银黄颗粒中黄芩苷含量测定方法研究

2012-10-25巴小翠高延甲

药学研究 2012年1期

巴小翠，高延甲

（东营市药品检验所，山东东营257091）

银黄颗粒收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第六册.由金银花提取物，黄芩提取物组成，具有清热，解毒，消炎的功效.金银花提取物为方中君药，黄芩提取物虽为臣药，但其药理作用非常重要，该标准中仅有黄芩的薄层鉴别，没有定量指标，本文参照《中国药典》2010年版（一部）黄芩药材中黄芩苷的含量测定方法，对制剂中黄芩苷进行含量测定［1］.

1 仪器与试药

Agilent型液相色谱仪（美国）、METTLER TOLEDO XS205DualRange电子分析天平、KQ－500B型超声波清洗器，甲醇为色谱纯试剂，水为纯化水，其他试剂为分析纯.黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：110715－201016），银黄颗粒（四川升和制药股份有限公司，批号：100911、100923、100952）.

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱 Kromasil C18色谱柱（4.6mm×250 mm，5μm），以甲醇－水－磷酸（47∶53∶0.2）为流动相，检测波长274nm，柱温30℃ ，流速：1.0mL·min－1.

2.2 供试品溶液的制备［1］取装量差异项下的本品，研细，取约0.1g，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇约40mL，超声处理50min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液.

2.3 对照品溶液的制备取60℃真空干燥4h的黄芩苷对照品适量，精密称定，至容量瓶中，加50%甲醇制成60μg·mL－1的溶液，作为对照品溶液.

2.4 阴性样品溶液的制备按处方制备不含黄芩提取物的阴性样品，照“2.2”供试品溶液的制备方法制得阴性样品溶液.

2.5 干扰试验分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液与阴性样品溶液，注入液相色谱仪测定，色谱图见（图1～3），结果阴性样品溶液在此条件下对黄芩苷测定无干扰.

2.6 线性关系的试验精密称取黄芩苷对照品12.00mg，置200mL棕色量瓶中，加50%甲醇150mL，振摇10min，使充分溶解，再用50%甲醇稀释至刻度，摇匀.精密吸取25 mL，置100mL棕色量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀.分别精密吸取黄芩苷对照品溶液2、4、6、8、10μL注入液相色谱仪中，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，经线性回归，回归方程：Y＝77 910X＋17 014，r＝0.999 5.表明黄芩苷进样量在0.03～0.15μg范围内线性关系良好.

2.7 精密度试验精密吸取2.3项下对照品溶液10μL，重复进样5次，测得峰面积的RSD为0.7%（n＝5），结果表明仪器精密度良好.

2.8 稳定性试验取供试品溶液，分别在0、2、4、6、8、10h进样10μL，测得峰面积的RSD为1.0%（n＝6）.实验结果表明，供试品溶液在10h内稳定性良好.

2.9 重复性试验精密称取同一批样品5份，照“2.2”项下方法制备供试品溶液，进样10μL测定，黄芩苷含量平均为19.8mg·g－1，RSD为1.5%（n＝5）.表明分析方法重现性好.

2.10 加样回收率试验精密称取已知含量的同一批号样品6份，分别精密加入对照品溶液（黄芩苷对照品10.2mg，加甲醇至10mL）1mL，按“2.2”项下供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，进样10μL测定峰面积，计算回收率，结果见表1.