健康成人尿酶及微量蛋白研究分析
2013-11-24韩晓芳贾海琴
谭 艳,韩晓芳,贾海琴
(内蒙古自治区人民医院 检验科,内蒙古 呼和浩特010017)
尿液酶及微量蛋白的分析检测,做为一种无创伤性检验,在临床肾脏疾病的早期诊断起着重要的作用[1-2]。本文对120名健康成人尿海藻糖酶(trehalase,T)、尿 N-乙酰-β-D 氨基葡萄糖苷酶 (N-acetyl-D-glucosaminidase,NAG)、r-谷氨酰转酞酶(gamma-glutamyl transferase,GGT)3种尿酶及尿β2-微球蛋白(β2-MG)进行了研究分析。
1 对象和方法
1.1 病例选择 在我院院进行健康体检、均排除肝肾等疾病者120名,男68名,女52名,年龄18-56岁。
1.2 检测方法
1.2.1 标本采集 留晨尿,离心后进行检测。检测仪器:OLYMPUS AU2700
1.2.2 尿T测定 采用Sasai-Takedatsu M[3]测定方法,即将尿液标本经过SephadexG-25凝胶层析柱除去内源性葡萄糖后加入海藻糖,海藻糖被海藻糖酶催化分解生成葡萄糖,检测生成的葡萄糖,以每小时每升尿液中释放多少微摩尔的葡萄糖量作为海藻糖酶的活性浓度(μmol/h.L)。葡萄糖测定采用葡萄糖氧化酶和过氧化物酶偶联法,试剂由北京中生公司提供。
1.2.3 尿 NAG(IU/L)测定采用比色法测定,尿β2-MG(mg/L)采用免疫比浊法测定。由于尿β2-MG受标本存放时间、温度及pH的影响,因此标本采集后用1mol/L的NaOH调节到pH7-9并及时在2h内进行检测[4]。尿 GGT(U/L)采用酶速率法测定;尿肌酐(g/L)采用速率比色法测定,试剂由OLYMPUS公司提供。检测仪器:OLYMPUS AU2700。
1.2.4 为了消除尿量变化对检测数据的影响,尿T、NAG和GGT结果与尿肌酐(Cr)比值计算。
1.2.5 统计学分析 应用SPSS 11.5统计软件进行正态性检验,呈正态分布数据比较用t检验,呈偏态分布数据用中位数表示,数据比较用非参数秩和检验(Mann-Whitney检验)。P<0.05为具有显著性差异。
2 结果
2.1 120例健康者尿T、NAG 、GGT、β2-MG各项目检测结果
尿T和β2-MG呈正偏态分布(Z=1.124、1.12;P=0.16、0.162),结果分别为6.95±3.92 μmol/h.gCr、0.14±0.09(mg/gCr);尿 NAG、GGT呈偏态分布(Z=1.626、1.369;P=0.01、0.047),结果分别为6.2(5.3-7.7)、33.4(18.5-43.4)(U/gCr)[中位数(四分位数)]
2.2 120例健康者按性别分两组,两组尿T、NAG、GGT、β2-MG检测结果男女间比较见附表1。
表1 不同性别尿T、NAG、GGT、β2-MG检测结果
3 结果
3.1 尿海藻糖酶为近似正态分布,男女间差异无统计学意义,按照95%的的参考范围(±1.96s)为0-14.6μmol/h.gCr。
3.2 NAG为偏态分布,男女间差异无统计学意义,第95 百分位数为 11.2;其参考范围为 0-11.2 U/gCr。
3.3 GGT为偏态分布,男女间差异无统计学意义,第95百分位数为56.6,其正常参考范围为0-56.6 U/gCr。
3.4 尿β2-MG为正偏态分布,男女间差异无统计学意义,按照95%的参考范围(±1.96s)为0-0.32 U/gCr。
4 讨论
尿海藻糖酶是近几年发展的新的近端肾小管损害指标,它仅产生于近端肾小管和小肠黏膜上皮细胞,由于在正常体液时带有大量负电荷,血中浓度低、分子量大,故不能从肾小球滤过。因此,尿中海藻糖酶只源于近端肾小管上皮细胞。在肾小管上皮细胞受损时就会发生改变,即能早期、敏感地反映近端肾小管上皮细胞的损害[5,6]。NAG来源于近端小管上皮细胞的溶酶体,当肾脏实质性病变时 肾小管上皮细胞的破坏可使尿中NAG活性显著增高,对于肾小管间质病变NAG是一个很灵敏且特异性较强的反映肾实质损伤的指标[2,7]。β2-MG是可通过肾小球滤过的低分子量蛋白质,几乎全部被近曲小管重吸收,在近端肾小管损伤时尿β2-MG升高[2,7,8]。人体大多脏器含丰富的 GGT,但尤以肾脏含量最高。尿GGT是一种细胞分泌酶,主要来自肾近曲小管的刷状缘,其生理功能是催化谷胱甘肽或其他谷胱酰基的多肽的谷氨基转移到合适的受体上去。有报道认为GGT可作为诊断早期肾损害的依据[9]。
本研究选择120例健康者体检者进行了尿海藻糖酶及尿NAG、尿GGT、尿β2-MG的检测分析,确立了尿海藻糖酶的正常参考范围为0-14.6μmol/h.gCr、尿 NAG的正常参考范围为0-11.2U/gCr、尿GGT的正常参考范围为0-56.6U/gCr、尿β2-MG的正常参考范围为0-0.32U/gCr。上述指标正常参考范围的确立,为其在临床上合理应用提供了实验依据,有助于临床肾脏功能的判断及肾脏损伤性疾病的诊断及治疗。
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