大鲵人工催产与孵化技术研究

张红星 沈建忠 赵虎 等

摘要：对大鲵（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）的人工催产和孵化技术进行了研究。结果表明，ＬＲＨ－Ａ２和ＨＣＧ催产效果较好，经人为调控可使大鲵性腺成熟度状态良好；人工孵化时通过严格控制水温１８～２１ ℃、溶氧保持在５ ｍｇ／Ｌ以上、光照度３００ ｌｘ以下，给予适当的流水刺激，孵化率可达７６．４％。

关键词：大鲵（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）；催产；受精；孵化

中图分类号：Ｓ９６１．２；Ｓ９６６．６文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０12）15－3282-02

Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｓｐａｗｎｉｎｇ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｉａｎｔ Ｓａｌａｍａｎｄｅｒ（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）

ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｘｉｎｇ１，ＳＨＥＮ Ｊｉａｎ－ｚｈｏｎｇ２，ＺＨＡＯ Ｈｕ１，ＷＡＮＧ Ｑｉ－ｊｕｎ１，ＷＡＮＧ Ｚｈｏｎｇ－ｑｉａｎ３

（１． Ｓｈａａｎｘｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｚｏｏｌｏｇｙ， Ｘｉａｎ ７１００３２， Ｃｈｉｎａ； ２． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＦｉｓｈｅｒｉｅｓ， Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｗｕｈａｎ ４３００７０，Ｃｈｉｎａ；

３． Ｓｈａａｎｘｉ Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ， Ｘｉａｎ ７１００８６，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈe ｓｐａｗｎｉｎｇ ａｎｄ ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｇｉａｎｔ ｓａｌａｍａｎｄｅｒｓ（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ） was studied． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗed ｔｈａｔ ＬＲＨ－Ａ２ ａｎｄ ＨＣＧ ｏｘｙｔｏｃｉｎ ｗｅｒｅ ｂｅｔｔｅｒ spawning agents. Bｙ ｈｕｍａｎ ｃｏｎｔｒｏｌ， ｇｏｎａｄ ｍａｔｕｒｉｔｉｅｓ ｏｆ ｇｉａｎｔ ｓａｌａｍａｎｄｅｒｓ would be at ｉｄｅａｌ ｓｔａｔｅ． Ｂｙ ｃｏｎｔｒｏｌｉｎｇ ｗａｔｅｒ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ at １８～２１ ℃， ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｏｘｙｇｅｎ higher than ５ ｍｇ／Ｌ， ｌｉｇｈｔ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ at ３００ ｌｘ ａｎｄ ｗａｔｅｒ ｆｌｏｗ， ｔｈｅ ｈａｔｃｈｉｎｇ ｒａｔｅ could be ｕｐ ｔｏ ７６．４％ by ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： gｉａｎｔ ｓａｌａｍａｎｄｅｒ（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）； ｓｐａｗｎｉｎｇ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ； ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ； ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ

大鲵（Ａｎｄｒｉａｓ ｄａｖｉｄｉａｎｕｓ）的产卵季节为７～９月，属一年一次产卵类型［１，２］。在亲鲵培育池中培育出雌、雄性腺同步发育成熟的群体，通过人工催产和孵化，可以有效提高大鲵的催产率、受精率和孵化率，从而促进大鲵规模化养殖的健康发展［３-6］。本试验在人工养殖条件下进行了大鲵的人工催产和孵化技术研究，现将结果报告如下。

１材料与方法

１．１亲鲵来源

试验用亲鲵由陕西省宁陕县龙泉大鲵驯养繁育场提供，选择性腺成熟度较好的雌鲵１７尾、雄鲵１５尾。

１．２试验条件

试验于2008年8月在陕西省宁陕县龙泉大鲵驯养繁育场进行。繁育场海拔８５６ ｍ，泉水流量０．３５ ｍ３／ｓ，水质清新无污染，溶氧８ ｍｇ／Ｌ，ｐＨ ７．３２，试验期间水温１９．５～２１．６ ℃。大鲵亲本培育池规格１．２ ｍ×１．５ ｍ×１．０ ｍ，进排水方便。繁育场具备孵化室，进排水能控制，水、电条件能满足孵化要求。选择活爽、洁净的水源，孵化用水经沙棒滤水器过滤、紫外线 杀菌水处理器杀菌（或用臭氧机制臭氧杀菌）后注入孵化槽。配备空压泵、增氧气泡石和电控调温器、孵化槽、孵化筛、拣卵器、弱光源灯等。

