RP-HPLC法测定牡荆片中牡荆素的含量

刘静 刘灿仿

RP-HPLC法测定牡荆片中牡荆素的含量

刘静 刘灿仿

牡荆片；RP-HPLC；牡荆素

1 仪器与试药

LC-2010AH型高效液相色谱仪(日本岛津)；HS10260D型超声波清洗器(天津市恒奥科技发展有限公司)；AUW 120D型电子天平(日本岛津)；UV-2450型紫外一可见分光光度计(日本岛津)。牡荆素(Viterxin)对照品(中国药品生物制品检定所,编号 111687-200701,供含量测定用)；牡荆片(河北国金药业提供,批号为 080615,080717,080728,080810,080818)。乙腈为色谱纯；水为娃哈哈纯净水；其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 方法 取牡荆片,研碎,精密称定,置 250ml圆底烧瓶中,加甲醇-25%盐酸(4∶1)[2]150ml,水浴加热 20min,放冷至室温,挥干,残渣加流动相溶解,移入 250ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。

2.2 最大吸收波长的确定 取对照品牡荆素适量,用流动相稀释后在 UV-7501紫外-可见分光光度计测定,测得牡荆素的最大吸收波长为 270 nm。本实验选用 270 nm为检测波长。

2.3 色谱条件 色谱柱为 Diamonsil C18柱(250 mm×4.6mm),柱温为 25℃ ,流动相为甲醇-乙腈-0.025mol/L磷酸水(5∶15∶80),流速为 1.0ml/min,检测波长 270nm。

2.4 标准曲线的绘制 取牡荆素对照品,精密称定 11.10mg,置 50m l容量瓶中,加甲醇超声溶解,定容,摇匀,精密吸取5ml,置 100 m l量瓶中,加甲醇稀释,定容,制成每毫升含0.0111mg牡荆索的溶液,精密吸取 2.0,4.0,6.0,8.0,10.0μl注入高效液相色谱仪中,测定色谱峰的峰面积。见表 1。

表1 线性范围考察

可得回归方程:Y:2242239X-1619.7,r=0.9997,结果显示牡荆索进样量在 0.0222～0.1110μg范围内线性关系良好。

2.5 稳定性考察 取本品 4片,取约 0.3 g,精密称定,按供试品制备的方法操作,制成供试品溶液。精密吸取供试品溶液10μl,按 0,2,4,6,8 h时间间隔,分别进样分析,测定牡荆素的色谱峰面积。分别为 124124,124116,123142,123587,123698,平均值为 123733,RSD=0.33%。结果表明,供试品溶液制备后8 h内测定,牡荆素的峰面积无明显变化,说明在此时间内,供试品溶液化学性质稳定。

2.6 精密度考察 精密吸取同一供试品溶液 10μl,按确定色谱条件,连续进样 5次,测定色谱峰面积分别为 124689,124551,124876,123171,123456,平均值为 124148,RSD=0.63%。结果提示,本实验精密度符合要求。

2.7 重现性考察 取本品 4片,取约 0.3 g,精密称定,分别按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液,测定含量,结果分别为 1.18,1.17,1.17,1.20,1.18,1.17 mg/片,平 均 值 为1.18mg/片,RSD=1.03%。结果表明,本实验重现性符合规定。

2.8 加样回收率 实验精密称取本品(批号 080615,含量1.1796mg/片)0.3 g,共称取 5份,置 250ml容量瓶中,精密加入浓度为 0.2496mg/ml的牡荆素对照品溶液 5ml,按样品测定方法测定。结果提示,本方法的回收率在97.54%～100.42%之间,RSD为 1.08%,符合有关规定。见表 2。

表2 加样回收率

2.9 样品含量测定 按供试品溶液的制备方法,对 5批样品进行含量。结果各批次样品(批号为 080615,080717,080728,080810,080818)中牡荆素的含量分别为 1.17、1.20、1.21、1.15、1.16mg/片。

3 讨论

HPLC法测定牡荆片中牡荆素的含量未见报道。本文采用HPLC法测定牡荆片中牡荆素的含量,结果不同厂家、不同批次产品的牡荆素含量相差较大,建议通过测定牡荆素的含量来控制牡荆片的质量。

1 卫生部药典委员会.卫生部药品标准中药成方制剂(第 10册).北京:人民卫生出版社,1997.124.

2 仲英.高效液相色谱法测定山楂叶总黄酮中牡荆素含量.时珍国医国药,2000,11:10.

R 917

A

1002-7386(2011)03-0448-01

10.3969/j.issn.1002-7386.2011.03.078

053200 河北省冀州市医院(刘静)；邢台医学高等专科学校药剂教研室(刘灿仿)

牡荆片是由牡荆子制成的制剂,具有平喘,镇咳,祛痰的功能。主要用于慢性气管炎,支气管哮喘。本方源自《中华人民共和国药品标准◦中药成方标准》第 10册[1],原标准项下无含量测定的方法,为有效控制其质量,笔者用RP-HPLC法对其中的牡荆素的含量进行了测定,经方法学考察认为本法简便,准确,可用于该制剂的质量标准。

2010-10-13)