高效液相色谱法测定香砂养胃丸中α-香附酮的含量

屠 莹

（天津市胸科医院药剂科，天津 300051）

高效液相色谱法测定香砂养胃丸中α-香附酮的含量

屠 莹

（天津市胸科医院药剂科，天津 300051）

[目的]建立香砂养胃丸中香附的α-香附酮含量测定方法。[方法]采用Agilent ZORBAX TC-C18
（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以甲醇-水（75∶25）为流动相；流速为 1.0 mL/min；检测波长为 250 nm。[结果]α-香附酮在0.005 5～0.55 μg/mL范围内呈良好线性关系（r=0.999 9），平均回收率为102.36%，RSD为1.75%（n＝6）。[结论]该法简便、结果准确、重复性好，可用于香砂养胃丸的质量控制。

香砂养胃丸；α-香附酮；含量测定；高效液相色谱法

香砂养胃丸由木香、厚朴(姜制)、白术、香附、陈皮、甘草等14味药组成，具有温中和胃的功能[1]。主要用于不思饮食，呕吐酸水，胃脘满闷，四肢倦怠等治疗。其质量标准收载于《中国药典》[2]，原标准中仅有对厚朴酚的含量测定，目前文献中也仅有少量有关香砂养胃丸中橙皮苷含量测定的报道[3]，为了更有效地控制药品质量，现以α-香附酮为定量指标，建立高效液相色谱法（HPLC）测定样品中香附的含量测定方法。

1 仪器与试药

Agilent-1200高效液相色谱仪（自动进样器、紫外－可见检测器）。α-香附酮对照品（中国药品生物制品检定所购置，批号：110748－200110），为供含量测定用。香砂养胃丸（河南宛西制药股份有限公司，批号：080601，080602，080603）甲醇（色谱纯，天津市康科德科技有限公司），磷酸（分析纯），水为去离子水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent ZORBAX TC-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水（75∶25）；流速：1.0mL/min；检测波长：250nm；进样量为 10μL。理论板数按α-香附酮峰计算应不低于5 000。

2.2 溶液配制

2.2.1 对照品溶液的制备 取α-香附酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含α-香附酮30μg的溶液，即得。结果见图1。

2.2.2 供试品溶液的制备 取同一批号（080603）

样品适量，研细，取0.5 g，精密称定，精密加入80%甲醇25 mL，称定质量，超声提取60 min，放冷，再称定质量，用80%甲醇补足减失的质量，摇匀，即得。结果见图2。

2.2.3 阴性样品溶液的制备 按处方配比，制备不含香附的阴性对照，按“2.2.2”项下方法制得阴性样品溶液。结果见图3。

2.3 标准曲线的绘制 取α-香附酮对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成浓度为每1mL中含α-香附酮 0.55、2.75、13.75、27.5、55 μg的对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，以进样浓度（μg/mL）为横坐标，峰面积A为纵坐标绘制标准曲线。α-香附酮的回归方程为：Y=7.395＋127.25X（r=0.999 9）。结果表明α-香附酮在0.005 5～0.55 μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系。

2.4 精密度实验 取同一批号（080603）样品0.50g，精密称定，按照“2.2.2”项下方法制备供试品，重复进样6次，按“2.1”项下色谱条件测定峰面积，测得样品中α-香附酮峰面积平均值为350，RSD为0.86%。表明仪器精密度良好。

2.5 重现性实验 取同一批号（080603）样品6份，精密称定，按照“2.2.2”项下方法制备，按“2.1”项下色谱条件测定，样品中α-香附酮含量平均值为0.32 mg/g，RSD为1.59%。结果表明该测定方法重现性良好。

2.6 稳定性实验 取同一批号（080603）样品0.50g，精密称定，按照“2.2.2”项下方法制备供试品，分别在 0、2、4、8、12、24 h 进样，按“2.1”项下色谱条件测定，测得样品中α-香附酮峰面积平均值为363，RSD为1.45%。表明样品溶液24 h内稳定性良好。

2.7 回收率实验 取同一批号（080603）样品0.25g，共6份，精密称定，分别精密加入每1 mL中含α-香附酮3.2 μg的对照品溶液25 mL，按照“2.2.2”项下方法制备，制得供回收率用供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，计算回收率。结果α-香附酮平均回收率为102.36%，RSD为1.75%。

2.8 样品测定 取3个不同批号的样品，按照“2.2.2”项下方法制备，按“2.1”项下色谱条件测定，计算样品中α-香附酮的总量。结果见表1。

表1 3批样品含量测定结果Tab.1 The contents of α-Cyperone in the 3 of samples mg/g

3 讨论

α-香附酮为方中香附的主要成分，由于其为较强的前列腺素生物合成抑制剂，故也是镇痛作用的主要成分之一[2]。因此选择对α-香附酮进行含量测定，可以有效控制香附的质量，进而控制香砂养胃丸的质量。

吸收波长的选择：按“2.2.2”项下供试品溶液制备方法制得溶液，在紫外分光光度计200～400 nm范围内扫描。结果α-香附酮在250 nm处有最大吸收，且香砂养胃丸中其他成分在此处无干扰，故选择250 nm为检测波长。

流动相的选择：根据文献色谱条件[5]，本实验对流动相选择进行了筛选，分别采用甲醇－水（68∶32）及甲醇－水（75∶25）为流动相进行实验，结果采用甲醇－水（75∶25）分析时间适宜，分离效果较好。

[1]肖文平，高 雄.高效液相色谱法测定香砂养胃丸中厚朴酚的含量[J].湖北中医杂志，2011，33（3）：70-71.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：化学工业出版社，2010：779.

[3] 黄险峰，彭国平.香附的化学成分及药理研究进展[J］.中药材，2003，26（1）：65－68.

[4] 梁从庆，罗源生.高效液相色谱法测定香附油中α-香附酮的含量[J].中药材，2004，27（8）：578－579.

[5] 梁从庆，罗源生.高效液相色谱法测定香附油α-香附酮的含量[J].中药材，2004，27（18）：578-579.

Determination of α-Cyperone in Xiangsha Yangwei pills by HPLC

TU Ying
（Department of Pharmacy，Tianjin Chest Hospital,Tianjin 300051,China）

[Objective]To develop an HPLC method for the determination of α-Cyperone in Xiangsha Yangwei pills.[Methods]Analyses were carried out on Agilent ZORBAX TC-C18 column(250 mm ×4.6 mm,5μm)with methanol-water(75∶25)as the mobile phase.The flow rate was 1.0 mL/min and the UV detection wavelength was set at 250 nm.[Results]The linearities of α-Cyperon were in the range of 0.005 5～0.55 μg/mL(r=0.999 9).The average recoveries of α-Cyperon were 102.36%.The RSD were 1.75%(n=6).[Conclusion]The method is simple,accurate,strongly specific and can be used for the quality control of Xiangsha Yangwei pills.

Xiangsha Yangwei pills;α-Cyperone;determination;HPLC

R284.2

A

1672-1519（2012）05-0487-02

屠 莹（1983-），女，硕士，药师，主要从事医院药学工作。

2012-06-15）

·专家论坛·