HPLC测定板蓝根药材及其制剂中表告依春含量的方法分析

梁 剑

（湘潭市中医医院，湖南 湘潭 411100）

HPLC测定板蓝根药材及其制剂中表告依春含量的方法分析

梁 剑

（湘潭市中医医院，湖南 湘潭 411100）

目的 探讨HPLC用于测定板蓝根及相关制剂当中表告依春的含量方法，从而控制板蓝根以及其相关制剂的质量。方法 选择反相高效的液相色谱法，其色谱柱定SB-C18ZORBAX（5μm，150mm×4.6mm)；其流动相三乙胺-磷酸-水-乙腈（0.05∶0.73∶90.72∶8.50）；其流速为每分钟0.7mL；其检测波长为245nm，其柱温为30℃。结果 在表告依春的含量测定中，其线性范围为0.3060～0.0204μg，其r为0.9998，其平均加样的回收率为98.99%，其RSD为1.31%。结论 高效的液相色谱法对板蓝根及其相关制剂中的表告依春进行含量测定，可靠准确，能够用于对板蓝根药材以及其相关制剂进行质量评价。

含量测定；制剂；高效的液相色谱法；表告依春；板蓝根

目前板蓝根为比较常用的一种抗病毒中药，最开始记载自《神农本草经》，其中表告依春系板蓝根起到抗病毒作用的有效成分，也是反映该药材及其相关制剂质量最重要的指标；本文研究选择反相高效的液相色谱法对板蓝根药材以及其相关制剂（包括板蓝根颗粒与复方的板蓝根颗粒以及板蓝根含片和板蓝根糖浆）当中的表告依春其含量进行测定[1-4]。报道如下。

1 资料与方法：

1.1 一般资料

l100 Agilent型高效的液相色谱仪（主要包括四元泵与自动进样器，以及DAD的阵列二极管检测器）；5200KQ型的超声清洗器；211D-BP电子天平。选定表告依春的对照品以及板蓝根，包括板蓝根颗粒与复方的板蓝根颗粒，包括板蓝根含片与板蓝根糖浆。

1.2 方法

1.2.1 色谱条件

C18 SB ZORBAX-色谱柱（5μm，150×4.6mm），三乙胺-磷酸-水-乙腈（0.05∶0.73∶90.72∶8.50）；其流速为每分钟0.7mL；其检测波长为245nm，其柱温为30℃。其高效的液相色谱可见图1。

1.2.2 其中对照品的溶液制备

首先称取其表告依春的对照品量1.0mg，予以精密称定后，放置在10mL容量的量瓶中，并加流动相直至刻度，当摇匀后，在制为质量浓度系每升0.102g的对照品溶液。

1.2.3 制备供试品溶液：

1.2.3.1 将板蓝根的药材供试品首先取粉末约为0.2g，予以精密称定，并置于50mL的锥形瓶中，再加入20mL的水后称重，以超声对其提取达60min后放冷，之后再称重，以水补足其损失的质量并过滤，再将初滤液弃去，之后取出2mL续滤液，再以水浴蒸干，其残渣加至流动相进行适量溶解，同时定容在10mL的量瓶当中予以摇匀，最后取出续滤液即可得到供试品的溶液。

1.2.3.2 制备板蓝根颗粒的供试品

首先取出本品10袋并研细，选取2g并精密称定，再置于50mL的锥形瓶当中，之后加入20mL的水，通过水浴加热同时震摇将其溶解后摇匀并过滤，再将初滤液弃去，之后取2 mL续滤液以水浴蒸干，其残渣加至流动相予以适量溶解，同时定容在10mL的量瓶当中并摇匀。

图1 高效的液相色谱

1.2.3.3 制备板复方蓝根颗粒的供试品

取出本品10袋，研细，精密量取2g，置于50mL锥形瓶中，加入20mL水，水浴加热并振摇，使其完全溶解，过滤，取续滤液2mL，水浴蒸干，残渣加适量流动溶解，置于10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

1.2.3.4 制备板蓝根含片的供试品溶液

取10片本品，将其研细后取0.8g并精密称定，再置于50mL的锥形瓶之中，接着加20 mL水，以水浴加热，同时震摇溶解，在摇匀后过滤弃去其初滤液，再取2mL续滤液予以水浴蒸干，其残渣加入流动相进行适量溶解，之后定容在10mL的量瓶中予以摇匀。

