支气管镜刷检标本液基细胞学检测在肺癌诊断中的应用

余碧芸 吴宏成 沈世茉 浙江省宁波市李惠利医院 宁波 315000

潘 登 浙江省宁波市临床病理诊断中心

Surepath液基细胞学检测技术（LCT）是第三代细胞学检测技术，与传统直接涂片检查比较，诊断阳性率明显提高，目前已广泛应用于宫颈癌的诊断，但在支气管镜刷检细胞学检查方面的应用仍然不多。我院近期将Surepath液基细胞学检测应用于支气管镜刷检细胞学，并与传统直接涂片方法比较，以探讨其对肺癌的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年1月—2012年3月在我院门诊及住院进行支气管镜检查，对刷检标本同时进行Surepath液基细胞学技术和普通常规涂片的患者529例，男372例，女157例，年龄18～85岁，平均年龄50岁。其中肺癌患者159例，均经组织病理确诊，包括支气管镜活检确诊98例，经皮肺活检确诊16例，手术病理确诊45例。非肺癌患者370例，其中肺炎158例，肺结核42例，支气管扩张50例，间质性肺疾病28例，慢性阻塞性肺疾病20例，结核性胸膜炎10例，支气管结核8例，肺脓肿8例，肺不张5例，尘肺5例，支气管异物4例，支气管肺良性肿瘤3例（肺错构瘤2例，右侧主支气管平滑肌瘤1例），复发性多软骨炎1例，其他包括痰血或慢性咳嗽患者胸部CT和支气管检查未见明显异常者28例。

1.2 方 法 所有患者均由同一个医师采用OLYMPUS BF260或1T260电子支气管镜进行检查，均采用南京微创一次性使用细胞刷进行支气管黏膜刷片，将毛刷先直接在玻片上涂片2张，再将毛刷头置入有50mL CytoRich红色固定液（BD公司）的锥形管中，震荡5～10次，送细胞病理室处理。

1.3 LCT检测 采用离心沉降技术600g的转速离心10min，倒掉上清液并震荡，如果看不到或只看到小的细胞块，加入10mL缓冲液震荡后全部转移到12mL离心管内，如果看到较大或很大的细胞块，将部分标本转移到12mL离心管内，并加入10mL水，放入离心机，600g的转速离心5min，倒掉上清液并振荡。将离心管放入PrepStainTM全自动液基细胞制片机（BD公司）中自动制片、染色（HE染色法）。所有涂片均由同一个病理医师最后审核。

1.4 观察指标 比较两组患者的病理切片质量，统计比较两种方法的诊断阳性率，并比较LCT分类诊断和病理组织学诊断的符合率。

1.5 统计学方法 应用SPSS19.0统计软件进行统计分析，计数资料比较采用χ2检验，配对计数资料比较采用配对χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 LCT和直接涂片法的检测结果与评价 LCT涂片均匀薄层，细胞结构及背景清晰，污染少，染色质量高，核质分明，便于观察；细胞团保留其自然形态，三维结构可见，便于推断其组织类型。传统涂片厚薄不均且肿瘤细胞往往存在于黏液、较厚的炎性细胞等污秽背景中，或细胞由于受外力挤压变形，或由于固定不当造成细胞退变，影响染色造成难以观察和判定。

把镜检发现可疑癌细胞和癌细胞均列为阳性。LCT和直接涂片法的检测结果见表1～2。LCT诊断肺癌的敏感度为43.4%，特异度为99.7%。直接涂片法诊断肺癌的敏感度为18.3%，特异度为99.7%。LCT和直接涂片法肺癌诊断阳性率差异有统计学意义（χ2=32.1，P＜0.01），LCT的敏感度高于直接涂片法，特异度与直接涂片法无差异（P＞0.05），见表1～2。

