芪蛭肾安丸对小鼠耳廓微循环的影响

詹文彦 魏福玲 王鑫国

(河北省邯郸明仁医院肾内科，河北 邯郸 056006)

芪蛭肾安丸对小鼠耳廓微循环的影响

詹文彦 魏福玲 王鑫国1

(河北省邯郸明仁医院肾内科，河北 邯郸 056006)

目的 观察芪蛭肾安丸对小鼠耳廓微循环的影响，探讨其可能作用机制。方法 将50只昆明种雄性小鼠通过尾静脉注射肾上腺素制造微循环障碍模型，然后随机分为芪蛭肾安丸低、中、高剂量组及尿毒清颗粒组、空白对照组5组，每组各10只。芪蛭肾安丸低、中、高剂量组分别以1.4、2.8、5.6 g/kg芪蛭肾安丸灌胃给药，尿毒清颗粒组以6.0 g/kg尿毒清颗粒灌胃给药，空白对照组予等量的蒸馏水灌胃。给药20、40 min后采用冷光源分别观察记录各组小鼠右耳微动脉、微静脉管径及红细胞流速。结果 各组小鼠造模后耳廓微动脉、微静脉管径及微动脉内红细胞流速与本组造模前比较差异有统计学意义(P＜0.01);芪蛭肾安丸低、中、高剂量组及尿毒清颗粒组小鼠给药20、40 min后耳廓微动脉、微静脉管径及微动脉内红细胞流速与本组造模后比较差异均有统计学意义(P＜0.05)，空白对照组与本组造模后比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 芪蛭肾安丸可明显增加微循环障碍模型小鼠耳廓微动脉、微静脉管径，加快微血管内红细胞流速，改善小鼠耳廓微循环，其降低蛋白尿、改善肾功能可能是通过改善微循环、增加肾血流量而实现。

芪蛭肾安丸;微循环;动物，实验;小鼠

芪蛭肾安丸是河北省邯郸明仁医院院内复方中药制剂，是经过十几年的临床经验提炼而成的经验方，具有健脾补肾、活血通络、解毒泄浊等功效，对改善肾脏疾病患者的临床症状、降低蛋白尿、调节脂代谢及改善肾功能等方面有较好临床作用。本实验拟通过观察研究芪蛭肾安丸对小鼠耳廓微循环的影响，探讨芪蛭肾安丸作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 雄性昆明种小鼠50只，体质量18～20 g，由河北省实验动物中心提供，动物合格证号DK0409－0086，动物饲料亦由该中心提供。

1.1.2 药品 芪蛭肾安丸(河北省邯郸明仁医院制剂室提供，冀药制字Z20060026，主要药物组成:黄芪、水蛭、地龙、丹参、山楂、连翘、茯苓、白术、五味子等);尿毒清颗粒(广州康臣药业有限公司，国药准字Z20073256);盐酸肾上腺素注射液(天津金耀氨基酸有限公司，国药准字H12020526)。

1.1.3 仪器 XTB－A型连续变倍体视显微镜，桂林光学仪器厂。

1.2 方法

1.2.1 模型制备、分组及给药方法 全部小鼠以0.1 mL/10 g分别尾静脉注射1∶1 000盐酸肾上腺素注射液，造成小鼠微循环障碍模型。然后将小鼠随机分为芪蛭肾安丸低、中、高剂量组及尿毒清颗粒组、空白对照组5组，每组10 只。芪蛭肾安丸低、中、高剂量组以 1.4、2.8、5.6 g/kg芪蛭肾安丸灌胃给药，尿毒清颗粒组以6.0 g/kg尿毒清颗粒灌胃给药，空白对照组予等量的蒸馏水灌胃。

1.2.2 观察指标及方法 采用12%氨基甲酸乙酯(乌拉坦)1.2 g/kg腹腔注射麻醉各组小鼠，以医用橡皮膏轻贴轻拉去掉右耳廓软毛，将小鼠腹部向下固定在小鼠观察台上，调节耳托高度，使耳廓平展在耳托上，并在耳托及耳廓上涂以液体石蜡。将小鼠观察台置显微镜载物台上，调节冷光源适当亮度，调整视野选择微动脉与微静脉，放大72倍观察，用测微尺测量微动脉和微静脉管径，观察红细胞的流速，并按下述标准记分:快速(直线状):4分;中速(虚线状):3分;慢速(粒状)2分;停止(凝滞状):1分。各组分别于造模前、后及给药20、40 min后观察记录1次。

