心肝胃同治方对心肌梗死大鼠血清中血管内皮生长因子的影响

王友明 贾云芳 侯仙明

(河北工程大学附属医院神经内科，河北 邯郸 056002)

冠心病属于中医学胸痹、心痛范畴，一般认为其病位在心，当从心治乃为正法，但从归经角度仔细分析其治疗方药，发现治心实则重在调理肝胃，可见冠心病不但治心又要治疗肝胃。本研究创治了心肝胃同治方，应用于临床疗效显著。血管内皮生长因子(VEGF)是血管新生中最重要的促进因子〔1〕，在血管新生中发挥着巨大作用，本实验重点探讨心肝胃同治法对大鼠血清中VEGF的影响。

1 材料与方法

1.1动物药物及试剂 健康雌性Wistar大鼠，体重220～260 g，由河北省实验动物中心提供。心肝胃同治方所用中药丹参、檀香、延胡索、乳香、没药、龙眼肉、人参、瓜蒌、薤白、半夏购自石家庄乐仁堂药店。常规煎煮，离心去杂，浓缩为2 g/ml的水煎液，密封分装，4℃冷藏备用。硝酸异山梨酯片(消心痛)：天津太平洋制药有限公司产品，规格：5 mg/片。VEGF购于北京中杉生物公司。

1.2主要仪器设备 Rm6240C型生理实验系统成都仪器厂；DW-2B小动物人工呼吸机，河北医科大学仪器厂；TGL-16G台式离心机上海安亭科学仪器厂；JY1201型药物电子天平上海民桥精密科学仪器有限公司。

1.3方法

1.3.1模型制作与分组 动物适应性饲养1 w后，大鼠称量体重，10%水合氯醛腹腔注射麻醉，仰卧位固定，直视下经口行气管插管，连接动物人工呼吸机，给予正压人工呼吸，潮气量3 ml/100 g，呼吸频率60～70次/min。记录肢体Ⅱ联心电图。胸部备皮，常规消毒、铺巾，自胸骨左缘旁开0.5～1 cm 纵向切口约2 cm，钝性分离胸大肌、前锯肌、肋间肌，于4～5肋间开胸暴露心脏，眼科开睑器撑开肋骨，撕开心包，轻压挤出心脏，迅速于肺动脉圆锥与左心耳之间，距主动脉根部2～3 mm处，用5-0眼科无创缝合线结扎冠脉左前降支，回纳心脏，逐层关胸，关闭胸腔前10 ml无菌注射器抽吸恢复胸腔负压。待大鼠出现自主呼吸后，拔除气管插管。术毕肌肉注射青霉素40万U，连续3 d，以预防感染。以心电图ST段明显抬高持续30 min以上，结扎线以下心肌颜色变苍白、搏动减弱为造模成功标志。

1.3.2实验分组 选取造模成功大鼠32只，按随机数字表法随机分为模型组、消心痛组、心肝胃同治低剂量组、心肝胃同治高剂量组四组，其中每组8只；另设假手术组大鼠8只，手术过程相同，但只穿线不结扎冠脉。

1.3.3动物喂养与给药 实验期间，大鼠自由饮水、摄食，普通饲料专人喂养。于术后24 h灌胃给药，按人鼠体表面积比率折算等效剂量，心肝胃同治低剂量组灌服剂量为6.75 g·kg-1·d-1，心肝胃同治高剂量组灌服剂量为13.5 g·kg-1·d-1，消心痛组灌服剂量为2.7 mg·kg-1·d-1，1次/d；模型组和假手术组大鼠灌胃等量蒸馏水。连续用药2 w。

1.3.4指标检测 用药2 w后，处死大鼠，离心分离血清。依据试剂盒操作说明检测血清中VEGF。

2 结 果

2.1大鼠造模及一般情况观察 大鼠进行心肌梗死模型复制，造模后前3 d，大鼠饮食、活动均减少。实验过程中，模型组大鼠饮食、活动较少，皮毛欠光泽，增重较缓慢，甚至无增重；其余各药物干预组，大鼠精神状态渐好转，不同程度增重，以心肝胃同治大剂量组最明显。实验过程中各组大鼠无脱失。

2.2血清中VEGF含量 心肝胃同治高、低剂量组及消心痛组〔(53.63±3.81)、(45.45±3.57)、(47.20±2.56)pg/ml〕明显高于模型组〔(36.06±2.76)pg/ml〕(P<0.05)，心肝胃同治低剂量组与消心痛组无差别(P>0.05)，心肝胃同治高剂量组优于其他处理组〔假手术组(29.46±5.79)pg/ml〕(P<0.05)。

3 讨 论

冠心病患者不同程度地表现有血瘀证候，活血化瘀类药物是冠心病治疗的主要手段。对中药学七版教材中活血化瘀类药物初步统计发现：33味药中有31味归肝经，13味归心经(包括心包经)，尤其破血消癥药为治血之峻药，全部归肝经，其中无一味归心经，甚至水蛭、虻虫只归肝经。可以看出中医治血重在调肝，而治心必要治血，故欲治心必先调肝。而调肝之法，除了直接应用活血化瘀药物外，亦应注意调和肝气，正如《血证论》所说“肝属木，木气冲和条达，不致遏郁，则血脉得畅”。 周学海的《读医随笔》更加明确的指出:“肝者，贯阴阳，统气血，握升降之枢也”。因此肝在整个人体气血运行中具有举足轻重的作用，也为从肝治心提供了保障，说明心肝关系密切。

