毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫的作用
2013-04-11柳斌郭美仙刘勇陆翠芬刘光明陈光勇
柳斌，郭美仙，刘勇，陆翠芬，刘光明，陈光勇
（大理学院药学与化学学院，云南大理671000）
毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫的作用
柳斌，郭美仙，刘勇，陆翠芬，刘光明，陈光勇*
（大理学院药学与化学学院，云南大理671000）
目的：研究毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫的作用。方法：取成熟雌性未孕大鼠，用击打法处死，取子宫角制备大鼠离体子宫段，采用BL-420E+生物机能系统记录子宫张力信号，观察毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫自发收缩和催产素诱发收缩的影响。结果：毛大丁草叶醇提物可以使大鼠离体子宫收缩频率减慢、强度减小和活动力减弱。结论：毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫自发收缩和催产素诱发收缩均具有明显的抑制作用。
毛大丁草叶；醇提物；大鼠；离体子宫
毛大丁草Gerbera piloselloides（L.）为菊科帚菊木族大丁草属植物，是多年生被毛草本植物。在我国分布于西藏、云南、四川、贵州、广西、广东、湖南、湖北、江西等地〔1〕，又名兔耳风和毛耳风〔2〕。毛大丁草全草入药，全草包括叶、花、根、根茎，主治伤风感冒、咳嗽痰多、扁桃腺炎、水肿、胃及十二指肠溃疡、胃肠炎、毒蛇咬伤等〔3〕。具有清热解毒、理气和血的功效，治痈肿、乳蛾、痄腮、瘰疬结核、胸肋痞气、疝气、下血〔4-5〕。相关研究表明毛大丁草具有镇咳、祛痰、平喘等作用〔4，6-7〕。还有研究表明，毛大丁草有良好的抗菌作用〔8〕。目前，国内尚未见毛大丁草叶对动物离体子宫作用的研究报道，为此我们对毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫的作用进行了研究，为更好地开发利用毛大丁草提供一定的科学依据。
1 材料
1.1 动物清洁级SD大鼠，成熟雌性未孕，体重（240±10）g，由昆明医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（滇）2011-0004。
1.2 试剂己烯雌酚（批号：950710111，厂家：上海第九制药厂）；催产素注射液（批号：060405，厂家：上海第一生化药业有限公司）；营养液（g/L）：NaCl 9.0，KCl 0.42，CaCl20.06，NaHCO30.5，葡萄糖0.5，通氧30 min。
1.3 样品毛大丁草采自云南省大理市下关镇，经大理学院生药学周浓副教授鉴定为菊科大丁草属植物毛大丁草。将叶粉碎后，取叶粉600 g，无水乙醇回流提取3次，每次2 h。合并提取液，用旋转蒸发器浓缩成浸膏240 g。临用时用蒸馏水配制成560 mg/mL的毛大丁草叶醇提物混悬液（GPC）。
1.4 仪器FW135中药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），SHZ-D循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司），RE-200旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂），YP3001N电子天平（上海精密科学仪器有限公司），HW-400S恒温平滑肌槽（成都泰盟科技有限公司），BL-420E+生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司）。
2 方法
2.1 分组及标本制备取大鼠，于实验前48 h，肌肉注射1次0.1%己烯雌酚0.1 mL/100 g，人工促使大鼠处于动情期或动情前期，以提高子宫平滑肌对药物的敏感性。实验时将大鼠随机分为2组。用击打法处死大鼠，剖腹取出子宫，立即置于盛有冷营养液的培养皿中，剥离附着于子宫角的结缔组织和脂肪组织。将子宫角剪成长约1.5~2 cm子宫段，一端穿线固定于通气钩，另一端通过蛙心夹与张力换能器相连，将标本转入盛有营养液的肌槽中。每个肌槽中分别盛有19.5 mL营养液，恒温（32±0.5）℃，通予95% O2+5%CO2的混合气体，每个子宫段负荷1 g，每10 min更换一次新鲜的营养液（32℃），稳定20 min，待收缩频率和张力规则后开始试验〔9-12〕。
2.2 给药及记录每加入一种试剂并描记10 min，换液5次，稳定20 min。描记10 min离体子宫段的自发收缩活动，依次分别加入生理盐水、0.01 U/mL催产素、560 mg/mL毛大丁草叶醇提物各0.5 mL，为自发收缩实验组；描记10 min离体子宫段的自发收缩活动，依次分别加入生理盐水、0.01 U/mL催产素、560 mg/mL毛大丁草叶醇提物+0.01 U/mL催产素，为诱发收缩实验组。
2.3 数据统计用区间测量方法测量：给药后10 min的平均收缩频率；平均收缩强度（最大收缩张力）；计算子宫活动力（强度*频率）。数据以均数±标准差（）表示，采用SPSS 17.0统计软件进行组间t检验。
3 结果
3.1 毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫自发收缩的影响表1显示：与正常比较，催产素使大鼠离体子宫平滑肌自发收缩的频率加快（P<0.01）；强度增大（P<0.01）；子宫活动力增强（P<0.01），表明离体子宫标本具有活性。与正常比较，毛大丁草叶醇提物使大鼠离体子宫平滑肌自发收缩的频率减慢，但差异无统计学意义；收缩强度减小（P<0.01）；子宫活动力减弱（P<0.05），表明毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫平滑肌的自发收缩有抑制作用。
表1 毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫自发收缩的影响（，n=10）
表1 毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫自发收缩的影响（，n=10）