1.3 统计学方法 采用SPSS 10.0统计软件进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差(±s)表示，采用t检验。

2 结果

2.1 各组小鼠耳廓微动脉管径变化比较 见表1。

表1 各组小鼠耳廓微动脉管径变化比较μm，±s

表1 各组小鼠耳廓微动脉管径变化比较μm，±s

与本组造模前比较，*P＜0.01;与本组造模后比较，△ P＜0.05

组 别 n 造模前 造模后 给药20 min后 给药40 min后芪蛭肾安丸低剂量组 10 10.5±2.4 8.0±1.5* 10.2±1.5△ 12.3±1.6△芪蛭肾安丸中剂量组 10 10.3±1.5 8.1±1.4* 9.7±1.4△ 12.0±1.4△芪蛭肾安丸高剂量组 10 11.0±2.0 7.8±1.0* 10.1±0.9△ 12.1±1.0△尿毒清颗粒组 10 11.3±2.4 7.3±1.5* 10.5±1.6△ 11.4±1.2△空白对照组 10 10.7 ±1.6 7.8 ±1.0*7.8 ±1.1 8.1 ±1.7

由表1可见，各组小鼠造模后耳廓微动脉管径与本组造模前比较差异有统计学意义(P＜0.01);芪蛭肾安丸低、中、高剂量组及尿毒清颗粒组小鼠给药20、40 min后耳廓微动脉管径与本组造模后比较差异有统计学意义(P＜0.05)，空白对照组与本组造模后比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.2 各组小鼠耳廓微静脉管径变化比较 见表2。

表2 各组小鼠耳廓微静脉管径变化比较μm，±s

表2 各组小鼠耳廓微静脉管径变化比较μm，±s

与本组造模前比较，*P＜0.01;与本组造模后比较，△ P＜0.05

组 别 n 造模前 造模后 给药20 min后 给药40 min后芪蛭肾安丸低剂量组 10 16.4±2.1 10.7±2.0* 14.0±1.0△ 15.7±1.6△芪蛭肾安丸中剂量组 10 16.7±1.9 11.1±1.9* 14.3±1.8△ 16.1±1.5△芪蛭肾安丸高剂量组 10 17.4±1.9 12.3±1.8* 14.9±1.2△ 17.0±1.2△尿毒清颗粒组 10 16.5±1.6 11.8±1.3* 15.2±1.1△ 16.1±2.1△空白对照组 10 15.9 ±1.8 11.3 ±1.6*12.4 ±1.6 12.6 ±1.3

由表2可见，各组小鼠造模后耳廓微静脉管径与本组造模前比较差异有统计学意义(P＜0.01);芪蛭肾安丸低、中、高剂量组及尿毒清颗粒组小鼠给药20、40 min后耳廓微静脉管径与本组造模后比较差异有统计学意义(P＜0.05)，空白对照组与本组造模后比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.3 各组小鼠耳廓微动脉内红细胞流速评分变化比较见表3。

表3 各组小鼠耳廓微动脉内红细胞流速评分变化比较分，±s

表3 各组小鼠耳廓微动脉内红细胞流速评分变化比较分，±s

与本组造模前比较，*P＜0.01;与本组造模后比较，△ P＜0.05

组 别 n 造模前 造模后 给药20 min后 给药40 min后芪蛭肾安丸低剂量组 10 3.3±0.7 1.7±0.8* 2.2±0.6△ 2.3±0.7△芪蛭肾安丸中剂量组 10 3.1±0.7 1.6±0.7* 2.1±0.7△ 2.2±0.6△芪蛭肾安丸高剂量组 10 3.2±0.6 1.7±0.7* 2.3±0.7△ 2.1±0.9△尿毒清颗粒组 10 3.0±0.8 1.9±0.6* 2.4±0.7△ 2.4±0.5△空白对照组 10 3.5 ±0.5 1.6 ±0.7*1.6 ±0.5 1.5 ±0.5

由表3可见，各组小鼠造模后耳廓微动脉内红细胞流 速评分与本组造模前比较差异有统计学意义(P＜0.01);芪蛭肾安丸低、中、高剂量组及尿毒清颗粒组小鼠给药20、40 min后耳廓微动脉内红细胞流速评分与本组造模后比较差异有统计学意义(P＜0.05)，空白对照组与本组造模后比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

