一株三糖铁反应似志贺菌属血清学交叉的产毒型大肠埃希菌
2012-09-21严卓琳
严卓琳
(浙江省桐乡市疾病预防控制中心,浙江 桐乡 314500)
临床标本中常见的低活性大肠埃希菌利用糖类的能力较不活泼[1]。在SS琼脂上的形态和在TSI上的生化特征与志贺菌属相似,且与志贺菌属有共同抗原[2],在血清学上常存在交叉凝集,易造成错误鉴定。现将一株与鲍氏志贺菌交叉凝集的大肠埃希菌的鉴定及体会报道如下。
1 材料与方法
1.1 菌株来源
桐乡市肠道门诊监测点上送的鲍氏志贺菌,从细菌性痢疾疑似病例大便中分离所得。
1.2 检测用仪器、培养基及试剂。
1.2.1 仪器
ATB生化鉴定仪。
1.2.2 SS、TSI、MIU培养基和微量生化反应管由北京陆桥生物技术有限公司生产;ATB生化鉴定试剂条ID32E肠杆菌和其他非苛氧性革兰阴性菌鉴定系统由法国梅里埃公司生产;志贺诊断血清(50种)由兰州生物制品研究所生产;致病性大肠埃希菌诊断血清、产毒性大肠埃希菌诊断血清、侵袭性大肠埃希菌诊断血清和O157:H7诊断血清由宁波天润生物药业有限公司生产。上述试剂均在有效期内使用。
1.3 方法
菌株经普通肉汤增菌后划SS琼脂,置37℃培养24h,挑取可疑菌落接种于TSI琼脂和MIU培养基,置37℃培养24h,用微量生化反应管和ATB生化仪ID32E生化鉴定条进一步生化鉴定,同时做血清凝集试验。
2 结 果
2.1 培 养特性和细菌形态
在SS琼脂为无色、圆形、直径约1.5mm、光滑、湿润、凸起的半透明菌落;在TSI琼脂表现为底层黄色,斜面红色,不产 H2S,不产气;MIU培养特性为动力阳性,吲哚试验阳性,脲酶阴性;染色镜检:革兰阴性无芽胞短杆菌。
2.2 生化特征
生化反应结果为氧化酶阴性,苯丙氨酸脱氨酶微量生化反应管阴性,葡萄糖胺微量生化反应管阳性。ID32E生化鉴定结果生化谱64471553500,结果为大肠埃希菌,%id=99.9,T=0.19,见表1。
2.3 血清学试验
生理盐水:-,鲍氏志贺1~6型血清:+++,鲍氏Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ各型血清均不凝集,肠产毒性大肠埃希菌OK多价1:+++;O6:K15:+++,其余肠致泻性大肠艾希菌诊断多价血清均不凝集,O157和H7血清均不凝集。
3 讨 论
表1 ATB细菌鉴定仪ID32E生化鉴定结果
临床上在检测志贺菌时,为节约时间和成本,存在部分检验人员接种SS、MAC平板后挑取不发酵或迟缓发酵乳糖的菌落到TSI上,则报告检出志贺菌。由于志贺菌属与大肠埃希菌之间的DNA相关性很高,尤其是与肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)在生化特征上较难鉴别,在血清学上有交叉反应[3],容易把此种大肠埃希菌误判志贺菌。
除EIEC外,产毒性大肠埃希菌与志贺菌生化相似血清交叉的也有文献报道[4]。本次分离到的ETEC也不分解乳糖,分解葡萄糖产酸不产气,且与鲍氏志贺菌属有交叉反应,易判断为志贺菌。但其动力、赖氨酸脱羧酶和葡萄糖胺均阳性,可基本排除志贺菌属[5],结合微量生化鉴定结果和ID32E生化鉴定结果及肠致泻性大肠埃希菌诊断血清的凝集结果,判断为肠产毒性大肠埃希菌O6:K15型。因此SS培养基和三糖铁反应类似志贺菌株,某些致泻性大肠埃希菌(DDEC)仍不能排除,即使是某些血清学反应符合的菌株,也应结合生化反应结果才能做出判断,否则会引起鉴定结果的错误。
[1] 高雯洁,张建平,沈志英,等.一株与福氏志贺菌1a交叉凝集的低活性大肠埃希菌[J].中国卫生检验杂志,2007,17(11):2115-2116.
[2] 齐小秋.痢疾防治手册[M].北京:人民卫生出版社,2006:47.
[3] 俞树荣.微生物学和微生物学检验[M].2版.北京:人民卫生出版社,1997:174.
[4] 高亚色.检出一株双糖铁反应似志贺氏菌属血清学交叉的产毒型大肠埃希菌[J].海峡预防医学杂志,2005,11(5):55-56.
[5] GB/T4789.5-2003.食品卫生微生物学检验志贺氏菌检测[S].2003.