１．３雌雄鉴别与性腺成熟度判断

亲鲵的性别在非繁殖期从外形上较难区别，但是在繁殖期可通过观察泄殖孔和腹褶形态特征进行区分。雄性亲鲵泄殖孔椭圆形，边缘有一排外突的小白点，外围有一椭圆形的隆起；雌性亲鲵泄殖孔近圆形，略向内凹，边缘平滑，无小白点和椭圆形隆起，腹部膨大而松软，腹褶短小［7］。

大鲵亲体性腺成熟度直接影响着催产率的高低与出苗的成败。采用经验鉴别与形态检查相结合的方法，依据亲鲵腹褶的形态、泄殖孔内凹程度、腹部松软程度以及活动姿态而定。在繁殖季节，雌鲵泄殖孔充血，腹部膨大而柔软、富有弹性；雄鲵泄殖孔边缘有一排外突的小白点，外围有一椭圆形隆起。

１．４精液常规检测

用量筒测量精液量，用精密ｐＨ试纸（测量范围６．４～８．０）测定精液ｐＨ值。将精液用３％氯化钠溶液稀释５倍，在显微镜下用血细胞计数板计数，测定精液的密度。

精子的运动有３种类型，即直线前进运动、旋转运动和振摆运动，在显微镜视野中观察精子的运动，估测直线前进运动精子数占精子总数的百分比，根据直线前进运动的精子比例评价精子活力。采用十级制评定精子的活力等级，直线前进运动的精子比例为１００％者评定为１．０级，９０％者评定为０．９级，以此类推［８］。

１．５人工催产与授精

催产药物选用ＬＲＨ－Ａ２和ＨＣＧ，采用一次性腹腔注射，从亲鲵背部（靠后）肋间进针０．５～０．８ cm，注射剂量为ＬＲＨ－Ａ２ ２～４ μｇ／ｋｇ，ＨＣＧ ２００～１ ０００ ＩＵ／ｋｇ，雌雄注射相同剂量。

人工授精采用干湿法。在室内操作控制光照，当发现雌鲵产出卵带后，一人立即用手托住卵带放入盆中，另一人用手轻挤雄鲵腹部，用小烧杯在泄殖孔处接收精液，将采集的精液加入到卵带盆中，加入精子营养液，轻轻摇晃卵带盆，使卵受精均匀。１５ ｍｉｎ后，将卵带盆里的水更换２次，然后将卵带放入孵化筛内进行孵化。

１．６人工孵化

受精卵的孵化采用流水孵化法，采用槽式孵化筛，水体经紫外线杀菌水处理器消毒、多级净水增氧，溶氧保持在5 mg/L以上；通过电动调温器严格控制水温１８～２１ ℃，水流量０．０３ ｍ３／ｍｉｎ，光照度３００ ｌｘ以下，适时翻卵和拣卵，以满足卵子发育的生理条件。每天定时用温度计测量水温，检查受精卵，及时剔除死卵并做好记录。

２结果与分析

２．１催产效应

亲体一次性腹腔注射ＬＲＨ－Ａ２和ＨＣＧ后，产卵效应时间为４～１２ ｄ，其中最佳时间为４～６ ｄ。催产后亲鲵表现明显的性活动行为，产卵和受精及时，从而提高了繁育率。

２．２大鲵精液常规检测

对该场６尾性成熟并参与繁殖的雄性亲鲵进行精液常规检测，结果见表１。由表１可知，亲鲵体重均达到参繁要求，排精量在１２．８～６４．１ ｍＬ，相对排精量为２．１～１２．１ ｍＬ／ｋｇ，精液呈中性偏酸，密度（２．１５～１０．７５）×１０６个／ｍＬ，精子活力在０．７级以上，达到受精要求。

２．３参繁情况

１７尾雌鲵有１４尾产卵，雌性亲鲵的参繁率为８２．４％；１５尾雄鲵性腺全部发育成熟，其中有２尾未经催情就能多次挤出乳白色优质精液，经镜检精子活力良好。

２．４产卵量与受精率

２００８年８月，产卵９ ３３５粒；人工授精采用干湿法，获受精卵８ ４９５粒，卵的受精率达９１．０％。在孵化室内精心孵化，孵化出苗６ ４９１尾，出苗率达 ７６．４％。

