“复方抗氧化制剂”抗氧化能力的研究
2013-09-05任昭君
任昭君
(枣庄学院体育学院,山东枣庄 277160)
“复方抗氧化制剂”抗氧化能力的研究
任昭君
(枣庄学院体育学院,山东枣庄 277160)
摘 要:探讨“复方抗氧化制剂”对大鼠骨骼肌抗氧化能力的影响,以期为开发保健饮料提供一定的参考作用。选取42只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组与实验组,8周后分别于安静状态、定量负荷运动后、力竭运动后、力竭运动24 h后测试大鼠骨骼肌总抗氧能力、MDA含量、GSH含量。结果表明,安静状态下、定量负荷运动后、力竭运动后、力竭运动24 h后,实验组大鼠骨骼肌中总抗活性氧能力明显高于对照组(P<0.05),GSH含量明显高于对照组(P<0.05);安静状态下、定量负荷运动后、力竭运动后,实验组大鼠骨骼肌中MDA含量明显低于对照组(P<0.05)。“复方抗氧化制剂”能够提高大鼠在不同功能状态下骨骼肌中抗氧化能力。
关键词:丙二醛;复方抗氧化制剂;还原型谷胱甘肽
补充抗氧化剂、矿物元素以及补充氨基酸、中药等,有利于增强机体的抗氧化能力和提高机体的运动能力。但是,关于运动员额外补充营养物质对抗自由基损伤作用的研究还不完善,补充的种类、剂量、持续时间还没有得出一致结论。近年来发现一些药食同源的食物如沙棘、芦荟、人参、枸杞等具有清除机体自由基、对抗脂质过氧化、提高机体运动能力的作用,另外研究还表明猕猴桃、番茄、石榴等也具有抗氧化的作用。
本研究通过让大鼠食用具有抗氧化作用并且无毒副作用的沙棘、石榴、西洋参、枸杞、芦荟等配制的“复方抗氧化制剂”,并观察“复方抗氧化制剂”对大鼠在不同功能状态下骨骼肌抗氧化能力的影响,以期为开发适合运动员食用或饮用的,安全、有效的、能够提高机体运动能力并且无毒副作用、具有抗氧化作用的食品及饮料,提供更多的科学依据。
1 材料
1.1“复方抗氧化制剂”的配制
为开发具有抗氧化能力、抗疲劳能力并且无毒副作用的运动饮料,以沙棘、枸杞、核桃、西洋参、石榴等配制而成“复方抗氧化制剂”饮料。
1.2 材料
健康 Wistar大鼠,体重(160±10)g,雄性,42只(鲁动质字:2001003),由山东大学动物研究所提供,标准饲料饲养,饮用纯净水,动物房湿度38%,室温19℃~26℃。
2 方法
2.1 分组与服药方法
随机分为对照组(C组)与实验组(S组),实验组每天自由饮用“复方抗氧化制剂”饮料,对照组自由饮用纯净水。8周后分别于安静状态、力竭运动后、力竭运动24 h后取材测试大鼠骨骼肌总抗活性氧能力、丙二醛含量及还原型谷胱甘肽含量。
2.2 力竭运动标准
大鼠尾部负重,重量是体重的3%,在水深55 cm,水温32℃,直径70 cm的圆形特制大鼠游泳池子中游泳。大鼠沉入水下,且10 s不能自动浮出水面为力竭标准。
2.3 定量负荷标准
大鼠尾部负重,重量是体重的3%,在水深55 cm,水温32℃,直径70 cm的圆形特制大鼠游泳池子中游泳,40 min后捞出。
2.4 取材
各组大鼠分别于相应时刻,依次用乙醚麻醉,迅速取出股四头肌,先在0℃~4℃冰生理盐水中洗净血液,并用滤纸吸干水分,装入内径4 mm的塑料样品管中,并迅速放入-84℃超低温冰箱。
2.5 仪器
水浴锅(HH-S26)、721分光光度计、超低温冰箱-86℃(DW86-200)、电子天平(WA 10005)、低温离心机(GTR10-1)、百得移液器(Biohit 73070X)、恒温混匀器(TS100)、电热恒温干燥箱(MX841-3)、高速匀浆器、离心管、试管等。
2.6 指标测定
2.6.1 组织匀浆液制备
从超低温冰箱中取出样品,解冻,用冷生理盐水洗净血液,滤纸吸干,取出大鼠股四头肌6 g左右,电子天平称重,按1∶9加入生理盐水,在冰浴条件下用电动高速匀浆器制成10%的组织匀浆液,用低温离心机(4℃)以3 500 r/min离心15 min,取上清液4 mL放入样品管中,4℃冷藏待测。
2.6.2 测定方法
MDA:采用硫代巴比妥酸(Thibabituric Acid TBA)法,蛋白含量:采用考马斯亮兰法,GSH、抗活性氧能力,各指标测定严格按照试剂盒说明操作。以上试剂盒均为南京建成生物工程研究所提供,严格按照说明操作。
3 结果
3.1 总抗活性氧能力
不同功能总抗活性氧能力比较,见表1。
表1 不同功能状态下两组大鼠骨骼肌中总抗活性氧能力(AN-Ros)的比较Table 1 Changes of AN-Ros in rat skeletal muscle of Two groups at different functional status
安静状态下、定量负荷运动后、力竭运动后、力竭运动24 h后,实验组大鼠骨骼肌中总抗活性氧能力明显高于对照组(P<0.05)。与安静状态相比,对照组与实验组定量负荷运动后、力竭运动后、力竭运动24 h后,大鼠骨骼肌中总抗活性氧能力明显低于安静状态(P<0.05)。
3.2 丙二醛(MDA)含量
不同丙二醛(MDA)含量比较,见表2。
表2 不同功能状态下两组大鼠骨骼肌中丙二醛(MDA)含量的比较Table 2 Changes of MDA content in rat skeletal muscle of Two groups at different functional status
安静状态下、定量负荷运动后、力竭运动后,实验组大鼠骨骼肌中丙二醛含量明显低于对照组(P<0.05)。与安静状态相比,对照组与实验组定量负荷运动后、力竭运动后,大鼠骨骼肌中丙二醛含量明显低于安静状态(P<0.05)。
3.3 还原型谷胱甘肽(GSH)含量
不同还原型谷胱甘肽(GSH)含量比较,见表3。
