微生物检验技术在基层血站质量控制中的应用

方世杰

(内蒙古根河市中心血库 022350)

血液的安全直接关系到献血者、受血者的生命安全，采供血工作又被形象的称为血管对血管工作，血液安全至关重要，但作为一个成立较晚偏远地区的基层血站，最初的成立之时，对于血液安全的理解更多的是传染性指标的安全，最近几年，随着血液事业的快速发展与完善以及国家对血液质量安全要求越来越严，办法、规范的持续不断更新与细化，血液的污染指标、献血者与员工的安全与传染性指标一样受到重视，由此以来，过去主要用于临床的辅助检查、药物敏感试验中，以帮助临床疾病的诊断及指导临床用药的微生物检验技术被越来越多的应用到采供血的质量控制中，经过本实验室近几年的努力，微生物检测的预防与监控已经应用到本血站的采供血的各个环节，为血站的质量控制提供了真实有效的依据，为血站的内部审核、质量管理提供了强有力的输入项。本血站的应用列举如下:

一、采供血环境空气消毒效果监测

包括采供血环境、血液冷藏箱内部空气消毒效果监测，掌握该环境消毒效果是否达标，对工作中存在问题可以及时发现、改进，以有效为献血者提供卫生安全舒适的环境，保护献血者安全及减少所献血液污染的机会。采样时机:消毒后采供血活动开始前，采样频次:每月一次，必要时增加采样频次，布点方法:室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3 点，内、外布点部位距墙壁1m处;室内面积＞30m2，设四角及中央5 点，4 角的点距墙壁1m 处。采样方法:穿工作服，戴工作帽和口罩进入被检房间，将预先准备好的灭菌分装的普通营养琼脂平皿放在室内各采样点，采样高度为距离地面1．5 cm，采样时将平皿盖打开，暴露5 分钟，盖好立即送检。检测方法:将采样后的平皿置于37℃恒温培养箱培养48小时，观察形成的菌落数，计算该采供血环境的细菌数，通过查对相关国家标准，报告监测结果。

二、采供血活动过程中所涉及的物体表面

检测包括:采供血操作台面、血液冷藏箱内表面，成分分离台面、离心机内表面、门把手、运血箱等，上述物体表面细菌总数超标，必然对血液及其制品造成质量安全隐患，甚至会危及工作人员，对物体表面的消毒效果进行监测，可以掌握消毒效果、选择适当消毒方案，及时发现问题进行纠正与预防。采样时机:消毒处理后进行采样，

采样方法:用5 cm ×5 cm 灭菌规格板，放置于被检物体表面，用浸有灭菌生理盐水采样液的棉拭子1 支，在规格板内横竖往返均匀涂抹5 次，并随之转动棉拭子，连续采样4 个规格板面积，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10 ml 无菌检验用洗脱液的试管中，做好标记，立即送检。检测方法:充分震荡采样管后，去不同稀释倍数的洗脱液1 ml 接种平皿，将冷却至40℃左右的融化的营养琼脂倾倒15 ～20 ml，37℃恒温培养箱培养48 小时，计算菌落数。

结果计算(cfu/ cm2)=平皿上的菌落数×稀释倍数(10)÷采样面积(100 cm2)=平皿上的菌落数×0．1

三、工作人员手指、献血者肘部消毒后细菌培养

采样时机:消毒后采血前;采样方法:同上(物体表面消毒采样)，5 ×5 cm 规格板采样面积，将采样后的棉拭子放入10 ml 中采样液中，送检。检测方法:同上(物体表面消毒)

结果计算:(cfu/ cm2)=平皿上的菌落数×稀释倍数(10)÷采样面积(25 cm2)=平皿上的菌落数×0．4

四、成分制品的细菌培养

血液成分制品细菌监测是血液质量控制的最后一关，血液成分制品检测也间接证明采供血各个环节操作是否合格。依据血站质量管理规范，血站实验室标准操作规程2012 版，对血液成分制品进行细菌指标检测，要求必须达到无菌生长。采样频次:每月对库存制品分类按库存比例进行抽检，抽样检测方法:采用无菌操作方法抽取样本，分别流体硫乙醇酸盐培养、改良马丁培养基25、37 培养14 天，未见细菌生长报告合格，出现细菌生长进一步鉴定。

讨 论

本血站通过近年来微生物检测监控，对员工起到了一定程度上的督促与监督，有微生物监控记录以来，血液制品监测无不合格现象发生，同时采供血环境、物体表面、工作人员手指及献血者肘部消毒效果监测中无一例细菌超标不合格现象发生。血站管理步入安全有序的轨道，极大程度取决于质量管理控制手段的应用，质量控制为血站质量管理及预防与纠正错误提供证据、资料，良好而完善的质量管理离不开质量控制，而血站的质量控制直接证据也将一定程度上来源于微生物检测，微生物检测技术在血站管理中将发挥不可替代的作用。