高效液相色谱法测定头孢丙烯干混悬剂的溶出度

蔡旭萍，林 茜，朱惠卿，葛孝忠，吴彩萍

(1.浙江普洛康裕制药有限公司，浙江 金华 322118; 2.浙江北生药业汉生制药有限公司，浙江 金华 322100)

头孢丙烯(cefprozil)为第2代头孢菌素类药物，具有广谱抗菌作用，临床上主要用于敏感菌所致的感染。不同的制剂类型及生产工艺可影响头孢丙烯的溶出和体内吸收，现行的2010年版《中国药典(二部)》只对头孢丙烯片规定了溶出度检查，对头孢丙烯干混悬剂未规定溶出度检查。笔者通过对头孢丙烯干混悬剂溶出行为的考察，建立了溶出度测定方法，为制订其溶出度检查提供参考。

1 仪器与试药

Agilent 1200型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);D－800C型智能药物溶出仪(天津大学无线电厂)。头孢丙烯对照品(中国药品生物制品检定所，批号为130567－200902);头孢丙烯干混悬剂(浙江普洛康裕制药有限公司，批号分别为20110201，20110202，20110203);磷酸二氢铵为分析纯，乙腈为色谱级。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Symmetry C18柱(150 mm ×4.6 mm，5 μm);柱温:25 ℃;流动相:磷酸二氢铵溶液(取磷酸二氢铵20.7g，加水1800 mL使溶解，用磷酸调 pH 至 4.4)－乙腈(90∶10);流速:1.0 mL/min;检测波长:280 nm;进样量:10 μL;柱温:室温。头孢丙烯(Z)异构体峰与(E)异构体峰的分离度应大于2.5。

2.2 溶液制备

称取头孢丙烯对照品约30 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，加水适量，充分振摇使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取10 mL，置20 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性试验:按处方称取辅料，加溶出介质900 mL振摇溶解，用0.45 μm滤膜滤过，制成空白辅料溶液进样。结果表明，辅料对头孢丙烯测定无干扰。

精密度试验:取头孢丙烯对照品溶液，重复进样6次，记录色谱图。结果峰面积的 RSD为0.06%，表明方法精密度良好。

稳定性试验:取质量浓度为15 g/mL的对照品溶液，在室温下放置 0，2，6，10，16，24，36，48 h 后分别进样，记录色谱图，按峰面积质量计算质量浓度。结果头孢丙烯的 RSD为0.62%(n=8)，表明溶液在48 h内稳定。

线性关系考察:取头孢丙烯对照品适量，分别制成质量浓度为 70，140，280，350，420μg/mL 的溶液，以头孢丙烯峰面积(A)为纵坐标、质量浓度(C)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程 A=16.047 C+15.5，r=1.000(n=5)。结果表明，头孢丙烯质量浓度在70～420μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

回收率试验:精密称取处方量的辅料9份，分别加入头孢丙烯对照品适量，按处方比例制备相当于头孢丙烯标示量50%，80%，100%的3种浓度的样品，按上述条件测定。结果见表1。

表1 回收率试验结果(n=9)

2.4 溶出度测定

2.4.1 溶出条件选择[1]

溶出条件选择:由于本品为干混悬剂，每包含头孢丙烯0.125 g，采用2010年版《中国药典(二部)》附录ⅩG第二法桨法进行测定。参考头孢丙烯片选择水为溶剂，溶出介质为900 mL，测定方法采用高效液相色谱法，转速50 r/min，水浴温度(37±0.5)℃。

转速选择:取样品(批号为20110201)1包，转速分别为50，75 r/min，经 5，10，15，20，30，45 min 时各取溶液 10 mL，以 0.45 μm滤膜滤过，同时分别补充37℃溶出介质10 mL。溶出曲线见表2。可见，转速对头孢丙烯干混悬剂溶出行为影响不大，可选择50 r/min。

表2 头孢丙烯干混悬剂不同转速时的溶出度

溶出时间选择:取样品(批号为20110201)6袋，转速为50 r/min，经 5，10，15，20，30，45 min 时各取溶液 10 mL，以 0.45 μm 滤膜滤过，同时分别补充37℃溶出介质10 mL，取滤液测定。结果见表3，表明头孢丙烯干混悬剂在水中溶出性能良好，主要成分在15 min溶出达85%以上，且6袋样品具有良好的溶出均一性(RSD＜5.0%)。

表3 头孢丙烯干混悬剂不同时间的溶出度

2.4.2 溶出方法确定

经综合考察，选择桨法，转速50 r/min，以水为溶出介质，30 min取样测定。

2.4.3 样品溶出度测定

取3批样品，每批各6袋，照2010年版《中国药典(二部)》附录ⅩC溶出度测定法，以水900 mL为溶出介质，转速为50 r/min依法操作，于30 min时取溶出液适量，以0.45 μm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液;另称取头孢丙烯对照品约30 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，加水适量，充分振摇使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取10 mL，置20 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，在拟订的色谱条件下依法测定。结果见表4。

表4 样品溶出度检测结果

3 讨论

头孢丙烯微溶，在人体内都存在一个溶解、吸收、分布的过程，应控制溶出度。2010年版《中国药典 (二部)》已收载了一些品种的干混悬剂溶出度检查，但对头孢丙烯干混悬剂溶出度检查仍未进行规定。由于本品为干混悬剂，参考头孢丙烯片的溶出度测定法，故本试验采用桨法试验，以水为溶出介质;转速对本品的影响不大;头孢丙烯干混悬剂在15 min溶出即达85%以上，考虑到工艺不同可能造成的差异，建议溶出时间为30 min;采用高效液相色谱法测定含量，用对照品对照法计算溶出量。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:170－172，附录85－附录87.