喙尾琵琶甲流浸膏的镇痛及抗炎作用研究

王莹，罗菊花，张海珠，董必美，巫秀美

（大理学院，云南大理671000）

喙尾琵琶甲流浸膏的镇痛及抗炎作用研究

王莹，罗菊花，张海珠，董必美，巫秀美*

（大理学院，云南大理671000）

目的：观察喙尾琵琶甲流浸膏对小鼠的镇痛及抗炎作用。方法：用热板法和醋酸扭体法测定小鼠的痛阈值，二甲苯耳肿胀法测定抗炎作用。结果：喙尾琵琶甲流浸膏高、低剂量组均能提高扭体小鼠痛阈值，高剂量组能显著提高热板实验小鼠痛阈值；喙尾琵琶甲抗炎作用不明显。结论：喙尾琵琶甲流浸膏具有明显的镇痛作用，抗炎作用不明显。

喙尾琵琶甲流浸膏；热板实验；醋酸扭体实验；二甲苯致耳肿胀实验

喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera Fairmaire属鞘翅目Coleoptera拟步甲科Tenebrionidae，是云南民间长期使用的一种药用昆虫，尤其是生活在云南的彝族人民用它来治疗发烧、咳嗽、牙痛、胃炎、疔疮、肿瘤等症〔1〕。虽然使用的历史悠久，但目前对其药效学的基础性研究较少，临床应用的研究及报道也并不多见〔2〕。为了更好地开发利用这一昆虫药物，本文对喙尾琵琶甲粗提物的镇痛及抗炎作用进行研究。

1 材料

1.1 药物喙尾琵琶甲流浸膏制备，取喙尾琵琶甲鲜品，粉碎后用95%乙醇浸泡提取3次，合并提取液，减压浓缩成浸膏，收率控制在20%~25%，样品放置4℃下保存，使用时用生理盐水配制成高、低浓度，分别为0.2 g（浸膏质量）/mL和0.4 g/mL；阿司匹林肠溶片（规格：0.3 g/片，湖南新汇制药有限公司，批号：080903，以生理盐水配制成0.03 g/mL浓度供实验用）；醋酸（分析纯，广东汕头新宁化工厂，批号：950517）；二甲苯（天津市科密欧化学试剂有限公司，批号：20060828）。

1.2 动物KM种小鼠，体重（20±2）g，雌雄各半（热板实验除外），由大理学院实验动物中心提供，合格证号：SCXK。

1.3 仪器RB-200智能热板仪（成都泰盟科技有限公司出品）；TP电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。

2 方法与结果

2.1 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响取KM种小鼠按体重随机分成喙尾琵琶甲流浸膏高、低剂量组，阳性对照阿司匹林组，空白对照组，每组12只，雌雄各半。各组按0.3 mL/20 g灌胃给予相应药物，空白对照组灌服等体积生理盐水，1次/d，连续给药5 d，于末次给药后1 h，将0.02 mL二甲苯均匀涂于小鼠右耳廓两面致炎，左耳不涂作对照，致炎后30 min脱颈椎处死小鼠，以7 mm直径打孔器取下耳缘左、右耳片，分别用电子天平称重，以右、左耳片重量差表示肿胀度（肿胀度=右耳片重-左耳片重）〔3-4〕。结果表明喙尾琵琶甲流浸膏对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响不明显，高、低剂量组与空白对照组比较差异无统计学意义。见表1。

表1 喙尾琵琶甲流浸膏对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

2.2 对小鼠热板致痛作用的影响选择健康的雌性KM种小鼠为实验动物。实验前，在（55±0.5）℃的热板上测定基础痛阈值，选痛阈值范围在5~30 s的小鼠供实验用〔5-7〕。合格小鼠依体重随机分为4组，各组操作同2.1项。于最后一次给药后30、60、90 min测定小鼠的痛阈值，痛阈值超过60 s者按60 s计。结果表明，喙尾琵琶甲流浸膏高剂量组在给药后各时间点均明显提高小鼠的痛域值，低剂量组作用不明显。见表2。

2.3 对醋酸致小鼠疼痛作用的影响取健康KM种小鼠依体重随机分4组，每组雌雄各半，各组操作同2.1项。末次给药后30 min，各组各鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/鼠，观察记录各鼠在腹腔注射醋酸后的15 min内扭体次数，并计算抑制率〔8〕。反应抑制率=（空白对照组平均扭体次数-实验组平均扭体次数）/空白对照组平均扭体次数的百分率。结果显示喙尾琵琶甲流浸膏低、高剂量组对醋酸所致小鼠扭体反应抑制率分别为42%和49%，抑制作用明显。见表3。

