二母安嗽片质量标准研究

金 瑜

(常熟市建发医药有限公司，江苏 常熟 215500)



二母安嗽片质量标准研究

金 瑜

(常熟市建发医药有限公司，江苏 常熟 215500)

目的：对二母安嗽片进行质量标准研究。方法：采用薄层色谱法对处方中的知母、款冬花进行定性鉴别，采用HPLC法测定罂粟碱含量。结果：在薄层色谱中均可检出知母、款冬花的特征斑点；罂粟碱在0.082 5～0.742 5μg范围内线性关系良好，平均回收率为98.7%，RSD为2.6%。结论：该方法简便可行、重现性好，能有效控制该制剂的质量。

二母安嗽片；知母；款冬花；TLC；罂粟碱；HPLC

二母安嗽片是由知母、 罂粟壳、款冬花等九味中药制成的片剂，具有清肺化痰、止嗽定喘之效，用于虚劳久嗽、春秋举发、咳嗽痰喘、骨蒸潮热、音哑声重、口燥舌干及痰涎壅盛。为有效控制本品质量，保证临床疗效，本文采用了薄层色谱法对制剂中的知母、款冬花进行定性鉴别，并采用高效液相色谱法对其所含的罂粟碱进行含量测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器

TSP-P100泵，TSP-UV100检测器，ANASTAR Chromatography Data System工作站,100型超声波清洗器(江苏省昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试药

盐酸罂粟碱对照品、知母、款冬花对照药材(中国食品药品检定研究院)；二母安嗽片(天津中新药业集团有限公司中药制药厂)；高效硅胶G板(烟台大学生物科学与工程研究所)；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 知母薄层鉴别

2.1.1 供试品溶液的制备 取样品粉末12g，加乙醇20mL，加热回流40min，滤过，取续滤液10mL，加盐酸1mL，加热回流1h，浓缩至5mL，加水10mL，用20mL苯萃取，萃取液浓缩至2mL，作为供试品溶液。

2.1.2 对照药材溶液的制备 取知母对照药材粉末2g，按“2.1.1”项下供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。

2.1.3 薄层色谱鉴别[1]依照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮(9∶1)为展开剂，展开，取出晾干，置365nm荧光处观察。供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰作用。

2.2 款冬花的薄层鉴别

2.2.1 供试品溶液的制备 取本品5g，加甲醇10mL，超声提取30min，滤过，滤液浓缩至1mL，作为供试品溶液。

2.2.2 对照药材溶液的制备 取款冬花对照药材1g，按供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。

2.2.3 薄层色谱鉴别 照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(10∶3∶3)的下层溶液为展开剂，展开，取出晾干，用氨水熏蒸。供试品色谱与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰作用。

2.3 盐酸罂粟碱的含量测定[2-4]

2.3.1 色谱条件 色谱柱：YMC-Pack ODS-A(150mm×4.6mm ,5μm)；流动相：乙腈-0.01M 磷酸二氢钠溶液(用H3PO4调pH至3.0)(18∶82)；柱温30℃；检测波长：254nm；流速：1.0mL/min。

2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取盐酸罂粟碱对照品2.29mg，至25mL容量瓶中，甲醇溶解，定容，精密吸取1.5mL，至50mL容量瓶中，甲醇定容，制得2.75μg/mL的对照品溶液。

2.3.3 供试品溶液的制备 取本品粉末约2.0g精密称定，加水50mL溶解，超声5min，滤过，取续滤液25mL，置分液漏斗中，加浓氨水10mL，加氯仿30mL，振摇提取四次，合并氯仿液，蒸干，残渣用乙醇转溶至2mL容量瓶中，定容，用0.45μm有机系滤膜滤过，作为供试品液。

2.3.4 阴性对照试验 取缺味罂粟壳制成的二母安嗽片，按“2.3.3”方法制备阴性样品液，二母安嗽片的供试品溶液、对照品溶液、阴性样品液分别进样测定，结果见图1。

