桃叶鸦葱抗炎镇痛作用的实验研究
2010-11-29曾春萍
曾春萍
(张家口市药品检验所化学组,张家口 075000)
桃叶鸦葱是菊科植物桃叶鸦葱(Scorzonera sinensis Lipsch)的干燥全草。主要分布在河北、内蒙等地。民间使用疗效确切,具清热解毒、解毒疗疮之功效,且有饲用价值。笔者研究了桃叶鸦葱对实验性炎症的影响,为临床用药提供了一定的实验依据。
1 实验材料
1.1 仪器 ZW358十万分之一电子天平(日本岛津公司);UV-2100紫外可见分光光度计(北京莱伯泰科仪器有限公司);3k30超速冷冻离心机(美国Sigma公司)。
1.2 药物 桃叶鸦葱,采自河北省沽源县,经河北北方学院中药鉴定室赵恒成教授鉴定为正品。桃叶鸦葱浸膏的制备:桃叶鸦葱2.5 kg,用75%乙醇回流提取制备,生药含量为1.0 kg/L。消炎痛(山西三晋药业有限公司,批号067243)。伊文思蓝(成都贝斯特试剂有限公司,批号65535)。冰醋酸(张家口化学试剂厂,批号051125)。
1.3 动物 昆明种小鼠,雌雄各半,体质量18~22 g;SD大鼠,雄性,体质量180~220 g,均购于河北医科大学实验动物中心。
2 统计学处理方法
采用SPSS 17.0 for Windows软件处理。数据用均数±标准差(±s)表示,采用单因素方差分析,P<0.05表示有统计学意义。
3 方法
3.1 对醋酸诱发小鼠毛细血管通透性增高的作用[1]取小鼠50只,随机分为5组。实验前禁食不禁水15 h,高、中、低剂量组分别按 0.04,0.02,0.01 mL/g体质量灌胃,对照组给生理盐水,阳性组给消炎痛(0.01 mg/g)。给药30 min后,小鼠尾静脉注射2%伊文思蓝生理盐水溶液0.01 mL/g,30 min后,腹部注射0.3%醋酸溶液0.02 mL/g,20 min后,脱颈处死小鼠,剪开腹部皮肤,用10 mL生理盐水反复冲洗腹腔,收集洗涤液,以吸管吸出洗涤液5mL,3000 r/min离心15 min,取上清液用UV-2100紫外可见分光光度计在590 nm处比色,测定吸光度,与标准曲线比较,得到染料渗出量,比较组间差异。
3.2 对棉球所致肉芽组织增生的作用[2]取大鼠40只,分组及剂量同3.1,实验前禁食不禁水15 h,乙醚浅麻醉,无菌条件下大鼠背部剃毛,75%乙醇及0.2%利凡诺消毒后,切开皮肤,将已灭菌干燥的20 mg棉球植入背部皮肤下。术后当日给药,1次/d,连续7 d,第8天处死大鼠,剥离肉芽组织,滤纸吸干,烘箱干燥24 h后称质量,比较各肉芽组织的质量,计算增加百分率及抑制率,比较组间差异。
3.3 对蛋清所致大鼠足肿胀的作用[2]取大鼠40只,分组及剂量同3.1,实验前禁食不禁水15 h,测定每鼠右后足体积为基数,给药30 min后,以新配制的10%蛋清致大鼠足趾肿胀,分别于 0.5、1、2、3、4、5 h测大鼠右后足体积,求出肿胀增长百分率[(给药后值-给药前值)/给药前值],比较组间差异。
3.4 对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响[3]选取小鼠50只,随机分为5组,分组及剂量同3.1,实验前禁食不禁水15 h,腹部注射给药6 min后,腹部注射0.5%醋酸0.01 mL/g,0.5 h后记录25 min内小鼠扭体次数,与模型组相比较,求出减少百分率,比较组间差异。
4 结果
4.1 各组小鼠给药后对醋酸诱发小鼠毛细血管通透性增高的作用的比较 结果桃叶鸦葱各剂量组与模型组比较,均能显著抑制醋酸诱发小鼠毛细血管通透性增高(P<0.01),且高剂量组的作用与0.01 mg/g的消炎痛相当,结果见表1。
表1 桃叶鸦葱浸膏对小鼠毛细血管通透性的影响Tab.1 Effects on Capillary permeability of the mice
