高效液相色谱法测定感冒灵冲剂中马来酸氯苯那敏含量*

2013-12-23刘彬果郭海萍

天津药学 2013年3期

刘彬果，郭海萍，任涛

(中国人民解放军第二五四医院，天津 300142)

感冒灵颗粒为清热解毒药，是本院制剂，临床主要用于感冒发烧、咽喉疼痛、头痛等。其处方中含有复方乙酰水杨酸、马来酸氯苯那敏等化学药，还有蒲公英、败酱草等中药浸膏。马来酸氯苯那敏具有较强的抗组织胺作用，可引起嗜睡及轻度抑制中枢神经系统。其现有的质量标准只有中药定性鉴别的方法，没有马来酸氯苯那敏的含量测定方法，为了更好的控制感冒灵颗粒的质量，我们采用高效液相色谱法测定了马来酸氯苯那敏的含量。经方法学考查，认为本法简便，准确，无干扰，可用于本品质量控制。

1 仪器与试药

LC-10AT 高效液相色谱仪，515 泵，Waters 996 检测器，Waters2010 色谱工作站;UV -1800 可见紫外分光光度计。

马来酸氯苯那敏对照品(中国药品生物制品检定所，批号100047 -200606);甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

感冒灵冲剂为本院制剂(批号 12060117、12060235、12480135)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相:乙腈- 水(含0. 3% 冰乙酸和0.2%三乙胺);流速:1.0 ml/min;柱温:室温;检测波长:262 nm，进样量:10 μl。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液的制备精密称取105 ℃下干燥的马来酸氯苯那敏对照品适量，用甲醇溶解并稀释成39.2 μg/ml 溶液，作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备取本品适量，研细，精密称定5 g，置50 ml 量瓶中，加甲醇约40 ml，超声处理30 min，放冷后，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，除去初滤液，取续滤液，0.45 μm 微孔滤膜过滤，备用。

2.2.3 阴性对照液的制备按照处方组成比例，制备不含马来酸氯苯那敏的阴性样品。按供试品溶液制备方法制备阴性对照液，并按上述色谱条件进行测定。结果在与马来酸氯苯那敏对照品相同保留时间处无色谱峰，说明本品中的其他成分对马来酸氯苯那敏的测定无干扰。见图1。

图1 对照品(A)供试品(B)阴性对照(C)HPLC 图谱

2.3 线性关系考查精密称取马来酸氯苯那敏对照品制成浓度为6. 09、12. 18、24. 36、48. 72、97. 44 和194.88 μg/ml 的溶液。按上述色谱条件测定，以马来酸氯苯那敏进样量为横坐标，相应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线。回归方程:A =3610. 1 C -485. 37(r=0.9998)，结果表明:马来酸氯苯那敏在6.09 ～194.88 μg/ml 范围内线性关系良好。

2.4 精密度试验取对照品溶液，连续测定5 次，依法测定，结果峰面积RSD 为0.42%(n =5)，表明仪器精密度良好。

2.3.3 重复性试验取同一批号的样品6 份，按供试品溶液制备方法制得，依法测定，结果RSD 为0.92%(n=6)，表明该方法重复性良好。

2.5 稳定性试验供试品溶液在室温下放置不同时间(0、1、4、8、10、12 和24 h)，测定，其峰面积RSD 为1.33%，表明样品液在24 h 内基本稳定。

2.3.5 加样回收试验精密称取已知含量的同一批号的样品(12060235)5 份，研细，分别精密称取，并精密加入定量的马来酸氯苯那敏对照品，按供试品溶液制备法制备，并按上述色谱条件测定，计算回收率。结果平均回收率为97.5%，RSD 为2.86%。见表1。

2.6 样品测定取样品3 批，按上述方法制备供试品溶液，照上述色谱条件测定，外标法定量。结果3 个批次的样品马来酸氯苯那敏含量分别为标示量的97.2%、95.6%和94.8%。