注：与正常比较：*P<0.05，**P<0.01。
3.2 毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫催产素诱发收缩的影响表2显示：与正常比较，催产素使大鼠正常离体子宫平滑肌收缩的频率加快（P<0.01）；强度增大（P<0.01）；子宫活动力增强（P<0.01），表明离体子宫标本具有活性。与催产素比较，毛大丁草叶醇提物使大鼠离体子宫平滑肌催产素诱发收缩的频率减慢（P<0.01）；强度减小（P<0.01）；子宫活动力减弱（P<0.01），表明毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫平滑肌的催产素诱发收缩有抑制作用。
表2 毛大丁草叶醇提物对大鼠离体子宫催产素诱发收缩的影响（x±s，n=10）
4 讨论
非孕期和非病理情况下女性是感觉不到子宫收缩的，只有当怀孕或是子宫异常时才能感觉到。孕期的病理性子宫收缩见于流产或早产，故均为有痛性收缩；非孕期有强度较大的子宫收缩，属于异常收缩。由子宫收缩引起的疼痛是一种特殊的疼痛，临床上的镇痛药种类很多，但不是对其疗效不明显，就是毒副作用较多，而中药则有很好的镇痛作用，同时毒副作用较少。
本试验采用BL-420E+生物机能系统记录子宫张力信号，观察大鼠离体子宫在加入受试物后的张力变化。结果发现，毛大丁草叶醇提物可抑制大鼠离体子宫的自发收缩和催产素诱发收缩，表现为收缩频率减慢、强度减小和活动力减弱，从而证实毛大丁草叶醇提物能抑制大鼠离体子宫平滑肌的收缩功能。但其作用机制，尚需进行进一步的实验研究。
〔1〕程用谦.中国植物志〔M〕.北京：科学出版社，1996：94-96.
〔2〕刘善述，李文虎，孙西.草木便方〔M〕.重庆：重庆出版社，1989：97.
〔3〕魏珠生，吴天开，郑中楷，等.福建药物志〔M〕.福州：福建科学技术出版社，1994：351-352.
〔4〕江苏新医学院.中药大辞典：上册〔M〕.上海：上海科学技术出版社，1977：446-448.
〔5〕药理学组.毛大丁草镇咳、祛痰作用的实验研究〔J〕.医药科技资料，1977（1）：31.
〔6〕唐小江，黄华容，方铁铮，等.毛大丁草根止咳化痰活性成分的研究〔J〕.中国中药杂志，2003，28（5）：426-428.
〔7〕张世武，刘国雄.毛大丁草“平喘”作用的实验观察〔J〕.遵义医学院学报，1980，4（1）：7.
〔8〕唐小江，张援，黄华容，等.毛大丁草不同部位挥发油成分的比较〔J〕.中山大学学报：自然科版，2003，42（2）：124-125.
〔9〕陈奇.中药药理研究方法学〔M〕.北京：人民卫生出版社，2006：463-464.
〔10〕Karsli B，Kayacan N，Kucukyavuz Z，et al.Efects of local an esthetics on pregnant uterine muscles〔J〕.Pol J Pharmacol，2003，55（1）：51-56.
〔11〕刘丽芬，柴天川，崔文华.引产餐醇提取物对大鼠子宫的影响〔J〕.时珍国医国药，2008，19（4）：820-821.
〔12〕谢燕，玄振玉，于莉，等.舒经克痛软胶囊对大鼠子宫活动的影响〔J〕.中国中药杂志，2008，33（12）：1466-1469.
（责任编辑 李杨）
In Vitro Study of the Effect of Gerbera piloselloides Ethanol Extract on the Uterus of Rat
LIU Bin,GUO Meixian,LIU Yong,LU Cuifen,LIU Guangming，CHEN Guangyong*
（College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China）
Objective:To investigate the effect of ethanol extract from leaves of Gerbera piloselloides on the uterus of rat in vitro. Methods:Ten mature female but not pregnant SD rats were executed by strike,and uterine horns were used for the rat uterus segment in vitro.BL-420E+Biological Functional System was used to record uterine tension,the effect of Gerbera piloselloides Ethanol Extract on spontaneous contraction and oxytocin-induced contraction of uterus were recorded.Results:The extract could slow down the uterine contraction frequency and decrease the contraction intensity,and weaken the uterine motility as well. Conclusion:The ethanol extract of Gerbera piloselloides has significant inhibitive effect on the spontaneous contraction and oxytocininduced contraction of rat uterus in vitro.
Gerbera piloselloides;ethanol extract;rat;uterus in vitro
R285.5
A
1672-2345（2013）06-0090-03
10.3969/j.issn.1672-2345.2013.06.026
大理州科技局科研基金资助项目（2060402）；大理学院大学生科研基金资助项目（DXSKYY201123）
2012-08-30
2013-04-29
柳斌，药学专业2009级本科生. *通信作者：陈光勇，副教授.
