样测定。结果峰面积值基本无变化，RSD为0．64%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

加样回收试验：取已知含量的样品（批号为09－120706）9份，分别精密加入对照品适量，按拟订色谱条件测定，计算回收率。结果见表1。

表1 马来酸氯苯那敏加样回收试验结果（n＝9）

2．4 样品含量测定

按拟订方法对3个批次的样品进行含量测定，每个样品平行测定 2次，取平均值。结果批号为 09－120701，09－120706，09－120710的3批样品中马来酸氯苯那敏含量分别为标示量的97．0% ，97．8% ，98．0% 。

3 讨论

取马来酸氯苯那敏（0．08 g／L）对照品溶液在 200～300 nm波长内扫描，结果在262 nm波长处有最大吸收，且吸收光谱曲线较平滑，参考文献[3]，选择262 nm作为测定波长。试验过程中发现所用高效液相色谱仪对温度较敏感，在天气转冷情况下，柱压增大，仪器警示报停，阻碍试验继续进行，故本研究提高柱温至40℃，同时通过对比各种柱温，结果无显著性差异。用超声、振摇等不同方式对样品进行提取，结果差异无显著性，参考文献[3－6]，选择振摇提取方式。本研究用磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢铵11．5 g，加水适量使溶解，加磷酸1 mL，用水稀释至1 000 mL）－乙腈（80∶20）代替原来的氯仿作为提取溶剂，试剂更环保，提取步骤简单，结果更准确可靠。

参考文献：

[1]吴 琳．复方锌布颗粒剂扑尔敏含量测定方法的比较[J]．中华中西医学杂志，2008(8):75－76．

[2]WS－422(X－355)－2002，国家食品药品监督管理局药品标准[S]．

[3]国家药典委员会．中华人民共和国药典(二部)[M]．北京：中国医药科技出版社，2010:48－50．

[4]孙素芳，刘国瑞，王 ，等．马来酸氯苯那敏片的HPLC测定[J]．中国医药工业杂志，2006，37（9）：627 － 629．

[5]徐 燕，刘 峰，徐晓霞，等．以HPLC测定马来酸氯苯那敏含量的方法中马来酸峰及氯苯那敏峰定位的问题[J]．四川生理科学杂志，2008，30(3):110 － 111．

[6]马春婷，李红艳，邓智怀.高效液相色谱法测定咳特灵片中马来酸氯苯那敏含量[J]．中国药业，2008，17（15）：39 －40．