３小结与讨论

３．１影响催产的因素

催产是辅助生殖途径中的重要环节，催产效果的好坏直接影响到子代的成活率和发育状况。影响催产的因素包括外在因素和内在因素，其中外在因素有水质、水温、水流量、催产剂的种类和剂量、注射次数等，内在因素有亲鲵的年龄和成熟度等。内在因素是主因，外在因素是辅因，外在因素要配合内在因素方能到达良好的催产效果。水质好（溶氧量高、浊度低）、水温适宜（１８～２１ ℃）、有流水刺激时效应时间会明显缩短。亲鲵一般达到５～６龄即可开始参繁，成熟度好的亲鲵催产后效应时间短。根据亲鲵发育状况，选择适合的催产剂、注射剂量和注射次数均可缩短效应时间。经过长期试验总结，ＬＲＨ－Ａ２和ＨＣＧ对大鲵催产效果较好，经济实用。

３．２精液指标方面

大鲵精液常规指标测定表明，相对排精量最多可达１２．１ ｍＬ／ｋｇ。原因可以归结为人工饲养环境良好、营养丰富，高质量的精液对人工授精的成功具有重要意义。精液密度最高可达１．０７５×１０７个／ｍＬ，精液活力最高可达０．9级，该数据与刘鉴毅等［9］和李骏珉等［１０］的报道有一定差异，产生该差异的原因可能与亲鲵的营养水平和养殖环境状况不同有关。

３．３人工孵化方面

在人工孵化过程中水温对孵化影响极大。水温１８～２１ ℃，孵化期为２８～３５ ｄ；水温１６～１８ ℃，孵化期为３５～４０ ｄ。日温差变幅不宜超过１．５ ℃。孵化水温超过２３ ℃，则易造成胚体死亡或产出畸形苗。因此，适宜的孵化水温为１８～２１ ℃。水中溶氧保持在５ ｍｇ／Ｌ以上，严格控制光照在３００ ｌｘ以下，水流量在0.03 m3/min，保持卵的静态翻（滚）动。严防卵体感染水霉及发生胚胎“贴壳”死亡，若发现卵或胚胎停止发育而死亡应立即剔除。

本试验是在规模化养殖情况下对大鲵人工催产与孵化技术的一次验证，但关于亲鲵的选配、受精及胚胎发育等方面还有待进一步的探讨和研究。

参考文献：

［１］ 阳爱生，刘国均．大鲵人工繁殖的初步研究［Ｊ］． 淡水渔业，１９７９（２）：１－５．

［2］ 葛荫榕，郑合勋．大鲵的自然繁殖周期［Ｊ］． 河南师范大学学报（自然科学版），１９９４，２２（２）：６７－７０．

［3］ 王文林，杜秀琦，张丽琴，等．大鲵繁殖生物学初探［Ｊ］． 河南教育学院学报（自然科学版），２００２，１１（１）：２１－２２．

［4］ 李培青，相学军，朱必才．中国大鲵生殖激素的初步研究［Ｊ］．生物学杂志，２００８，２５（３）：３０－３２．

［5］ 王海文，卓君华，欧东升．促使雌雄大鲵性同步发育技术［Ｊ］．水产养殖，２００９（１）：８－１０．

［6］ 施学文．大鲵人工繁殖技术初步研究［Ｊ］． 福建水产，２０１１，３３（５）：４８－５１．

［7］ 陈云祥，阳爱生，江辉，等． 大鲵性腺成熟度的外部感官鉴别［Ｊ］．水利渔业，２００６，２６（６）：５２．

［８］ 桑润滋．动物繁殖生物技术［Ｍ］． 第二版． 北京：中国农业出版社，２００２．

［９］ 刘鉴毅，肖汉兵，杨焱清，等．大鲵成熟精、卵的形态学观察及受精卵孵化中的形态变化［Ｊ］． 淡水渔业，１９９９，２９（３）：６－９．

［１０］ 李骏珉，方树淼，范维端，等．大鲵的自然受精试验［Ｊ］． 四川动物，２００４，２３（３）：２９６－２９７．