血清甲胎蛋白、血管内皮生长因子、p53抗体诊断原发性肝细胞癌的临床价值

徐新蓉

·论著·

血清甲胎蛋白、血管内皮生长因子、p53抗体诊断原发性肝细胞癌的临床价值

徐新蓉

目的探讨血清甲胎蛋白（AFP）、血管内皮生长因子（VEGF）、p53抗体诊断原发性肝细胞癌（HCC）的临床价值。方法选取2011年9月至2014年6月我院收治的79例HCC患者作为病例组，选取同期我院收治的65例肝硬化（HC）患者作为对照1组，另外选取同期我院体检科确诊的72例健康对照者作为对照2组，所有患者均接受AFP、VEGF、p53抗体测定，其中AFP测定采用电化学发光法，VEGF、p53抗体测定采用酶联免疫吸附试验（ELISA）。结果①病例组血清AFP、VEGF、p53抗体显著高于对照1组（P＜0.01），对照1组血清AFP、VEGF、p53抗体显著高于对照2组（P＜0.01）。②绘制受试者工作特征（ROC）曲线，得到AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.843（95%CI，0.738～0.905）、0.827（95%CI，0.731～0.899）、0.634（95%CI，0.515～0.756），AFP-AUC与VEGF-AUC相比差异无统计学意义（P＞0.05），p53抗体-AUC显著低于AFP-AUC与VEGF-AUC，差异有统计学意义（P＜0.01）。由ROC曲线可知，AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的最佳cut-off值分别为197μg/L、233 ng/L、0.63 kU/L，由此得知这3个指标诊断HCC的灵敏度、特异度分别为84.81%、87.59%，82.28%、89.78%，65.82%、86.13%。结论血清AFP与VEGF诊断HCC的临床性能相当，而p53抗体诊断HCC的灵敏度较低。

甲胎蛋白；血管内皮生长因子；p53抗体；原发性肝细胞癌

原发性肝细胞癌（HCC）是指原发于肝细胞的恶性肿瘤，其恶性程度较高、预后较差，死亡率在恶性肿瘤中仅次于肺癌、胃癌而居第3位，因此探索早期诊断肝癌成为当前肿瘤学研究的重要方向之一[1]。作为诊断HCC的传统肿瘤标志物，AFP一直被寄予厚望，但是其性能仍然有待进一步提高。随着研究的深入，新型肿瘤标志物如VEGF、p53抗体等逐步应用于临床[2-3]。本研究即旨在探讨血清AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的临床价值，现报告如下。

资料与方法

一、一般资料

选取2011年9月至2014年6月我院收治的79例HCC患者作为病例组，选取同期我院收治的65例HC患者作为对照1组，另外选取同期我院体检科确诊的72例健康者作为对照2组。三组患者性别、年龄、体质指数等一般资料相比差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 三组患者一般资料的比较

二、研究方法

空腹抽取受检者静脉血3～4mL，静置30 min，3 000 rpm离心5 min分离血清，取血清进行AFP、VEGF、p53抗体测定。AFP测定采用瑞士罗氏公司生产的Cobas e601型全自动电化学发光免疫分析仪及其配套试剂、标准品。VEGF、p53抗体测定采用ELISA方法，采用丹麦雷杜公司生产的RT-6000酶标仪、美国宝特公司生产的Bio-TekELX50洗板机、北京博凌科为生物科技有限公司生产的VEGF试剂盒、p53抗体试剂盒。

三、统计学分析

采用SPSS19.0统计软件，计量资料用x±s表示。三组间计量资料比较采用Krusskal-Wallis H检验、多个独立样本两两比较采用Nemenyi法检验。诊断价值采用ROC曲线分析，AUC比较采用Z检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

结果

一、血清AFP、VEGF、p53抗体测定结果

三组患者间AFP、VEGF、p53抗体含量差异具有统计学意义（P＜0.01）；病例组血清AFP、VEGF、p53抗体显著高于对照1组（P＜0.01），对照1组血清AFP、VEGF、p53抗体显著高于对照2组（P＜0.01），见表2。

