正交设计法对黄芩提取工艺的研究

于千，张杨

(1.沈阳医学院医学教育研究中心，辽宁沈阳110034;2.大连华立金港药业有限公司)

黄芩［1］为唇形科植物黄芩 (Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根，性苦味寒，清热燥湿、泻火解毒、止血安胎，用于湿温、暑湿、胸闷呕恶，湿热痞满、泻痢、黄疸、肺热咳嗽、高热烦渴等。主要有效成分为总黄酮类化合物和黄芩苷。本实验主要选用黄芩苷及黄芩总黄酮的含量为主要评价指标，对提取工艺进行正交设计，优化其制备工艺，确定黄芩的最佳提取工艺。

1 材料与方法

1.1 材料 供试黄芩药材采自辽宁，经鉴定为Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根。黄芩苷对照品 (批号110715201005)购自中国药品生物制品检定所。

1.2 检测方法

1.2.1 总黄酮的检测方法 取黄芩提取物30 mg，精密称定，加入70%乙醇30 ml，加热回流2 h，放冷至室温，甲醇定容于50 ml量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。另取干燥至恒重的黄芩苷对照品25 mg，加70%乙醇定容于50 ml量瓶中，摇匀，作为对照品溶液备用。

1.2.2 黄芩苷的检测方法［1］色谱条件:流动相:甲醇－水 －磷酸 (47∶53∶0.2);检测波长:280 nm;对照品溶液的制备:取干燥恒重的黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 m l含60μg的溶液，即得。供试品溶液的制备:取黄芩提取物0.1 g，精密称定，加70%乙醇40 ml，加热回流3 h，放冷，滤过，加70%乙醇定容于100 ml量瓶中，摇匀，即得。

测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

2 提取工艺的研究

2.1 水提取工艺的研究 有文献［2］报道温度、加热时间对黄芩苷水溶液稳定性有影响，温度越高，时间越长，分解越多。因此对黄芩的以下三种煎煮方式进行比较，并以总黄酮和黄芩苷为考察指标进行综合评价和分析。

2.1.1 煎煮方法 方法一:取黄芩10 g，精密称定，加入凉水100 ml，加热煮沸2 h，滤过，蒸干;方法二:取黄芩10 g，精密称定，加入50℃温水中，再加热煮沸2 h，滤过，蒸干;方法三:取黄芩10 g，精密称定，直接加入100℃沸水中，煮沸2 h，滤过，蒸干。

2.1.2 结果 本实验以黄芩苷和总黄酮为考察指标，按1.2项检测方法进行检测，并加权综合评分，每项指标含量最高的为50分，其他的按比例折合成相应的分数，两指标得分相加，即总分。考察结果详见表1。

表1 黄芩不同提取方法考察

从表1可见，三种煎煮方法中的方法三提取物中总黄酮和黄芩苷的含量最高，综合评分最高。

2.2 正交实验研究 本实验是对最佳提取方法进行优化，并以黄芩苷和总黄酮为考察指标，加权综合评分，其中总黄酮含量50分，黄芩苷含量50分，采用L9(34)正交试验考察最佳提取纯化工艺，因素水平见表2，正交试验结果见表3，方差分析见表4。

表2 因素水平表

表3 正交实验分析结果

表4 方差分析表

2.3 结果分析 表1提示，三种煎煮方法中的方法三提取物中总黄酮和黄芩苷的含量和综合评分均最高，因此，确定煎煮方法为取黄芩10 g，精密称定，直接加入100℃沸水中，煮沸2 h，滤过，蒸干。

直观分析和方差分析结果表明:加水量和提取时间差异有显著性，因此选择均数最高的水平为最佳方法，另外由于提取次数差异无显著性。根据节能原则，选择提取一次为最佳提取次数。故确定最佳水提工艺为A3B2C1，即取黄芩适量，直接加12倍量沸水中，提取一次，每次1 h。

3 讨论

本实验主要选用黄芩苷及黄芩总黄酮的含量为主要评价指标，对提取工艺进行正交设计优化其制备工艺，确定黄芩的最佳提取工艺。最佳煎煮方法不仅可以让有效成分在煎煮过程中最少量的损失，而且可以最大量的提取和利用，为大批量生产和制剂提供基础。

［1］国家药典委员会.中国药典，I部［S］.北京:中国医药出版社，2010:283.

［2］雷泞菲，彭书明，周嘉峪，等.黄芩中黄芩苷提取工艺的研究 ［J］.时珍国医国药，2007，18(11):2664－2666.