彩超结合Ki-67对乳腺癌腋窝淋巴结转移的诊断价值

陈 进 杭剑萍 李励琦

(无锡市第四人民医院肿瘤外科，江苏 无锡 214062)

淋巴结状态是反映乳腺癌预后的重要指标。Ki-67抗原为一种细胞核抗原，仅在增殖细胞核中表达，被认为是较理想的检测细胞增殖活性的指标。已有文献报道Ki-67抗原可以作为乳腺癌的预后指标之一〔1〕。本文借助免疫组化技术，检测乳腺癌Ki-67抗原表达并与彩色多普勒血流显像(CDFI)检测肿块内血流结合，探讨其与乳腺癌腋窝淋巴结转移的关系。

1 资料与方法

1.1研究对象 本院2010年5月至2011年5月资料完整、经手术和病理确诊的浸润性乳腺癌60例(浸润性导管癌52例，浸润性小叶癌5例，黏液腺癌3例)，其中腋窝淋巴结转移33例，腋窝淋巴结未转移27例，均为女性，年龄34～76(平均53.65)岁。术前均未接受过放疗或化疗。仪器为GE公司Logiq9及 Logiq700彩色多普勒超声仪，探头频率5～12 MHz。

1.2CDFI检查 患者于术前1 w行乳腺CDFI检查，着重观察病灶内血流信号分布情况。测量数值指标存盘，进行脱机分析。CDFI血流根据Addler的半定量法分级，分为0～3共4级。0级：肿块内未发现血流信号；Ⅰ级：为少量血流，可见1～2个点状或细短棒状血管；Ⅱ级：为中量血流，可见3～4个点状血管或一个较长的血管，其长度可接近或超过肿块的半径；Ⅲ级：为多量血流，可见5个以上点状的血管或2个较长的血管。

1.3病理检查 实验试剂 Ki-67鼠抗人单克隆抗体为即用型，购自北京中杉金桥生物技术有限公司。每例标本都选择包括肿瘤中心和肿瘤边缘的石蜡块1～2个，制成连续切片，片厚3～4 μm。免疫组化采用EnVision二步法。Ki-67阳性染色位于细胞核，呈棕黄色。光镜下对每例组织切片癌组织区域连续计数5个高倍镜视野(×400)，计算阳性细胞百分数作为Ki-67指数。其中阳性细胞所占比例<10%为阴性，阳性细胞数≥10%为阳性。

1.4统计学方法 采用SPSS11.0软件进行成组设计两样本均数t检验和χ2检验。

2 结 果

2.1CDFI与腋窝淋巴结转移关系 腋窝淋巴结转移组较未转移组肿瘤内彩色血流信号丰富，转移组主要以Ⅱ～Ⅲ级血流为主(24例)，未转移组主要以0～Ⅰ级血流为主(20例)，两组有统计学差异(P<0.05)。

2.2Ki-67表达与腋窝淋巴结转移关系 转移组中Ki-67阳性表达28例，占84.8%；未转移组中Ki-67阳性表达12例，占44.4%。腋窝淋巴结转移组较未转移组Ki-67阳性表达率明显增高(P=0.0010)。

2.3CDFI结合Ki-67诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移的灵敏度及特异度 两者结合诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移的敏感度及特异度较单独应用增高；CDFIⅡ～Ⅲ级血流诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移的灵敏度为72.7%，特异度为74.1%；Ki-67诊断淋巴结转移的灵敏度为84.8%，特异度为55.6%；CDFI结合Ki-67诊断淋巴结转移的敏感度为90.9%，特异度为85.2%。

3 讨 论

局部淋巴结转移的发生与否是决定患者预后的重要因素之一，也是选择手术及放化疗的依据。术前若能判断出乳腺癌腋窝淋巴结状态，对于选择治疗方案和降低术后患侧上肢水肿、肩关节活动障碍及胸壁皮肤麻木等并发症有重要价值。

