黄芪对糖尿病大鼠血清GLP-1及TNF-α、IL-18的影响*

江 红 段滨红 杜馥曼 向朝峰 仲 恒

（黑龙江省医院，黑龙江 哈尔滨 150036）

我国2型糖尿病（T2DM）患病率逐年攀升，而肥胖常是T2DM的伴随和前导因素。但肥胖患者是否发生T2DM决定于胰岛素抵抗的程度和β细胞的功能。最近研究发现，2型糖尿病患者尤其是肥胖的2型糖尿病患者存在胰高血糖素样肽-1（GLP-1）分泌减少，B细胞对GLP-1的敏感性下降。最近上市的GLP-1类似物给糖尿病的治疗带来了新的希望［1］，但临床应用受限。既往研究发现，黄芪活性成分可以有效防治2型糖尿病［2-6］。本研究观察黄芪对糖尿病大鼠血清GLP-1、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-18（IL-18）的影响，为糖尿病的治疗提供新思路。现报告如下。

1 材料与方法

1．1 试剂和动物 大鼠常规饲料购自哈尔滨医科大学实验动物中心。链脲佐菌素注射液（STZ）购自Sigma公司。3周龄断乳期雄性、健康清洁级大鼠60只，体质量 55～70 g。 饲养环境清洁，室温（24±3） ℃，每笼 5只，自由摄食、饮水，每周测量1次体质量。购自哈尔滨医科大学实验动物中心。黄芪注射液由石家庄神威药业提供。GLP-1、TNF-α、IL-18试剂盒为北京科美东雅生物技术有限公司产品。

1.2 模型制备 大鼠适应性饲养1周后，随机选取40只大鼠以STZ 30mg/kg一次性腹腔内注射，1周后测血糖，空腹血糖（FBG）>11.1mmol/L，并出现多饮、多尿症状为糖尿病大鼠成模标准。另20只正常喂养，为对照组。

1.3 分组与给药 将成模大鼠随机分为模型组与黄芪组，黄芪组每日将60mg/mL黄芪药液按200mg/kg体质量灌胃给药，同时对照组和模型组灌胃等量的生理盐水。

1.4 标本采集与检测 2周后，给予3组大鼠500 g/L葡萄糖按2 g/kg体质量灌胃，30min后3组大鼠尾静脉采血。应用酶免法（ELISA）方法测定各组大鼠空腹血清GLP-1、IL-18、TNF-α水平及大鼠服糖后30min血清GLP-1水平。

1.5 统计学处理 应用SPSS12.0统计软件。两组间比较采用t检验。单因素相关性分析用Logistic回归分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

模型组及黄芪组血清空腹及糖负荷后GLP-1水平低于对照组，TNF-α、IL-18水平高于对照组 （P＜0.01）。黄芪组血清空腹及餐后GLP-1水平高于模型组，TNF-α、IL-18 水平低于模型组（P＜0.05）。 GLP-1水平与IL-18、TNF-α呈负相关（相关系数r=-0.64，P＜0.05；r=-0.37，P＜0.05）。

表 1 各组大鼠 GLP-1、IL-18 、TNF-α 水平比较（±s）

表 1 各组大鼠 GLP-1、IL-18 、TNF-α 水平比较（±s）

与黄芪组比较，△P＜0.05；与对照组比较，*P＜0.01。

组 别 n GLP-1（pmol/L）服糖后GLP-1（pmol/L） IL-18（μg/L） TNF-α（ng/mL）对照组 20黄芪组 24 21.67±2.34 52.23±6.21 17.66±1.38 0.24±0.06 14.42±1.35* 35.67±4.34* 31.12±4.76* 0.51±0.18*模型组 288.79±0.73*△ 15.29±1.26*△ 42.16±7.81*△ 0.79±0.21*△

3 讨 论

T2DM在伴有胰岛素抵抗及β细胞功能受损的同时，胰高血糖素分泌增多也十分突出。GLP-1以葡萄糖浓度依赖性方式促进胰腺泌分泌胰岛素，同时减少胰岛α细胞分泌胰高血糖素，降低血糖。目前已经上市的GLP-1类似物由于其价格昂贵、半衰期短等缺点导致其无法在临床中广泛应用。因此，如果能发现其他有效、经济的能够促进内源性GLP-1分泌的物质，对临床糖尿病患者治疗有重大意义。GLP-1是肠道黏膜L细胞分泌的一种激素，可促进胰岛β细胞增生、抑制β细胞凋亡、减少胰高血糖素的分泌［7］，在防止β细胞衰竭方面具有重要意义。GLP-1具有改善胰岛素抵抗的作用［8］。同时GLP-1的促胰岛素分泌作用具有葡萄糖浓度依赖性，不易引起低血糖；同时其具有减轻体质量的功效，是目前2型糖尿病研究领域的热点。

近年研究发现，许多炎症因子参与了T2DM的发生发展，因此改善胰岛素抵抗对防治T2DM具有重要意义。据报道，具有降糖作用的中药达到70余种［9］，但国内外关于中药对2型糖尿病患者GLP-1水平影响的研究不多。本研究发现，模型组及黄芪组血清空腹及糖负荷后GLP-1水平低于对照组，TNF-α、IL-18水平高于对照组 （P＜0.01）。黄芪组血清空腹及餐后GLP-1水平高于模型组，TNF-α、IL-18水平低于模型组（P＜0.05）；GLP-1水平与 IL-18、TNF-α 呈负相关。黄芪可以升高2型糖尿病大鼠血清GLP-1水平，可以在临床上作为GLP-1分泌的刺激剂，本实验结果为糖尿病的早期预防及治疗提供了一些论据。

［1］ Gupta R，Walunj SS，Tokala RK，etal．Emerging drug candidates of dipeptidyl peptidase IV （DPP IV）inhibitor class for the treatmentof Type2Diabetes［J］.Curr Drug Targets，2009，10（1）：71-87.

［2］ 介导的糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的抑制作用［J］.中药材，2010，34（10）：1579-1582．

［3］ 毛淑梅，李承德，王琳，等．黄芪多糖对糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡作用及机制的研究［J］．中国药理学通报，2009，25（9）：1227-1229．

［4］ 徐怡，王保华，李柯，等．黄芪多糖的胰岛素增敏作用及其对蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B的影响［J］．武汉大学学报，2010，31（3）：289-291．

［5］ Mao XQ，Wu Y，Wu K，et al．Astragalus polysaccharide reduces hepatic endoplasmic reticulum stressand restores glucose homeostasis in a diabetic KKAymousemodel［J］．Acta PharmacolSin，2007，28（12）：1947-1956．

［6］ Zou F，Mao XQ，Wang N，etal．Astragalus polysaccharidesalleviates glucose toxicity and restores glucose homeostasis in diabetic states via activation of AMPK［J］．Acta Pharmacol Sin，2009，30（12）：1607-1615.

［7］ Doyle ME， Egan JM.Mechanisms of action of glucagon like pep tide1 in the pancreas［J］.Pharmacol Ther，2007，113（3）：546-593.

［8］ Xu G，Kaneto H，LaybuttDR，etal.Downregulation orGLP-1 and GIPRecep tor Exp ression by Hyperglycemia［J］.Diabetes，2007，56（6）：1151-1558.

［9］ 赵振爱.中药与糖尿病胰岛素抵抗［J］.中国误诊学杂志，2007，7（15）：3528-3529.