我校老师办公室电脑键盘所携细菌的药物敏感性分析①

何静妹 朱占兰 马善源 殷海波 陈玉萍 沈兰凤 王 斌

1.徐州医学院基础学院（指导老师），江苏徐州 221004；2.徐州医学院医学技术学院医学检验专业08级检验班，江苏徐州 221004

随着科技的发展，电脑走入了人们的生活和工作，丰富了生活，方便了学习，提高了工作效率，人们通过人机对话，消除了时空界限。在生活和工作中，越来越多的人自觉离不开电脑。而人们使用电脑主要是通过双手手指敲击键盘来获得信息或工作，因此，一旦键盘携带细菌，尤其是致病菌或危险菌（耐药菌或多重耐药菌），可以通过手-键盘-手的方式，造成交叉感染或环境污染。作为大学的专职教师自然办公离不开电脑，离不开敲击键盘，本次研究选取本校专职教师办公用电脑键盘，原因在于医学院校老师卫生意识强，而且办公室电脑作为学校公共资产，可以在小范围内互相使用，这就存在交叉感染或污染的潜在可能，那么，键盘上所携细菌对抗生素的敏感性如何？是否存在危险菌即致病菌或耐药菌甚至多重耐菌？以提醒人们要卫生用电脑和健康用电脑。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2010年7 月19 ～23 日，随机抽样分析我校专职教师办公室电脑键盘50个，无菌采集每个键盘的空格键、大键盘的回车键（Enter）、删除键（Delete）、鼠标左键、Esc 键、小键盘的小数点键和F7键上的标本。

1.2 方法

无菌采样的标本，进行人工分离培养与鉴定。首先，在实验室超净工作台中，将标本接种于普通琼脂培养，37℃孵育18～24h，观察细菌生长情况，进行菌落计数，革兰染色，并进行增菌培养，以期进一步做生化鉴定。采用的细菌微量生化试管及氧化酶试纸/试剂等均购置于杭州微生物试剂有限公司。查阅《医学细菌生化试验鉴定手册》相关内容[1]鉴定出菌种。对分离的398株细菌进行抗菌药物敏感性分析，选用标准质控菌株金黄色葡萄球菌ATC25923和大肠埃希菌ATC25922。采用纸片琼脂扩散法即 Kirby-Bauer（K-B）K-B 法，37℃孵育 18～24h，准确读取抑菌圈直径，依据美国临床实验室标准委员会（NCCLS）标准和解释，作出“敏感”（susceptible，S）、“耐药”（resistant，R）、“中介”（intermediate，I）的判断。选择实验室常用抗生素药敏纸片，有丁胺卡那霉素(AN)30ug/mL，庆大霉素(GM)10ug/mL，氨苄青霉素(AM)10ug/mL，链霉素(S)10ug/mL。药敏纸片购置于温州市康泰生物有限公司。均在有效期内。

2 结果

2.1 分离的细菌情况

采集50个键盘共400个键，其中，常用键：空格键、退格键（Backspace）大键盘的回车键（Enter）、删除键（Delete）、鼠标左键，菌落计数共计约1.2×106 cfu/mL；不常用键：Esc键、小键盘的小数点键和F7键，合计菌落计数约6.9×105 cfu/mL；每个键盘上平均检出约3～7种不同的细菌。表1为50个键盘采样所分离的细菌情况。

表1 50个键盘采样所分离的细菌情况

2.2 分离细菌的药物敏感结果

400 个键盘分离菌量排前5位的细菌的对AN、GM、AM和S的药敏结果，见表2。本次实验共对分离的398株细菌进行抗菌药物敏感性分析，结果：398株细菌对丁胺卡那霉素（AN）有387株敏感，5株中介，6株耐药；对庆大霉素（GM）398株均敏感，不存在耐药株或中介株；对氨苄青霉素（AM）有317株敏感，22株中介，59株耐药；对链霉素（S）有 349株敏感，13株中介，36株耐药。 平均耐药率约为 6.34%(（6+0+59+36）/4/398)，平均中介率为2.51%(（5+0+22+13）/4/398)，平均敏感率为 91.14%(（387+398+317+349）/4/398)。多重药物敏感试验结果：有20株细菌同时对两种或三种抗生素表现耐药或中介。其中，同时耐AM和S的细菌为：球形芽胞杆菌、粘质沙雷菌、嗜热脂肪芽胞杆菌、假白喉棒状杆菌、侧孢芽胞杆菌和尘埃芽胞杆菌共分离10株；同时耐AN和AM的细菌有短形芽胞杆菌1株；检查出一株表皮葡萄球菌同时耐AM、AN和S；一株球形芽胞杆菌同时耐AN、S和对AM中介。