Okuyama等〔2〕应用CDFI对乳腺癌腋窝淋巴结转移的价值研究表明：肿瘤内的血流信息是诊断乳腺癌重要的因素，而且肿瘤内的血流信息和腋窝淋巴结转移密切相关。赵汉学等〔3〕应用彩超检测乳腺癌肿瘤内CDFI血流，发现病变内部血流Ⅱ～Ⅲ级的肿瘤较血流0～Ⅰ级的肿瘤腋淋巴结转移发生率高。肿瘤的生长可分为无血管期和血管期。无血管期时，血管在瘤周生长而未进入瘤内，因为血液中氧和营养物质通过弥散作用能达到的距离有限，所以肿瘤体积增长速度较慢；血管期时，血管延伸至肿瘤内部并迅速生长，肿瘤因此获得足够的血供和营养，生长速度明显增快。同时因为肿瘤血供丰富，血流的剪切力增大，肿瘤细胞易于脱离，从而增加了转移的潜能〔4〕。因此，CDFI在肿瘤内部检测出丰富的血流信号时，淋巴结转移的概率高。

Ki-67抗原是位于10号染色体上，由分子质量为345 kD和395 kD的2条多肽链组成的核蛋白。Ki-67表达出现于除G0、G1早期以外的细胞周期中，在G2、M期表达最强，在有丝分裂后期迅速降解或失去抗原决定簇，被认为是能可靠、全面反映细胞群体增殖活性的客观指标〔5〕。它的高表达是细胞增殖活跃的重要标记，可反映肿瘤细胞的增殖活性。有学者研究显示Ki-67在乳腺癌中表达阳性率随着病理组织学分级、TNM 分期、淋巴结转移数目的增加而增加，说明肿瘤细胞的增殖与乳腺癌的肿瘤分化和淋巴侵袭相关〔6，7〕。Molino等〔8〕亦报道乳腺癌中Ki-67抗原表达与腋淋巴结转移情况、雌激素受体(ER)状态、孕激素受体(PR)状态及组织学分级相关。本研究提示随着Ki-67抗原表达强度的增加，腋窝淋巴结转移率亦增高。

综上所述，浸润性乳腺癌肿瘤内CDFI彩色血流信号分布、丰富程度及Ki-67阳性表达率与腋窝淋巴结发生转移密切相关。

4 参考文献

1仲伟霞.乳腺癌诊治中的病理学新进展〔J〕.肿瘤防治杂志,2001；8(z1):66-71.

2Okuyama N,Murakuni H,Ogata H,et al.The use of Doppler ultrasound in evaluation of breast cancer metastasis to axillary lymph nodes〔J〕. Oncol Rep,2004；11(2):389-93.

3赵汉学,朱 强.声像图表现和VEGF-C表达与乳腺癌腋淋巴结转移关系分析〔J〕.中国冶金工业医学杂志,2007；24(4):396-8.

4Byers SW,Sommers CL,Hoxter B,etal.Role of E-cadherin in the response of tumor cell aggregates to lymphatic，venous and arterial flow：measurement of cell-cell adhesion strength〔J〕.J cell Sci,1995；108(5):2053.

5徐 卫,盛瑞兰,郑肇巽,等.增殖相关抗原Ki-67与非霍奇金淋巴瘤组织学恶性程度及预后关系的研究〔J〕.江苏医药,2001；27(4):261-2.

6李宝江,朱志华,王军业,等.Ki-67、P53、VEGF和CerbB-2在乳腺癌组织中表达的相关性研究及其临床意义〔J〕.癌症,2004；23(10):1176.

7王海燕,黄爱民,高美钦.生存素与Ki-67在乳腺癌的表达及临床病理意义.福建医科大学学报,2006；40(2):143.

8Molino A,Pedersini R,Micciolo R,etal.Relationship between the thymidine labeling and Ki-67 proliferative indices in 126 breast cancer patients〔J〕.Appl Immunohistochem Mol Morphol,2002；10(4):304-9.