表2 三组患者血清AFP、VEGF、p53抗体测定结果的比较

表2 三组患者血清AFP、VEGF、p53抗体测定结果的比较

组别nAFP（μg/L）VEGF（ng/L）p53抗体（kU/L）病例组79334.6±109.8405.7±124.11.04±0.65对照1组6575.6±63.5136.9±73.00.27±0.19对照2组725.4±4.295.7±39.40.17±0.13 H 53.410250.730321.5326 P＜0.01＜0.01＜0.01

二、AFP、VEGF、p53抗体诊断PLCC的ROC曲线分析

绘制ROC曲线，得到AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.843（95%CI，0.738～0.905）、0.827（95%CI，0.731～0.899）、0.634（95%CI，0.515～0.756），AFP-AUC与VEGF-AUC相比差异无统计学意义（Z=0.9236，P＞0.05），p53抗体-AUC显著低于AFP-AUC与VEGF-AUC，差异有统计学意义（Z分别为7.3103、7.9322，P＜0.01）。见图1。

图1 AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的ROC曲线分析

三、AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的临床价值分析

由ROC曲线可知，AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的最佳cut-off值分别为197 μg/L、233 ng/L、0.63 kU/L，由此得知这3个指标诊断HCC的灵敏度、特异度分别为84.81%、87.59%，82.28%、89.78%，65.82%、86.13%。见表3。

讨论

HCC是目前临床上消化内科常见的恶性肿瘤之一，长期以来，临床上一直应用AFP作为HCC高危人群的筛查指标。在生理情况下，血清AFP升高主要见于胎儿至出生不足2周的新生儿、妊娠期妇女等。在病理情况下，血清AFP升高则主要见于肝炎、肝硬化等肝脏良性疾病，以及HCC、精原细胞癌等恶性疾病，但是肝脏良性疾病患者血清AFP升高的幅度较小，95%的肝脏良性疾病患者血清AFP＜200 μg/L，而恶性疾病尤其是HCC患者血清AFP升高幅度较大，因此AFP对诊断HCC有着较高的特异性，从而可以用于肝脏良恶性疾病的鉴别诊断[4]。值得注意的是，并非所有HCC患者均有高水平的血清AFP，约有20%的HCC患者AFP始终呈阴性[5]，这对临床应用AFP筛查HCC是一种挑战，因此临床上有必要探索新的肿瘤标记物用于HCC的诊断。

表3 AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的临床价值分析

VEGF是目前临床上重要的血管生成调节因子之一。人VEGF基因位于染色体6p21.3，由7个内含子、8个外显子组成，编码相对分子质量为3.4～4.5 kDa的同源二聚体糖蛋白[6]。由于恶性肿瘤的生成以及转移受诸多因素尤其的血管形成的影响、制约，而VEGF又与恶性肿瘤的血管形成密切相关，因此VEGF升高可以见于多种恶性肿瘤，目前已经广泛应用于多种恶性肿瘤的诊断[7]。p53抗体是机体在p53蛋白刺激下合成的免疫球蛋白，而p53蛋白是p53基因编码的产物。p53基因是目前研究较透彻的抑癌基因之一，其定位于染色体17p13.1，具有监视基因组完整性、控制细胞分化等作用，从而可以阻止基因发生突变[8]。p53基因突变后，其前述作用消失，从而导致患者罹患恶性肿瘤的机率明显加大。值得注意的是，p53基因突变后，其编码的p53蛋白半衰期较长，与p53蛋白一样，p53抗体升高可以见于人体大部分恶性肿瘤，尤其以HCC、乳腺癌、肺癌、胃癌、肠癌等更为常见[9-10]。

在本研究中，我们先应用ROC曲线分析AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的AUC，结果显示AFPAUC与VEGF-AUC相比差异无统计学意义（P＞0.05），p53抗体-AUC显著低于AFP-AUC与VEGF-AUC（P＜0.01）。由此可见，AFP与VEGF诊断HCC的性能相当，而p53抗体的性能次于另外两者。通过进一步分析显示，AFP、VEGF、p53抗体诊断HCC的灵敏度、特异度分别为84.81%、87.59%，82.28%、89.78%，65.82%、86.13%，这说明p53抗体诊断HCC主要不足之处在于其灵敏度较低，这在该指标的临床应用工作中应给予重视。

1张二雷,黄志勇.原发性肝细胞癌合并肝硬化外科治疗方法的选择.中华外科杂志,2014,52(5):325-328.