表2 分离菌量排前5位细菌的药敏结果

3 讨论

本次研究随机抽样我校专职教师办公室电脑键盘50个，无菌采样400个键，分离培养出的细菌主要为球形芽胞杆菌、表皮葡萄球菌、尘埃芽胞杆菌、藤黄微球菌、枯草杆菌、假白候棒状杆菌、干燥棒状杆菌、嗜热脂肪杆菌、蜡样芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、干燥棒状杆菌等，分离到霉菌共111株，占分离率的28%，分离出一株金黄色葡萄球菌。在分离的细菌中以革兰阳性菌为主，尤其是芽胞杆菌，如球形芽胞杆菌、尘埃芽胞杆菌、枯草杆菌、嗜热脂肪杆菌、蜡样芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌等。芽胞对外界的理化因素有强大的抵抗力，再加上电脑键盘上相对干燥，对营养要求较高的细菌如乙型溶血链球菌、肺炎链球菌等往往不利于长期存活，而对营养要求不高的肠道杆菌，如大肠埃希菌、志贺菌或沙门菌等因抵抗力弱，也不利于在键盘上长期存活。除非像一些公共网吧，个别人边操作电脑边进食，键盘上会留有食物残渣、水分，利于细菌生长繁殖，发现存在革兰阴性杆菌如大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等[2-3]。我们在对教师电脑键盘采样时，发现我校专职教师办公室用的电脑键盘普遍都比较干净，不潮湿，没有食物残渣，有些键因长期不注意有些浮尘，总之，给我们留下较好的印象，不愧为是医学院的专职教师，有较强的卫生意识。但即使是这样一群人使用的电脑键盘，我们也从分离出了一些致病菌，如金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌等，其他大多为条件致病菌。值得重视的是键盘上所携带的细菌中存在耐药菌，尽管比例不高，但绝不能视而不见，尤其是还存在多重耐药菌的问题，一旦造成感染，给临床治疗往带来极大困难[4]。如果人们不加重视，不注意卫生用电脑和健康用电脑，往往会因多人使用同一台电脑，通过手-键盘-手的方式感染键盘上的细菌，并可以通过其他方式在人群中互相传播，一旦机体抵抗力下降所致的感染，往往用药是个麻烦，难于控制感染，甚至会夺取生命。

本次研究药敏试验所选用的抗生素，氨苄青霉素为广谱青霉素类，抗菌作用于干扰细菌细胞壁的肽聚糖合成，细菌主要依靠细胞壁维持菌体固有形态，并保护细菌抵抗低渗环境。所以，氨苄青霉素对革兰阳性菌和革兰阴性菌均有杀菌作用，为繁殖期杀菌剂；而庆大霉素、链霉素和丁胺卡那霉素都属于氨基糖苷类抗生素，作用于细菌唯一的细胞器——核糖体，通过干扰细菌蛋白质的合成起杀菌作用，为静止期杀菌剂。这些抗生素也是人们感染最常常使用的抗生素。本次研究我们在医学院校老师办公室电脑键盘上发现存在致病菌、耐药菌及多重耐药菌，尽管量不惊人，但提醒人们在电脑给我们带来丰富多彩的生活和工作的同时，不要忽视其中存在的潜在危险，要做到卫生用电脑，健康用电脑，定期清洁和消毒电脑键盘；厂家可以考虑生产出带消毒功能的键盘来，通过多方努力营造安全使用电脑的氛围。

[1]J.F.麦克法丁[英].医学细菌生化试验鉴定手册[M].北京：人民卫生出版社，1985.

[2]张莉霞，王大靖，瞿秀玲.医院使用中电脑键盘微生物污染情况调查[J].医药产业资讯，2005，7：52.

[3]孙同瑞.网吧电脑微生物生物污染与消毒方法研究现状[J].安徽预防医学杂志，2005，11（1）：47.

[4]胡必杰，陈雪华，倪才妹，等.医院感染菌对12种抗菌药物药敏结果与评价[J].中华医院感染学杂志，1999，9（2）：118-120.