Toll样受体2和4在老年慢性左心力衰竭中的表达

郭燕，李侠，杨海晨

(江苏淮安市第二人民医院老年科，223002)

·临床研究·

Toll样受体2和4在老年慢性左心力衰竭中的表达

郭燕，李侠，杨海晨

(江苏淮安市第二人民医院老年科，223002)

目的 探讨Toll样受体2(TLR2)和T0ll样受体4(TLR4)在老年慢性左心力衰竭患者外周血单核细胞表面的表达。方法 根据NYHA心功能分级和左室射血分数(LVEF)将健康对照者和慢性左心力衰竭患者分成对照组、心功能I级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级组。采用流式细胞仪检测外周血单核细胞表面TLR2和TLR4的表达。结果 左心力衰竭患者不同心功能组中TLR2和TLR4的表达均显著高于对照组(均P＜0.05)，且随着心功能分级的升高而明显上升。LVEF随着心功能分级的升高而逐渐下降，且与对照组比较，均P＜0.05。结论 TLR2和TLR4可能作为一种危险因素参与老年慢性左心力衰竭的发生发展。

心力衰竭，充血性;Toll样受体2;Toll样受体4;危险因素;老年人

临床上通常根据脑钠肽(BNP)水平判定心力衰竭严重程度。但在无心力衰竭的60岁以上人群中发现脑钠肽水平也升高［1-2］。因此在老年患者中仅根据脑钠肽水平来判断左心力衰竭严重程度有一定的局限性。为此我们通过临床研究，探讨Toll样受体在老年慢性左心力衰竭患者外周血中的表达，为老年慢性左心力衰竭提供可能新的诊断手段。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2008年1月至2009年1月在本院老年病科的慢性左心力衰竭患者共87例，年龄60～86岁，平均(69.6±7.6)岁，其中男46例，女4l例。所有患者均符合老年左心力衰竭的临床诊断标准［3］，入选患者经病史及临床实验室检查排除右心室功能受损、肿瘤、感染、血液系统疾病、免疫系统疾病、近期手术、外伤、肾功能不全、肝脏疾病和发热等，且均未服用非甾体抗炎药和类固醇激素。根据美国纽约心脏病学会(NYHA)的心功能分级方案和超声心动图测定左室射血分数(LVEF)，将所有入选病例按心功能分成4组:I级组［LVEF(42.9± 2.2)%］21例;Ⅱ级组［LVEF(34.2±3.2)%］27例;Ⅲ级组［LVEF(29.0±1.1)%］21例;IV级组［LVEF(25.1±2.1)%］18例。对照组［LVEF (63.8±5.1)%］30例，为同期健康体检者，其中男12例，女18例，年龄60～87岁，平均(67.1±5.7)岁。各组间年龄和性别差异无统计学意义(P＞0.05)。

1.2 方法 TLR2和TLR4检测:入选者均清晨空腹采集肘静脉血20 ml。应用流式细胞仪检测外周血单核细胞表面TLR2和TLR4的表达，以平均荧光强度(MFI)表示TLR2和TLR4的表达水平。流式细胞仪为美国贝克曼库尔特公司的EPICS8 ALTRA TM Flow Cytometer with Hypersort TM。主要试剂为FITC一标记的小鼠抗人CDl4抗体、PE-标记的小鼠抗人TLR一4抗体以及FITC-标记的小鼠抗人TLR-2抗体，并设置IgG2 a同型对照。研究所用抗体均购自AbD seroteeh公司。LVEF的检测:87例老年慢性左心力衰竭患者采用日本彩色多普勒超声诊断仪测定LVEF。

1.3 统计学处理 所有数据采用SPSS 13.0软件包进行分析，计量资料以±s表示，采用方差分析、q检验。采用直线相关和回归分析判断TLR2、ILR4与左心功能指标变量间相关性和依存性。

2 结果

2.1 TLR2和TLR4在心力衰竭组的表达 左心力衰竭患者不同心功能组中TLR2和TLR4的表达显著高于对照组，且随着左心力衰竭程度的加重，TLR2和TLR4表达水平明显上升。在各组的两两比较中发现，除了心功能I级组与Ⅱ级组之间差异无统计学意义，其他各组的均差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 不同左心功能组间TLR2和TLR4比较(±s)

表1 不同左心功能组间TLR2和TLR4比较(±s)

注:与对照组比较，aP＜0.05

组别 例数 TLR2 TLR4 LVEF(%) 30 2.75±0.82 1.45±0.36 60.8±2.9 I级组 21 4.24±2.39a2.58±1.84a40.7±3.7aII级组 27 4.16±0.93a2.61±0.53a30.8±2.6aIII级组 21 6.36±0.69a5.03±0.71a28.6±1.9aIV级组 18 7.99±1.10a6.34±1.40a26.6±2.2对照组a

2.2 TLR2和TLR4与左心力衰竭严重程度的相关性 TLR2与LVEF呈负相关(r=－0.67，P＜0.01)，TLR4与LVEF亦呈负相关(r=－7.14，P＜0.01)，且TLR2和TLR4随着LVEF的增加而下降(bTLR2，=－2.37，bTLR4=－3.52，P＜0.05)，即随着LVEF值下降，外周血单核细胞表面TLR2和TLR4表达增多。

3 讨论

Toll受体是免疫细胞表面识别病原相关分子模式的一个模式识别受体家族，最新研究显示其在动脉硬化免疫反应和慢性炎症的相互作用方面起着重要的桥梁作用［4-5］。目前研究已证实，TLR2和TLR4可导致心肌缺血和心肌细胞凋亡，在心功能失调中起关键作用。研究提示，TLR2和TLR4在体内高度表达可引起左室功能减退和心力衰竭［6］。

急性冠脉综合征(ACS)、稳定型心绞痛(SAP)和颈动脉硬化患者的循环单核细胞、内皮细胞和粥样硬化斑块中TLR2和TLR4的表达明显升高。因此TLR2和TLR4与内皮损伤、动脉粥样硬化的发生发展以及动脉粥样硬化斑块的不稳定性有关［7-8］。实验研究证实，TLR信号通路的激活可通过有害炎性反应促使白细胞聚集、细胞因子异常表达、心肌缺血、再灌注损伤、活化促凋亡信号反应通路、心肌梗死后心肌细胞再灌注损伤、活化促凋亡信号反应通路、心肌梗死后心肌细胞凋亡、心肌梗死面积扩大、心脏几何构型异常和心脏功能障碍［9］。

本研究结果表明，老年慢性左心力衰竭不同心功能组两两比较，除了心功能I级与Ⅱ级组外，其他各组间的差异都有统计学意义。老年慢性左心力衰竭患者TLR2和TLR4的表达水平随着左心力衰竭程度的加重而显著升高。本研究提示在老年慢性左心力衰竭中TLR2和TLR4之间可能存在着一致性关系，它们与LVEF呈负相关并和左心功能之间存在着依存性。由此推断，TLR2和TLR4可能作为一种危险因素参与老年慢性左心力衰竭的发生发展。TLR2和TLR4表达上调提示老年慢性左心力衰竭恶化、NYHA级别升高和LVEF下降，因此可能成为老年慢性左心力衰竭新的危险因素和评估老年慢性左心力衰竭危险分层的新指标。

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R541.61

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10.3969/J.issn.1672-6790.2012.04.031

2012-03-05)

郭燕，副主任医师，E-mail:guoyan2001344@163.com