子宫内膜癌组织中过氧化物酶体增生物激活受体γ的表达及意义

王三锋，李 沫，柳晓春，周东华，左 越，潘淑芬，陈 莹，郑玉华

(1佛山市妇幼保健院，广东佛山528000;2广东省中医院)

近年研究表明，激素受体和其他核受体在子宫内膜癌的发生、发展中具有重要作用［1］。过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)是核激素受体超家族中的成员，与配体结合后可启动核内靶基因的转录，发挥重要的核转录因子功能，在炎症、动脉粥样硬化、脂类代谢、糖尿病和肿瘤的形成机制中扮演重要角色。2006年1月～2010年1月，我们观察了子宫内膜癌组织中PPARγ的表达情况，并分析其在子宫内膜癌发生、发展中的可能机制。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择在佛山市妇幼保健院手术切除的子宫内膜癌组织及癌旁0.4 cm组织标本各40份，并选取同期因子宫良性病变行全子宫切除术的30份正常子宫内膜(增生期、分泌期各15份)作对照。所选患者临床病理资料完整，术前均未行放疗、化疗或孕激素治疗。根据FIGO手术病理分期:Ⅰ期23例、Ⅱ期12例、Ⅲ期5例;术后病理确诊肌层浸润＜1/2有21例，肌层浸润≥1/2有19例;27例术中行淋巴结清扫患者中，9例有淋巴结转移。

1.2 方法

1.2.1 免疫组织化学染色 取组织标本，石蜡包埋，连续4μm切片，常规脱蜡、水化后，3%H2O2室温孵育;抗原加热修复，滴加一抗工作液，室温下孵育，加入适量生物素标记二抗工作液，显色剂显色，自来水充分冲洗、复染、脱水、透明、封片。用已知阳性切片作阳性对照，用PBS液代替一抗作为阴性对照。

1.2.2 结果判读 PPARγ阳性细胞定位于细胞核内，呈棕黄色。随机计数5个不重叠的200倍视野，每个视野选择200个目标细胞，共计1 000个细胞进行评分。综合染色强度和阳性细胞所占比例进行评分。阳性细胞所占比例评分标准:阳性细胞数＜10%者0分，10% ～40%者1分，＞40% ～70%者2分，＞70%者3分。染色强度评分标准:不着色0分，黄色1分，棕黄色2分，黄褐色3分。两者评分相加，0～1分者为阴性，2分为弱阳性，3～4分为阳性，5～6分为强阳性。雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)判读:肿瘤细胞的细胞核内出现棕黄色细颗粒状物质为阳性，细胞必须结构清晰，定位好;将染色结果分为4级:①阴性:无染色或染色弱，染色范围＜25%;②弱阳性:染色弱，染色范围≥25%且＜50%;③阳性:染色强，染色范围≥50%且≤75%;④强阳性:染色强，染色范围＞75%。

1.2.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件，计数资料以百分数表示，比较采用协方差分析、单因素方差分析或 Fisher确切概率法，相关性分析采用Pearson相关分析。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 PPARγ在不同子宫内膜组织中的表达 见表1。以PPARγ阳性表达作为因变量，分组因素作为自变量，年龄、是否绝经等作为协变量进行协方差分析，子宫内膜癌组织中的PPARγ蛋白阳性表达率高于正常子宫内膜组织(P＜0.01);而采用单因素方差分析后发现，正常子宫内膜中PPARγ蛋白阳性表达率低于子宫内膜癌组织及癌旁组织(P均＜0.05);但子宫内膜癌与癌旁组织中PPARγ蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.2 ER、PR在子宫内膜癌中的表达 在子宫内膜癌中，ER的阳性表达率为72.5%，PR的阳性表达率为82.5%，两者的表达存在正相关(r=0.617 7，P＜0.01)。