2.2 LCT细胞学分类诊断的准确性 159例患者中同时有LCT分类诊断和病理组织学诊断结果69例，其中LCT分类诊断与病理组织学诊断相符者53例，总符合率76.8%，见表3。

3 讨论

液基细胞学技术于1996年被美国FDA批准用于改进传统的手工巴氏涂片，目前应用于临床的有两种：膜式液基薄层细胞技术（Thih－prep Cytolosy Test，TCT）和离心沉淀式液基薄层细胞学制片技术（AutoCyte Prep），后者在2001年更名为Surepath，即LCT，目前已经逐步进入中国。LCT的突出优点是标本利用率高，符合不丢弃任何所取材料的原则[1]。且LCT制片与CS相比还具有以下优点：①固定及时，对刷检所获得的标本能及时注入液基保存液中保存备用，细胞不易变形。②能最大限度地收集到癌细胞成分。③能有效地过滤清除标本中的红细胞、炎症细胞及黏液等各种污秽物，涂片背景较清晰。④涂片范围小，细胞分布均匀，镜检省时、省力、快捷。⑤LCT可以重复制片，为后续特染、免疫酶标、细胞块技术、基因检测的应用提供了可能。⑥LCT具有自动涂片、染色，减少了人工操作和接触标本的机会，避免了感染机会，提高了诊断细胞病理学的标准化、自动化。

表1 两组LCT和直接涂片法检测结果 例

表2 159例肺癌标本LCT和直接涂片法检测结果比较 例

LCT诊断 组织病理学诊断腺癌 鳞癌 小细胞癌 非小细胞癌腺癌鳞癌小细胞癌非小细胞癌类型不明确14 0 0 2 3 1 28 0 5 0 0 0 1 1 0 0 1 4 0 0 0

支气管镜检查是目前诊断肺癌的常规检查方法，刷检联合组织活检是重要手段。传统支气管黏膜细胞学检查是在支气管镜检查过程中，用支气管毛刷直接在普通玻片上涂片，诊断率较低。LCT对肺癌有更高的诊断率，国内也有少量文献报道[2－4]。本研究结果显示，经过与组织病理学对照，普通涂片法检出敏感度为18.3%，而LCT检出敏感度为43.4%，较普通涂片法提高了25.1%，差异有统计学意义（P＜0.05）。而且，LCT分类诊断和病理组织学诊断的符合率也达76.8%，和池琼[3]、储兵等[4]报道一致。Fan等[5]发现LCT分类诊断和病理组织学诊断的符合率高，而且在小细胞肺癌中更为突出，本组病例中LCT对小细胞肺癌的诊断率和敏感率最高，其次是鳞癌。本组2例支气管镜下未见明显异常但是行刷检明确肺腺癌的患者，经外科手术组织病理检查也明确为肺腺癌。普通支气管镜检查对亚段以下病灶无法直视，而且部分肺癌侵犯支气管黏膜病变轻微，此时，根据影像学在相应支气管黏膜部位刷检可以提高阳性率。本组2例支气管镜下管腔狭窄的患者行电子支气管镜活检病理不能明确，但是刷检液基细胞学提示小细胞癌，最后手术组织病理也证实为小细胞癌。考虑支气管镜活检标本作组织病理学切片时，因组织取材过小或挤压严重未能明确诊断，而LCT诊断能补充确诊。本研究中发现支气管结核患者的LCT诊断率为100%，为支气管结核与支气管肺癌的鉴别诊断提供了有力的依据。有2例LCT检查阴性，而直接涂片为阳性，考虑由于本研究采用的对照研究，经常规涂片后再行LCT检查，可能因细胞量不足而影响检出率，如果将刷检标本直接送LCT，或能得到更高的肺癌检出率和组织类型的敏感性。

［1］Michael CW，Hunter B.Interpretation of FNA processed by the Thinprep technique Cytologic artifacts and diagnostic pitfalls［J］.Diagn Cytopathol，2000，23：6213．

［2］陈世梁.膜式超薄液基细胞学技术在肺癌诊断中的应用［J］.实用癌症杂志，2007，22（2）：196.

［3］池琼，郑纪阳，戴新建，等.膜式超薄液基细胞学检测技术在肺癌诊断中的应用［J］.中华肿瘤杂志，2010，32（3）：221.

［4］储兵，陈应智，王光辉，等.纤维支气管镜刷片薄层液基细胞学检查在肺癌中的应用［J］.医药论坛杂志，2008，29（13）：53

［5］Yi－Bo Fan，Qing－Shan Wang，Lin Ye，et al.Clinical appli⁃cation of the SurePath liquid－based Pap test in cytological screening of bronchial brushing for the diagnosis of lung can⁃cer［J］.Cytotechnology，2010，62（1）:53.