4.2 各组大鼠给药后对棉球所致肉芽组织增生的作用的比较 连续7 d腹部注射桃叶鸦葱各剂量组与模型组相比较,均对棉球所致肉芽组织增生有明显的抑制作用(P<0.01),且高剂量组的作用与0.1 mg/g的消炎痛相当,结果见表2。
表2 桃叶鸦葱浸膏对棉球肉芽组织增生的影响Tab.2 Effects on tampon granuloma of the rats %
4.3 各组大鼠给药后对蛋清所致大鼠足肿胀的作用的比较 结果桃叶鸦葱各剂量组与模型组比较,均有显著抑制蛋清所致大鼠足肿胀的作用,且高剂量组的作用与0.01 mg/g的消炎痛相当,结果见表3。
4.4 各组小鼠给药后对醋酸诱发小鼠扭体反应的比较 结果桃叶鸦葱各剂量组与模型组比较,对醋酸诱发的小鼠扭体反应有一定的抑制作用,但其作用强度不及消炎痛,结果见表4。
4 讨论
炎症是具有血管系统的活体组织对局部损伤的反应。肿胀是炎症早期的重要指标,在炎症晚期和慢性炎症期,由于巨噬细胞和纤维母细胞等增生,形成肉芽组织。本实验用醋酸、棉球和蛋清作为致炎因子,观察了桃叶鸦葱乙醇提取物对实验性渗出、肿胀、增生和疼痛的影响。
表3 桃叶鸦葱浸膏对蛋清所致大鼠足肿胀的影响(±sTab.3 Effects on swelling degrees of rat’s toes(±s%
表3 桃叶鸦葱浸膏对蛋清所致大鼠足肿胀的影响(±sTab.3 Effects on swelling degrees of rat’s toes(±s%
注:与模型组比较,△P<0.05,△△P<0.01。
组别 n 肿胀增长百分率剂量(mg/10 g)-1002004000.1模型组桃叶鸦葱浸膏桃叶鸦葱浸膏桃叶鸦葱浸膏消炎痛888881 h 32.9±7.129.3±4.425.1±6.820.6±2.5△18.5±3.7△△2 h 43.5±7.341.2±6.336.5±4.2△24.5±6.0△△22.6±4.3△△3 h 57.9±8.450.1±6.4△43.7±3.5△△37.2±3.8△△36.0±2.1△△4 h 78.5±5.864.5±6.9△51.2±4.0△△43.2±4.2△△40.1±5.3△△5 h 95.8±5.773.5±6.1△△63.1±3.7△△54.1±4.6△△55.2±4.2△△
表4 桃叶鸦葱浸膏对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响(±sTab.4 Effects on the twist reaction of the mice(±s
表4 桃叶鸦葱浸膏对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响(±sTab.4 Effects on the twist reaction of the mice(±s
注:与模型组比较,△P<0.01。
组别模型组桃叶鸦葱浸膏桃叶鸦葱浸膏桃叶鸦葱浸膏消炎痛n剂量(mg/10 g)-1002004000.11010101010扭体次数(次)32.1±4.527.8±2.825.0±3.4△21.0±2.6△18.5±1.5△抑制率(%)-13.422.131.542.4
桃叶鸦葱75%乙醇提取物低、中、高剂量组及消炎痛组与空白组比较,对醋酸诱发小鼠毛细血管通透性增高、棉球所致肉芽组织增生、蛋清所致大鼠足肿胀的抑制作用均有显著性差异。醋酸所致小鼠扭体试验的中、高剂量组和消炎痛组同空白对照组相比较具有显著性差异,低剂量组对肿胀也有较弱的抑制作用。显示其对化学因素引起的疼痛和炎症有明显的对抗作用。
急性炎症是“热毒”证候的一个重要表现,《滇南本草》谓清热解毒药:“清热,解诸疮,痈疽发背,丹流瘰疬。”桃叶鸦葱抗炎镇痛作用当与其清热解毒功效有关。
本实验证明其具有良好的抗炎、镇痛作用,为今后桃叶鸦葱的开发、应用提供了理论依据。目前,桃叶鸦葱抗炎镇痛作用的物质基础及作用原理还不甚清楚,在以后的研究中将进一步对此进行研究。
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