充血性心力衰竭患者血清sICAM－1及白细胞膜黏附分子水平检测

朱 涛，许军秀，徐 明

郑州大学第五附属医院检验科 郑州450052

#通讯作者，男，1968年10月生，本科，副主任技师，研究方向:免疫微生物，E－mail:taotao010608@sina.com

充血性心力衰竭(congestive heart failure，CHF)是大多数心血管疾病的最终归宿，其发展过程是一种与细胞免疫有关的慢性炎症过程。国内学者研究［1－2］证实，持续的神经内分泌激活、细胞因子活化、细胞内信息传导通路的改变等变化可导致心肌细胞坏死和心室重塑，从而引发心室功能的进行性恶化，直至终末期CHF 的发生。白细胞跨内皮迁移至血管壁间隙是组织损伤和炎症反应的必要步骤，白细胞与血管内皮的黏附则是此过程的起始步骤，而黏附分子则介导全过程。研究［3］表明黏附分子参与了CHF 的疾病进程。作者分析了CHF 患者血清中可溶性细胞间黏附分子－1(soluble intercellular adhesion molecule－1，sICAM－1)及白细胞膜黏附分子(CD11a 和CD18)水平，进一步探讨CHF 发生的可能机制。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择郑州大学第五附属医院2010年12月至2011年8月收治的CHF 患者80例，男50例，女30例，年龄49～75 岁，诊断符合纽约心脏病学会(NYHA)心功能分级标准［2］，均为Ⅱ～Ⅳ级，超声心动图示左室舒张末期内径＞55 mm 且左室射血分数＜55%，其中Ⅱ级20例，Ⅲ级28例，Ⅳ级32例。基础心脏病类型:风湿性心脏病15例，冠心病25例，高血压心脏病10例，扩张型心肌病30例。对照50例，男30例，女20例，年龄40～72 岁，均为该院健康体检者，经临床、心电图、X 线胸片、常规生化等检查无器质性疾病及心功能障碍，近10 d 内未服抗凝药、抗高血压药、抗心衰药、抗炎药及免疫抑制剂等。观察对象均排除感染、全身免疫性疾病、恶性肿瘤及严重肝肾疾病。

1.2 血清sICAM-1 的检测 晨起空腹抽取研究对象静脉血2 mL，3 000 r/min 离心10 min，取血清0.5 mL 左右，－20℃保存。用ELISA 法进行sICAM－1检测，检测试剂盒购自晶美生物工程有限公司，严格按照说明书操作。

1.3 血清CD11a、CD18 的检测 晨起空腹抽取研究对象静脉血2 mL，肝素抗凝，采用FACSCalibur 流式细胞仪检测CD11a 和CD18。取抗凝血50 μL，加入FITC 标记的CD11a 及CD18 单克隆抗体(Becton Dickson 公司)20 μL，充分混匀，严格按照试剂盒要求检测CD11a 和CD18 阳性细胞百分率。

1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0 进行分析。2组间血清sICAM－1 水平、CD11a 及CD18 阳性细胞百分率的比较采用两独立样本t 检验;不同心功能分级及不同基础心脏病类型CHF 患者上述指标的比较采用单因素方差分析及LSD-t 检验;检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 CHF组与对照组血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 阳性细胞百分率的比较 CHF 患者血清sICAM－1 水平、CD11a 及CD18 阳性细胞百分率高于对照组，见表1。

2.2 不同基础心脏病类型CHF 患者血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 阳性细胞百分率的比较见表2。不同基础心脏病类型CHF 患者血清sICAM－1 水平及CD11a、CD18 阳性细胞百分率差异均无统计学意义。

表1 CHF 及对照组血清sICAM-1水平及CD11a、CD18 阳性细胞百分率的比较

2.3 不同心功能分级CHF 患者血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 阳性细胞百分率的比较 见表3。

表2 不同基础心脏病类型CHF 患者血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 阳性细胞百分率的比较

表3 不同心功能分级CHF 患者血清sICAM-1 水平及CD11a、CD18 阳性细胞百分率的比较

3 讨论

sICAM－1 属于内皮细胞表达的免疫球蛋白超家族成员，是白细胞与血管内皮细胞黏附的关键因子，参与机体的免疫和炎症反应［4－5］。目前发现ICAM－1的配体主要有淋巴细胞功能相关抗原－1(LAF－1，又称CD11a/CD18)、巨噬细胞抗原1(Mac－1，又称CD11b/CD18)和β2 整合素［6］。通常心肌细胞只表达极少量的sICAM－1，但在某些病理因素刺激下，如心脏手术、心肌缺血再灌注［7］、心脏移植排斥反应及白细胞介素1(IL－1)、肿瘤坏死因子－α(TNF－α)和脂多糖(LPS)等炎症因子刺激后，心肌细胞膜sICAM－1 的表达可成倍增加，sICAM－1 脱落后以可溶性形式存在于血液中，因此外周血sICAM－1 水平可反映心肌细胞表面sICAM－1 表达的程度，是反映炎症程度的标志。

CD11a/CD18 属整合素超家族的细胞表面糖蛋白，只在白细胞上表达，CD11a/CD18 作为sICAM－1 的受体与之结合，在介导白细胞与内皮细胞黏附、越血管迁移和向病变组织中浸润这一过程中起始动作用。sICAM－1 广泛分布于内皮细胞、上皮细胞、血管平滑肌细胞及成纤维细胞［8］，在炎性细胞因子的作用下，其表达可迅速上调，对淋巴细胞有趋化作用，从而促进炎症的发生。研究［9］发现，急性心肌炎、扩张型心肌病、慢性缺血性心肌病等导致的CHF 患者血清sICAM－1 等细胞因子水平增高，可导致心肌炎症反应，引起心肌损伤和坏死，在CHF 的病理生理和发病机制中起重要作用。CHF 时细胞因子网络的正常调节发生失控，表现为促炎性细胞因子大量增加，而抗炎性细胞因子相对降低，使CHF 患者已经存在的血流动力学紊乱进一步恶化［10］。罗兴林等［11］发现心衰患者存在细胞免疫功能异常，并可激活补体系统，造成免疫损伤，加重心功能的减退。

该研究发现，CHF 患者血清sICAM－1 水平及CD11a、CD18 阳性细胞百分率明显高于健康对照组，且随着CHF 患者心功能分级的增加，上述指标亦相应升高，提示CHF 患者存在心肌炎症反应增强的趋势。作者还发现，不同基础心脏病类型CHF 患者间血清sICAM－1 水平及CD11a、CD18 阳性细胞百分率差异并无统计学意义，说明不论何种原因导致的CHF，以sICAM－1 介导的心脏炎症反应都可能是诱发或加重CHF 的原因之一。因此，黏附分子有望成为预测CHF 严重程度及预后估计的一项重要指标。通过抗黏附治疗，影响炎症反应的启动，减少白细胞在心肌组织中的浸润，从而逆转和改善心肌功能，有可能成为治疗CHF新的有效的治疗方法。

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