冠心病除与心肝关系密切外，亦与胃紧密相关。在具体分析两者关系之前，须要先确定胃的内涵和外延。内涵即胃腑本身，外延应涵盖脾、大肠、小肠。就消化功能而言脾胃必须协同才能完成，所以二者在功能上具有统一性。从经络角度而言足太阴经和足阳明经更是将脾胃密切相连，故二者在结构上具有整体性。大肠、小肠皆属于胃，是足阳明也。可见，对于胃概念的外延，应包括大、小肠在内。《灵枢·经别》：“足阳明之正，上至髀，入于腹里，属胃，散之脾。”指出胃之经别将胃脾肠联系起来，而且胃经与大肠经直接相连，故脾胃肠三者密切相关而胃为纽带，故将脾胃肠合为一体以胃代之。

通过研究分析张仲景治疗胸痹心痛的方药归经发现：《金匮要略》治本病所立10方，其中6方使用了栝蒌、薤白、枳实、厚朴、橘皮，甚至巴豆等下气导滞除痰之品，其目的在于疏通肠胃气机，保持腑气通畅。10方涉药23味，归经较明确的21味，除桂枝以外20味归脾、胃、大肠经，归心经的有7味。由上述统计数据可看出心痛虽病位在心，但张仲景更注重从胃入手解决痰、气问题来治心病。

根据上述归经理论可见与冠心病密切相关的脏器当属心肝胃，病理因素当为气滞血瘀痰浊，因此对本病的治疗当心肝胃并治，气血痰并调。在此思想的指导下我们提出了心肝胃并治法。结合历代医家的经验和我们的临床经验，以丹参饮合瓜蒌薤白半夏汤加减创制了心肝胃同治方。内经对方剂中药物的配伍讲求君臣佐使，根据治病之轻重又分大小之制，即《素问·至真要大论》：“主病之谓君，佐君之谓臣，应臣之谓使。”“君一臣二，制之小也。君二臣三佐五，制之中也。君一臣三佐九，制之大也。”冠心病致病因素复杂，病变所涉脏器较多，非一般小方所能治之，故顺内经之理制中方以治，全盘兼顾，以求良效。心肝胃同治方由丹参、檀香、延胡索、乳香、没药、龙眼肉、人参、瓜蒌、薤白、半夏组成。其中丹参，檀香为君：丹参归心、肝经，祛瘀止痛，活血通经，兼补血之能；檀香归心、胃经，行气止痛。延胡索，乳香，没药为臣：三药均入心、肝、脾，均有活血，行气，止痛之功。龙眼肉，人参，瓜蒌，薤白，半夏为佐：人参与龙眼肉重在归心经以益气养血，瓜蒌、薤白、半夏归胃经行气祛痰。

VEGF可以特异性的促进血管内皮细胞进行有丝分裂，具有诱导新生血管生成的作用，是目前发现的最重要的血管生长因子之一〔2〕。正常心脏中VEGF的表达很少，而在局部组织缺血、缺氧时VEGF的表达则明显增加。当VEGF与受体膜外成分部分结合后，激活磷酸激酶C和刺激第二信使的形成，直接促进血管内皮细胞的有丝分裂；或在核酸和蛋白水平诱导纤维蛋白溶解酶原激活物的表达，参与细胞外蛋白水解和基膜的降解，有利于血管内皮细胞的迁移和增生〔3〕。在缺血的心肌梗死区给予外源性VEGF，可增加梗死区域内VEGF的浓度，有明显促进血管再生的作用，从而改善侧支循环血流和内皮细胞功能〔4〕。但内源性的VEGF升高为时短暂，不足以建立充分的侧支循环，无法满足缺血心肌的供血。因此在缺血性心脏病的治疗中需通过人为方式促进VEGF的升高。

本实验结果表明心肝胃同治方能明显提高心肌梗死大鼠血清中VEGF含量，因此可推断，心肝胃同治法治疗机制可能与促进了大鼠心梗区血管新生，改善了缺血心肌的供血有关。

4 参考文献

1侯仙明，王亚利，刘彦卿，等.“和血生络法”对心梗大鼠血清中 VEGF 的影响〔J〕.中国中医基础医学杂志，2012；18(9)：971-2.

2张冬梅，吴爱明，娄利霞，等.活血益气方对心梗后大鼠缺血心肌血管新生及 VEGF 表达的影响〔J〕.辽宁中医杂志，2010；37(8)：1602-5.

3田兆华，刘柏炎.血管新生与脑缺血损伤〔J〕.中国脑血管病杂志，2008；5(3)：132-4.

4王 冰，李晶华.VEGF对冠心病血管新生的影响〔J〕.心脏杂志，2009；521(3)：410-3.