表2 喙尾琵琶甲流浸膏对小鼠热痛阈值的影响

表3 喙尾琵琶甲流浸膏对冰醋酸所致小鼠扭体反应的影响

3 讨论

小鼠的爪趾对热刺激非常敏感，其表现为跳跃、缩足和舔后足。热板法适合于评价中枢镇痛研究药物。扭体实验是通过注射冰醋酸刺激腹膜产生疼痛表现，适合于对外周镇痛药物的研究〔9〕。本实验通过热板法和冰醋酸扭体法分别从中枢镇痛和外周镇痛两方面进行药效学的评价，由热板实验可见，高剂组用药后可显著延长热刺激致小鼠舔后足的潜伏期，说明高剂量喙尾琵琶甲流浸膏能增加热板小鼠的痛阈值。扭体实验结果证明喙尾琵琶甲流浸膏高、低剂量组对醋酸所致小鼠扭体反应抑制率分别为49%和42%，抑制作用明显。综合以上研究结果表明，喙尾琵琶甲流浸膏具有较好的镇痛作用，尤其是对醋酸所致外周性疼痛效果更佳，在较低剂量就能显示明显镇痛作用。抗炎实验结果证明，喙尾琵琶甲流浸膏对二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制作用不明显，与空白对照组相比，高、低剂组对耳肿胀度均有一定的影响，但差异无统计学意义。说明喙尾琵琶甲流浸膏在以上两个剂量下抗炎作用弱。

目前对于喙尾琵琶甲的药效学和毒理学相关研究很少，尤其是毒理学相关的文献资料几乎为零，这给剂量的设置带来了困难，本实验中剂量的设置主要是参照民间验方中所使用的剂量折算而来，在此剂量范围下不能全面的反映喙尾琵琶甲的药理作用，今后还应从毒理学实验，制定药材质量标准等方面对其进行深入研究。

〔1〕罗建蓉，何江波，张桢，等.药用昆虫喙尾琵琶甲化学成分研究〔J〕.中成药，2010，32（11）：2013-2014.

〔2〕张兰胜，夏从龙，杨永寿，等.彝药喙尾琵琶甲的研究进展〔J〕.时珍国医国药，2009，20（12）：3113-3114.

〔3〕陈睿，姚素波，汪茜，等.风寒感冒分散片流浸膏解热、镇痛及抗炎作用的观察〔J〕.中成药，2010，32（5）：856-858.

〔4〕张琪，汪仙阳，马博，等.复方续断总皂苷镇痛抗炎及预防骨质疏松症的实验研究〔J〕.时珍国医国药，2010，21（7）：1683-1684.

〔5〕努尔买买提，斯拉甫，希尔艾力.维药祖卡木颗粒的解热镇痛作用研究〔J〕.中国民族医药杂志，2000，6（4）：33-34.

〔6〕张坚，程体娟，裴古军.金七叶合剂解热镇痛作用研究〔J〕.中药药理与临床，2002，18（3）：29-30.

〔7〕刘映红，林斌，何贵锋，等.正骨方抗炎镇痛活血作用的实验研究〔J〕.中药材，2010，33（8）：1315-1316.

〔8〕冯丽娟，周本杰.退热止痛散活性部位解热镇痛药效评价〔J〕.中药材，2009，32（4）：589-591.

〔9〕沃格尔H.G，沃格尔W.H.药理学实验指南-新药发现和药理学评价〔M〕.北京：科学出版社，2001：491-492.

（责任编辑 毛本勇）

Study of the Analgesic and Anti-inflammatory Effects of Fluid Extract from Blaps rynchopetera Fairmaire

WANG Ying,LUO Juhua,ZHANG Haizhu,DONG Bimei,WU Xiumei*
（Dali University,Dali,Yunnan 671000,China）

Objective:To investigate the analgesic and anti-inflammatory effect of the fluid extracts of Blaps rynchopetera Fairmaire（EBRF）.Methods:Hot-plate test and acetic acid twisting method were applied to determine the pain threshold of the mice,and mouse ear swelling test induced by dimethylbenzene was applied to evaluate the anti-inflammatory effect.Results:Both at high and low dose,fluid extracts of B.rynchopetera could prolong the mice pain threshold time in acetic acid twisting method,while only at the high dose could prolong the time in hot-plate test.There was no anti-inflammatory effect of B.rynchopetera.Conclusion:There is notable analgesic effect and no anti-inflammatory effect of B.rynchopetera.

fluid extracts of B.rynchopetera;hot-plate test;acetic acid twisting method;mouse ear swelling test induced by dimethylbenzene

R285.5

A

1672-2345（2013）06-0005-03

10.3969/j.issn.1672-2345.2013.06.002

大理学院青年教师科研基金资助项目（KYQN2009-41）

2013-01-31

2013-03-11

王莹，讲师，主要从事抗老年痴呆药物研究. *通信作者：巫秀美，博士.