1.2.3.5 制备板蓝根糖浆的供试品溶液

精密称定5mL本品，将其置于50mL的锥形瓶当中，之后加20mL水，予以摇匀，在摇匀后过滤掉其初滤液，再取2mL的续滤液给以水浴蒸干，其残渣加入流动相进行适量溶解，之后定容在10mL的量瓶中予以摇匀。

1.2.4 考察线性关系

首先精密量取每升0.102g的上述对照品，将其分别放置在量瓶（10mL）中，一直加流动相到刻度并摇匀，再分别吸取对照品溶液，然后按照上述2.1的色谱条件予以测定，同时以y（峰面积），X（对照品质量）予以线性回归。

1.2.5 精密度试验

先要精密量取密度为每升8.16mg的对照品溶液，共20uL，基于同样的条件下来回进样6次，计算出对照品的峰面积为1496.44，RSD0.58%，说明其精密度状况良好。

1.2.6 稳定性试验

准备好待测的供试品溶液，然后参考上面色谱条件进行相关操作，在0h、2h、4h、8h、16h……进样，得出最后的峰面积，根据峰面积得出平均的峰面积是1506.45，RSD1.02%。

1.2.7 重复性试验

量取同批次板蓝根药材0.2g，称定6份，根据以上方法制备出6份供试品溶液，精密取出20uL，然后参考上面色谱条件进行相关测定，得出表告依春质量分数是每g中含有4.245mg，RSD1.43%。

1.2.7 加样回收率试验

量取既定含量的表告依春板蓝根粉0.11g，称定9份，对每3份添加等量表告依春，根据上面所讲的方式来制备出供试品，进行测定。得出9份平均回收率是97.99%，RSD1.33%。

2 结 果

称定出：①0.2g板蓝根的药材粉末，②2g板蓝根的颗粒粉末，③2g复方板蓝根的颗粒粉末，④0.8g板蓝根的含片粉末，⑤5mL板蓝根糖浆，按照1.2.1项目下的色谱条件，以外标法予以测定，同时计算各个样品中其表告依春所占的含量，其测定结果可见下表1。

3 讨 论

表1 上述样品中其表告依春所占的质量分数

3.1 据文献报道，以HPLC对板蓝根中其靛蓝与靛玉红等有效含量进行测量，其中靛蓝与靛玉红主要呈脂溶性，以水来提取大多提取不出，但实际的生产中，其板蓝根则多系水提取；此外，目前板蓝根于临床上最主要的应用是用作抗病毒药物，由于靛蓝以及靛玉红均不具抗病毒的活性，所以靛蓝以及靛玉红的含量不适合用于板蓝根以及其相关制剂的进行含量测定的指标；在本研究中，选择RP与HPLC来测定板蓝根以及其相关制剂中所含表告依春的量，应用此法不仅重复性好，而且准确度也较高，应予推广。

3.2 在本文试验中，对比甲醇一水与甲醇含酸水以及乙腈和含酸水流的动相系统中洗脱情况，其结果显示：所测乙腈含酸水的流动相系统同甲醇一水以及甲醇含酸水相较，差异显著，由于甲醇水系统能够让表告依春以及其他成分难于分开，所以甲醇含酸水同样也不能够呈较好的分离。

3.3 综上所述，高效的液相色谱法对板蓝根及其相关制剂中的表告依春进行含量测定，可靠准确，能够用于对板蓝根药材以及其相关制剂进行质量评价。

[1] 国家药典委员会.中国药典.一部[S].北京:化学工业出版社,2005: 142.

[2] 徐丽华,黄芳,陈婷,等.板蓝根中的抗病毒活性成分[J].中国天然药物,2005,3(6): 359.

[3] 黄芳,熊雅婷,徐丽华,等.板蓝根不同提取物中抗病毒成分表告依春在大鼠体内的药代动力学[J].中国药科大学学报,2006,37 (6):519.

[4] 安益强,贾晓斌,袁海建,等.HPLC测定板蓝根药材及其制剂中表告依春的含量[J].中国中药杂志,2008,33(18):12.

R282.71.03

B

1671-8194（2013）21-0102-02