表1 PPARγ在正常组织、癌旁组织、子宫内膜癌组织中表达

2.3 PPARγ与子宫内膜癌患者临床病理学特征的关系 见表2。

表2 PPARγ与子宫内膜癌患者临床病理学特征的关系

2.4 PPARγ在子宫内膜癌组织中的表达与ER、PR表达的关系 Pearson相关分析显示，PPARγ的表达与ER 的表达呈正相关(r=0.421 9，P ＜0.05)，与PR 的表达呈正相关(r=0.505 1，P ＜0.05)。见表3、4。

表3 PPARγ、ER在子宫内膜癌中的表达(例)

表4 PPARγ、PR在子宫内膜癌中的表达(例)

3 讨论

子宫内膜是雌激素的靶器官，长期受到无孕激素拮抗的雌酮的影响，可导致内膜由增生到癌变。ER、PR是子宫内膜接受激素调节的物质基础。细胞癌变后，ER、PR的产生和作用受到损伤，当癌细胞恶变达到一定程度时，组织就会失去ER、PR［2］。国内外众多学者认为，子宫内膜癌是激素依赖性肿瘤，ER、PR与子宫内膜癌的发生、发展密切相关［3，4］;在内膜癌变过程中，部分细胞受体会丧失对性激素的识别功能，由激素依赖性转化为非依赖性，当肿瘤恶性程度达到一定阶段就会失去ER、PR。因此，ER、PR可以作为子宫内膜癌诊断、治疗及预后的指标之一，在临床有重要意义。

PPARγ对脂质代谢、脂肪形成、细胞分裂和凋亡等多种生物学过程具有调节作用。PPARγ位于机体多种信号传导通路的交叉点，若被配体激活不仅可诱导多种肿瘤分化，并抑制其恶性增殖，而且可导致肿瘤细胞的凋亡，从而成为新的肿瘤治疗靶点。PPARγ激动剂抗肿瘤的可能机制在于:活化的PPARγ可通过调节细胞周期使肿瘤细胞停滞于G1期，并抑制其增殖，主要途径有促进p21的表达，诱导细胞分化，诱导瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管发生等［5，6］。

PPARγ表达在脂肪组织和免疫系统中最多，在子宫内膜癌等组织中也有表达。Oko等［7］研究发现，PPARγ在子宫内膜增生组织的阳性率远高于正常子宫内膜组织，也高于子宫内膜癌组织。本研究发现，在子宫内膜癌组织中存在PPARγ的阳性表达，且正常子宫内膜中PPARγ表达低于子宫内膜癌及癌旁组织，提示PPARγ的表达在子宫内膜癌组织上调，显然是从正常内膜组织中的沉默状态转化为肿瘤组织中的激活状态，但其分子机理有待进一步探讨。Suzuki等［8］研究发现，乳腺癌组织PPARγ阳性表达率为42%，且与肿瘤组织的组织学分级呈负相关;低分化乳腺癌组织中PPARγ表达显著减少，在高分化乳腺癌组织中表达明显升高。本研究发现，在子宫内膜癌中，PPARγ蛋白的阳性表达率为67.50%，且与组织学分级、FIGO分期呈正相关。

近年研究发现，PPARγ激动剂可抑制激素依赖性的子宫肌瘤增殖，提示PPARγ受体与ER存在交互联系。乳腺癌细胞株的PPARγ表达被激活后，PPARγ配体可阻碍雌激素的局部生物合成;PPARγ配体TGZ可阻碍致癌物诱导的鼠乳腺组织转化，而且联合维甲酸受体配体(LG10068)可显著增强这种效应，从而起到很好的预防肿瘤的作用。Gunin等［9］体外实验发现，PPARγ配体可改变增生期子宫内膜的形态，逆转子宫内膜的不典型增生，下调ER-α和ER-β的表达。本研究发现，子宫内膜癌组织中PPARγ的表达与ER以及PR的表达量呈正相关，这与乳腺癌组织的研究结果一致。据此推测，PPARγ可能参与雌激素致癌过程的部分分子机制。

综上所述，PPARγ的过表达是子宫内膜癌发生、发展过程的早期事件，PPARγ激动剂用于子宫内膜癌变的治疗，可有效逆转不典型增生向子宫内膜癌的发展。

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