3 讨论

慢性肾脏疾病患者通常存在不同程度凝血活性亢进、纤溶活化相对不足的高凝状态，极易合并血栓，导致肾纤维化，从而加重肾功能的恶化。因此，针对高凝状态而设计的治疗方案是解决慢性肾脏疾病的有效方法之一。慢性肾脏疾病形成的肾间质纤维化、肾小球硬化、肾小球内血栓、毛细血管管腔塌陷或狭窄、小动脉硬化、肾小管的变性萎缩及肾间质的急慢性炎性改变等，都是肾络闭阻发生在不同病程和病理的征象［1－2］，是发生在肾脏中的微型淤积［3］，血液流变学的改变对肾脏疾病的发生、发展及预后有重要影响［4］。因此，活血通络祛瘀，改善微循环是治疗慢性肾脏疾病的重要环节。

中医学认为，慢性肾脏疾病的基础病机是本虚标实，即脾肾亏虚为本，痰湿瘀阻为标，其中瘀血阻络是主要的病理基础之一，多主张活血通络祛瘀法贯穿于治疗慢性肾脏疾病的全过程。血液运行要靠气来维持，气为血之帅，血为气之母，气能行血、统血，血则可以载气，肾络气血运行通畅，肾的生理功能才能正常运行。若脾肾亏虚，则气血生化乏源，肾脏血运不足，久病入络，血瘀日久又阻碍气血运行，形成恶性循环。花蛭肾安丸方中黄芪、茯苓、白术、五味子健脾补气，调肾利水;水蛭、地龙、丹参、山楂活血通络，祛瘀消癥;连翘清热解毒，消肿散结。诸药合用，共奏健脾补肾、活血通络、解毒泄浊之功。现代药理研究表明，黄芪可改善蛋白质代谢，改善肾血流动力学，即具有扩张血管、降低血压、抗血小板凝集、改善肾脏微循环的功能，从而改善高凝状态［5］;水蛭能改善肾脏微循环、血流变和高凝状态，防止肾髓质和皮质凝血［6］;地龙具有多种活性蛋白，拥有纤溶活性的蛋白水解酶，可直接参与纤溶系统的调节［7］;丹参有改善肾小管上皮细胞变性，增加肾血流量，改善肌酐清除率，降低尿素氮作用［8］。

本实验研究结果显示，芪蛭肾安丸可明显增加肾上腺素致微循环障碍模型小鼠耳廓微动脉及微静脉管径，加快微血管内红细胞流速，改善小鼠耳廓微循环。芪蛭肾安丸的降低蛋白尿、改善肾功能的作用机制之一可能是通过改善微循环，增加肾血流量而实现。

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Study of effect of Qizhi Shenan pill on auricle microcirculation of mouse

ZHAN Wenyan*，WEI Fuling，WANG Xinguo.*Department of Nephrology，Handan Mingren Hospital in Hebei Province，Hebei，Handan 056006

ObjectiveTo study the effect of Qizhi Shenan pill on auricle microcirculation of mouse.Methods50 Kunming male mice with microcirculatory disorders were manufactured by tail vein injection of epinephrine.Then 50 mice with microcirculatory disorders model were randomly divided into five groups，high－，middle－，low－ dose Qizhi Shenan pill(

5.6，2.8，1.4 g/kg Qizhi Shenan pill)group，Niuduqing granule group(received 6.0 g/kg Niuduqing granule)and control group(received distilled water).Microarteries，venule diameter，microvascular erythrocyte flow rate of mouse right ear were observed with cold light source after 20 and 40 min of administration.ResultsThere was significant difference between before and after modeling on the pinna microarteries，venule diameter，microvascular erythrocyte flow rate in each group(P ＜ 0.01).There was significant difference between high－，middle－，low－dose Qizhi Shenan pill group and control group on the pinna microarteries，venule diameter，microvascular erythrocyte flow rate in each group(P ＜0.05).ConclusionQizhi Shenan pill can obviously increase the pinna microarteries，venule diameter，microvascular erythrocyte flow rate of mouse with auricle microcirculation disorders model，improve auricle microcirculation of mouse，reduce proteinuria and improve renal function by improving microcirculation and increasing renal blood flow.

Qizhi Shenan pill;Microcirculation;Animal;Experiment;Mouse

R－332;R289.61

A

1002－2619(2012)12－1869－03

1 河北医科大学中医学院中药药理教研室，河北 石家庄050091

詹文彦(1961—)，男，主任中医师，硕士。从事肾内科临床工作。

2012－04－16)