高效液相色谱法测定抗骨增生丸中淫羊藿苷含量

2012-09-17姜一婧孙长仁

中国药业 2012年2期

常波，姜一婧，孙长仁

(吉林省白山市食品药品检验所，吉林白山 134300)

抗骨增生丸由熟地黄、肉苁蓉(蒸)、狗脊(盐制)、女贞子(盐制)、淫羊霍等9味药材组方，具有补腰肾、强筋骨、活血、利气、止痛等功效，用于增生性脊椎炎(肥大性胸椎炎、肥大性腰椎炎)、颈椎综合征、骨刺。部颁标准中没有含量测定方法[1]。为更有效控制该制剂的质量，笔者采用高效液相色谱(HPLC)法[2]测定抗骨增生丸中淫羊藿苷的含量，现报道如下。

1 仪器与试药

岛津LC－2010AHT型高效液相色谱仪。淫羊藿苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号为 110737－200312，供含量测定用);抗骨增生丸(白山市健宁药业有限公司);乙腈(色谱纯);水(纯化水)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:Diamansil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈－水(29∶71);流速:0.8 mL/min，柱温:35 ℃;检测波长:270 nm;进样量:对照品溶液5 μL，供试品溶液 10 μL。在此条件下，理论板数按淫羊藿苷峰计应不低于1 500，淫羊藿苷与杂质峰的分离度大于1.5，峰形良好，阴性对照品溶液无干扰(图1)。

图1 高效液相色谱图

2.2 溶液制备

精密称取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含30 μg的溶液，即得对照品溶液。取抗骨增生丸10丸，研细，取2 g，精密称定，精密加入甲醇50 mL，称定质量，超声处理30 min，冷却，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，滤过，滤液作为供试品溶液。按处方比例及工艺自制不含淫羊藿阴性样品，按供试品溶液制备方法制得阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察:精密吸取淫羊藿苷对照品溶液(30.90 μg/mL)2，4，6，8，10 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积，以进样量为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为 Y=－1 120.9+2 764 551.78 X，r=1.000 0(n=5)。结果表明，淫羊藿苷进样量在0.061 8 ～0.309 μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验:取同一对照品溶液，连续进样6次，依法测定。结果峰面积的 RSD为0.82%(n=6)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:取对照品溶液，放置 1，5，10，15，20 h 后测定峰面积。结果的 RSD为0.23%(n=5)，表明供试品溶液在20 h内稳定。

重复性试验:取同一批(批号为080101)样品，依法制备供试品溶液并测定。结果的 RSD为0.79%(n=5)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:精密称取已知含量的样品6份，分别精密加入对照品溶液适量，依法测定含量并计算回收率。结果见表1。