高效价冷凝集素引起血型鉴定困难1例

冯素芳

患者，男，62岁，汉族，既往无输血史，有糖尿病史，2011年4月因发热，便血，下肢疼痛入我院治疗。血常规:HB:58 g/L，RBC:1.93×1012/L，申请悬浮红细胞2 U，血浆400 ml。复检血型时发现正反定型不一致，正定型为AB型，反定型与A细胞，B细胞，O细胞均凝集，正反定型不符，经近一步检测，证实为AB型，正反定型不一致是由于其自身含有冷凝集素所致。

1 血型血清学检查

1.1 试剂与仪器 抗A、抗B单克隆血清(长春博德，批号:20100712);反定型试剂红细胞:自制;筛选试剂红细胞(长春博讯，批号:20110206);抗Ig-G，C3d、抗IgG、抗C3d(上海医药，批号:20100608);凝聚胺试剂(珠海贝索，批号:110053);抗人球蛋白交叉配血卡(长春博讯，批号:20100608);BASO-2002-2离心机。FYQ型免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清学离心机(长春博研)。37℃水浴箱。

1.2 血型鉴定 取干燥洁净的试管三支，分别加入抗A、抗B、抗AB血清各两滴，再分别加入患者3%红细胞悬液一滴，混合;另取干燥清洁的试管3支，各加入患者血清2滴，再分别加入A、B、O型3%红细胞悬液1滴，混合;另取一只试管，加入患者血清2滴及患者红细胞悬液1滴，混合。1 000 r/min，1 min。镜下观察。将患者正反定型试管均放入37℃水浴箱中10 min，取出轻轻混匀观察记录结果。

1.3 吸收冷凝集素 用37℃0.9%氯化钠溶液洗涤患者红细胞3次，然后用患者的血清与等体积3洗后的压积红细胞混合，置4℃冰箱中过夜，次日将该血清与A细胞，B细胞，0细胞及自身细胞在20℃反应，记录结果。

1.4 直接抗人球蛋白实验 取洁净干燥试管三支，分别加入抗-IgG，C3d、抗-IgG、抗-C3d血清各1滴，各加入患者洗涤3次后配制的3%红细胞悬液1滴，混合，1 000 r/min，离心1 min。

1.5 抗体筛选试验 按照不规则抗体筛查操作说明书进行。

1.6 冷凝集素效价测定［1］将患者血清经连续倍量稀释，分别加入3%O型红细胞1滴，混匀，置于4℃反应，1 000 r/min，离心1 min，记录结果。

1.7 交叉配血实验 与AB型献血者在室温(20℃)聚凝胺配血中，主侧出现凝集，次侧无凝集，配血不相和，放37℃ 10 min，取出试管轻轻混合观察结果，主侧凝集消失，配血相合。在微柱凝胶配血法中，主侧和此侧均相合。

2 结果

2.1 ABO血型鉴定结果 见表1。

表1 高效价冷凝集素患者血型鉴定

2.2 直接抗人球蛋白试验 抗-IgG，C3d:2+、抗-IgG:1+、抗C3d:1+。

2.3 不规则抗体筛选实验阴性。

2.4 用处理后的患者血清，红细胞做凝聚胺交叉配血试验，主次侧均无凝聚，无溶血。

3 讨论

高效价冷凝集素是患者体内产生了抗自身红细胞的嗜异性冷抗体。此抗体为IgM类，在体外4℃或室温条件下可与自身红细胞或ABO系统其它各个血型的红细胞发生非特异性凝集反应，不规则抗体可呈强阳性。一般健康人血清中含少量冷凝集素，效价很低，一般在1∶16以下。这种抗体在32℃以下(0～4℃)时活性最强，能与红细胞结合，当温度升高时凝集的红细胞呈可逆性散完全散开，可迅速从红细胞表面解离，因此不引起非特异性凝集，但在某些病理情况下，自身免疫性贫血，淋巴系统恶性肿瘤、支原体肺炎、EB病毒感染及某些肿瘤等会表达高效价［2］。本例患者直抗实验结果阳性，在室温自身对照阳性。37℃自身对照无凝聚，无溶血，提示患者血清中存在自身冷抗体。首先将患者的红细胞用37℃0.9%氯化钠溶液洗涤3遍，用洗涤后红细胞在4℃条件吸收患者血清中高效价冷凝集素至自身对照和直抗阴性时进行正反血型鉴定和交叉配血实验。本患者血型鉴定为AB型RhD(+)。给其AB型RhD(+)悬浮红细胞2 U，血浆400 ml，适当加温缓慢输注，无不良反应。

寒冷凝集素所致凝集现象应与ABO亚型引起弱凝集相区别，不规则抗体筛查与鉴定实验可排除血清中含有其他不规则抗体。高效价冷凝集素所致同型配血不合多为弱凝集，37℃水浴后凝集消失。亚型同型配血也为弱凝集，但37℃水浴后凝集不消失，交叉配血不合，需进行抗体鉴定实验，输血需选择抗原阴性，交叉配血相合的红细胞输注。本例患者无输血史，家族史，不规则抗体筛查阴性，正反定型不一致是由其自身冷抗体造成。

1 刘达庄主编.免疫血液学.第1版.上海:上海科学技术出版社，2002.214-218.

2 兰炯采.冷激素综合征三例报告.中国输血杂志，1993，6:99.