安静状态下、定量负荷运动后、力竭运动后、力竭运动24 h后,实验组大鼠骨骼肌中还原型谷胱甘肽含量明显高于对照组(P<0.05)。与安静状态相比,对照组定量负荷运动后,力竭运动后,大鼠骨骼肌中还原型谷胱甘肽含量明显低于安静状态(P<0.05),实验组,力竭运动后,大鼠骨骼肌中还原型谷胱甘肽明显低于安静状态(P<0.05)。
4 结论与讨论
活性氧有很强的氧化能力,是已知最强的氧化剂之一。关于补充抗氧化剂对机体抗活性氧能力的变化,目前报道较少。本研究显示,对照组与实验组定量负荷运动后、力竭运动后、力竭运动24 h后,大鼠骨骼肌中总抗活性氧能力明显低于安静状态,而实验组在安静状态下、定量负荷运动后、力竭运动后、力竭运动24 h后,大鼠骨骼肌中总抗活性氧能力明显高于对照组(P<0.05)。这说明补充“复方抗氧化制剂”能够提高大鼠安静状态下、定量负荷运动后、力竭运动后、力竭运动24 h后大鼠骨骼肌中抗活性氧的能力,提高机体清除自由基的能力。
MDA作为脂质过氧化物的代表产物是衡量机体自由基代谢的敏感指标,其含量能客观反映机体产生自由基的水平。运动后机体MDA含量的变化,目前研究报道不一。多数学者认为,运动后机体MDA含量提高[1-2],但也有学者认为运动后机体MDA含量降低[3]。本研究表明,对照组与实验组定量负荷运动后、力竭运动后,大鼠骨骼肌中丙二醛含量明显低于安静状态。而实验组在安静状态下、定量负荷运动后、力竭运动后,大鼠骨骼肌中丙二醛含量明显低于对照组。这说明“复方抗氧化制剂”能够提高机体抗氧化能力,抑制脂质过氧化,降低大鼠骨骼肌中MDA含量。
还原型谷胱甘肽不仅是体内重要的保护因子及抗氧化物质,还在细胞凋亡、基因表达、信号传导过程中起着重要作用。运动后机体还原型谷胱甘肽的变化,相关报道也存在差异,多数学者认为运动后机体还原型谷胱甘肽含量下降。本研究发现,与安静状态相比,对照组定量负荷运动后,力竭运动后,大鼠骨骼肌中还原型谷胱甘肽含量明显低于安静状态;实验组,力竭运动后,大鼠骨骼肌中还原型谷胱甘肽明显低于安静状态。而实验组在安静状态下、定量负荷运动后、力竭运动后、力竭运动24 h后,大鼠骨骼肌中还原型谷胱甘肽含量明显高于对照组。这表明“复方抗氧化制剂”能够提高大鼠在不同功能状态下骨骼肌中GSH的含量,能有效的清除机体过多的自由基,提高机体抗氧化能力。
“复方抗氧化制剂”能够提高大鼠在不同功能状态下骨骼肌中抗活性氧的能力,降低骨骼肌中MDA含量,提高骨骼肌中GSH的含量,提高机体的抗氧化能力。
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Study the Antioxidant Capacity of the'Compound Antioxidants'
REN Zhao-jun
(College of Physical Education,Zaozhuang University,Zaozhuang 277160,Shandong,China)
Abstract:Explore the effect of"compound antioxidants"on antioxidant capacity in rat skeletal muscle, in order to offer certain reference role to development of health drink.Selecting 42 male Wistar rats,were randomly assigned to the control group and the experimental group, after 8 weeks, the total antioxidant capacity, content of MDA, GSH content in rat skeletal were tested in quiet State, after Quantitative load exercise, after exhaustive exercise, after exhaustive exercise 24 hour.under the quiet state, after quantitative load exercise, exhaustion after exercise, exercise exhaustion after 24 hours, the total antioxidant capacity in the experimental group rats skeletal muscle was significantly higher than the control group (P<0.05), GSH content was significantly higher than the control group(P<0.05); quiet condition, after quantitative load exercise, after exhaustion exercise,MDA content in the experimental group rats skeletal muscle was significantly lower than control group (P<0.05)."compound antioxidants"can improve the antioxidant capacity in rats skeletal muscle under different functional state.
Key words:MDA;compound antioxidants;GSH
DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2013.14.007
任昭君(1971—),男(汉),副教授,硕士研究生,研究方向:运动生理学。
2013-01-09