图1 盐酸罂粟碱(对照品A)、样品(B)、阴性样品(C)HPLC色谱

2.4 方法学考察

2.4.1 标准曲线的制备 分别吸取对照品液1μL、3μL、5μL、7μL、9μL，进样，按上述色谱条件测定，以对照品的进样量(μg)为横坐标，盐酸罂粟碱的峰面积为纵坐标作标准曲线，得回归方程Y=-65 097X+2 947.9(r=0.999 5)，表明盐酸罂粟碱在0.082 5～0.742 5μg内线性关系良好。

2.4.2 精密度试验 吸取盐酸罂粟碱对照品液5μL，连续进样6次，测定其峰面积。计算峰面积的RSD值为1.01%，表明仪器精密度良好。

2.4.3 稳定性试验 精密吸取样品液5μL，分别在0、1、2、3、4、5h中进样，测定样品中罂粟碱的峰面积，峰面积的RSD值为1.12%，表明样品在5h内稳定。

2.4.4 重复性试验 精密称取同一批号样品6份，分别按供试品液制备方法制备供试液，进样测定其盐酸罂粟碱的含量，6份样品盐酸罂粟碱含量的RSD值为1.33%，表明该方法重复性良好。

2.4.5 加样回收率试验 精密称取5份已知含量的样品1.0g，每份精密加入浓度为0.091 6mg/mL标准品液52μL，按供试液溶液制备方法制备，各取5μL进样测定盐酸罂粟碱含量并计算其平均回收率，结果见表1。

2.5 样品含量测定

取三批次样品，按 “2.1.1”项下供试品处理方法制备样品，对三批样品进行测定，计算含量，结果见表2。

3 讨论

选择展开系统鉴别款冬花时，开始时选用乙酸乙酯-甲酸-水(10∶1∶3)的下层溶液为展开剂，发现薄层板上的点拖尾较严重，加大甲酸的比例可以适当解决拖尾严重的问题。

液相的流动相采用磷酸二氢钠的缓冲盐体系,能显著改善目标化合物的分离度。pH对吸收峰的对称因子有一定的影响，适当调pH至3.0时能有效改善峰的分离度，比较了不同测定波长下，盐酸罂粟碱的峰面积值，在254nm时峰面积较大，且和相邻化合物完全分离，故选择254nm作为测定波长。

表1 加样回收率 (n=6)

表2 三批次二母安嗽片中盐酸罂粟碱含量 (n=3)

4 结论

罂粟壳具有敛肺止咳、涩肠、定痛的功效，其主要有效成分为盐酸罂粟碱，为生物碱中的一种。本研究采用高效液相色谱法测定其含量，从而达到控制二母安嗽片的质量，采用薄层色谱法对知母、款冬花进行定性鉴定，能有效区分药材的真伪，从而达到控制质量的目的。综上所述，本研究采用TLC、HPLC研究二母安嗽片，该方法简便可行、重现性好，能有效控制该制剂质量。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S]．北京：中国医药科技出版社，2010.

[2] 李雪梅.高效液相色谱法测定注射用盐酸罂粟碱的含量[J].青岛医药卫生,2005,37(03):205-206.

[3] 凌志敏，黄凤婷.高效液相色谱法测定注射用盐酸罂粟碱的含量[J].国际医药卫生导报,2005,11(16):105-107.

[4] 王瑶，陆益红，孟长虹，等.盐酸罂粟碱注射液含量测定及有关物质研究[J].药物分析杂志,2011,4(09):1693-1698.

(责任编辑：李岚春)

Study on Quality Standard of ERMUANSOU Tablets

Jin yu

(Changshu Jianfa Medicine Co., Ltd. ，Jiangsu 215500，China)

Objective:To study the quality standards for ERMUANSOU Tablets.Methods:TLC was used to qualitative identification of Rhizoma Anemarrhena ,Colts foot flower. HPLC was used to determine papaverine.Results:Papaverine showed good linear relationships in the ranges of 0.0825～0.7425 μg. The average recoveries of papaverine was 98.74%， RSD was 2.63%.Conclusion:This methods is stable， simple and reproducible. It can be used for the quality control of preparation of Ermuansou Tablets.

ERMUANSOU Tablet;Rhizoma Anemarrhena; Sinensis; TLC; Papaverine; HPLC

2014-02-27

金瑜(1977-)，女，江苏省常熟市建发医药有限公司主管中药师，研究方向中药制剂。

R927.11

A

1673-2197(2014)12-0017-02