2谢炎,蒋文涛,郭庆军,等.血管内皮生长因子的表达对肝癌患者肝移植预后的影响.中华器官移植杂志,2014,35(3):149-152.

3张华,李永兴,毛顺露,等.血清VEGF、p53抗体和AFP对原发性肝细胞癌的诊断价值.标记免疫分析与临床,2013,20(2):71-74.

4高明军,陈洪,陆枫林,等.去γ-羧基凝血酶原、甲胎蛋白在原发性肝细胞癌中的诊断价值.实用医学杂志,2012,28(15):2516-2519.

5常中飞,王茂强,刘凤永,等.经导管动脉内化疗治疗甲胎蛋白阴性原发性肝癌的疗效及预后因素分析.中国医学影像学杂志, 2013,22(6):417-421.

6兰涛,苑建磊,周国庆,等.血管内皮生长因子和凋亡抑制基因在肝细胞癌中的表达及与预后的相关性.中华实验和临床感染病杂志（电子版）,2014,(2):198-202.

7周天保,杨广顺.血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义.中国现代普通外科进展, 2006,9(5):278-280.

8胡志坚,陈华,薛金发,等.微囊藻毒素LR促肝癌过程中对p53基因突变与表达的影响.中华肝脏病杂志,2011,19(9):698-700.

9王晓彬,靳海龙,韩毅.血清P53蛋白、P53抗体在Ⅲ期非小细胞肺癌患者的检测.中国医刊,2013,48(3):45-47.

10朱剑武,仲召阳,张沁宏,等.血清甲胎蛋白及P53抗体与原发性肝癌病理分化程度的关系研究.现代预防医学,2012,39(9):2271-2273.

Clinical value of serum alpha fetoprotein,vascular endothelial growth factor,p53 antibody in diagnosis of primary hepatocellular carcinoma

XU Xin-rong.Department of Clinical Laboratory,Central Hospital of Ezhou city in Hubei Province,Hubei Ezhou 436000.China

ObjectiveTo evaluate the clinical value of serum alpha fetoprotein(AFP),vascular endothelial growth factor(VEGF),p53 antibody in diagnosis of primary hepatocellular carcinoma(HCC).MethodsSeventy nine patients with HCC(HCC group)from 2011 September to 2014 June in our hospital were selected, and 65 patients with liver cirrhosis(HC group)and 72 healthy subjects(HS group)served as control groups. AFP(measured by electrochemical luminescence method),VEGF and p53 antibody(measured by ELISA) were determined in all participants.ResultsAFP,VEGF,p53 antibody were significantly higher in HCC group than that in HC group(P<0.01),and AFP,VEGF,p53 antibody were significantly higher in HC group than that in HS group(P<0.01).The drawing of the receiver operating characteristic(ROC)curve was made;we got the ROC curve area of AFP,VEGF,and p53 antibody for the diagnosis of HCC.AFP-AUC was 0.843 (95%CI,0.738～0.905),VEGF-AUC 0.827(95%CI,0.731～0.899),and p53 antibody-AUC 0.634(95%CI, 0.515～0.756).After comparison,only p53 antibody-AUC was significantly lower than that of AFP-AUC and VEGF-AUC(P<0.01).By the ROC curves,the best cut-off values of AFP,VEGF,and p53 antibody in the diagnosis of HCC were 197 g/L,233ng/L,and 0.63kU/L,respectively.The sensitivity and specificity in the diagnosis of HCC were 84.81%and 87.59%for AFP,82.28%and 89.78%for VEGF,65.82%and 86.13%for p53 antibody,respectively.ConclusionThe diagnostic power of serum AFP and VEGF for HCC was equivalent,and the sensitivity of p53 antibody in the diagnosis of HCC was lower.

Alpha fetoprotein;Vascular endothelial growth factor;p53 antibody;Primary hepatocellular carcinoma

2014-09-30）

（本文编辑：朱薇）

10.3969/j.issn.1672-2159.2014.06.001

436000湖北省鄂州市中心医院