小儿吐泻宁散的薄层色谱鉴别方法研究

刘锐玲, 曲婷丽, 赵正保

(山西医科大学药学院药物化学教研室, 太原 030001; *通讯作者,E-mail:zhengbao_Z@163.com)

小儿吐泻宁散由广藿香、姜半夏、白术(炒)、厚朴、陈皮、茯苓等七味药材精制而成,具有理气和中、健脾化湿的功效。临床主用于小儿脾胃不和引起的吐泻、腹胀、不思饮食等症。小儿吐泻宁散原部颁标准中仅有理化鉴别内容[1],缺乏薄层鉴别和含量测定,因此我们前期采用气相色谱法对其君药广藿香进行含量测定,本实验定性鉴别从其他六味药中选出四味进行薄层鉴别。试验结果表明所建立的薄层色谱鉴别法专属性强、简便、稳定性好,可为小儿吐泻宁散质量标准的建立提供依据。

1 仪器、药品及试剂

1.1 仪器 UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)。

1.2 药品 小儿吐泻宁散(山西华康药业股份有限公司提供,批号:20060101,20060102,20060103);陈皮对照药材(批号:120969-200204),厚朴对照药材(批号:121285-200301),茯苓对照药材(批号:121117-200403),甘草对照药材(批号:120904-200511),均购于中国药品生物制品检定所;阴性对照品(自制)。

1.3 试剂 正丁醇、环乙烷、冰醋酸、乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醚、石油醚(北京化工厂),均为分析纯;硅胶 G、硅胶 GF254(青岛海洋化工厂分厂)。

2 方法与结果

2.1 陈皮的薄层色谱鉴别 取小儿吐泻宁散6 g,研细,加甲醇40 ml,超声处理 15 min,滤过,滤液浓缩至1ml,作为供试品溶液[2-5]。另取陈皮对照药材1 g,同法制成对照药材溶液。处方中除去陈皮,按供试品溶液制备方法,制得去陈皮阴性供试品溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述供试品溶液5μl、对照药材溶液 2μl,阴性对照溶液 5μl分别点于同一硅胶 G薄层板上,以二氯甲烷-甲醇(19∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照样品溶液在与对照药材色谱相应的位置上,无相同颜色的斑点,无干扰(见图1)。

2.2 厚朴的薄层色谱鉴别 取小儿吐泻宁散6g,研细,加盐酸 2滴和二氯甲烷 50ml,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 1 ml使溶解,作为供试品溶液[2,4]。另取厚朴对照药材1g,同法制成对照药材溶液。处方中除去厚朴,按供试品溶液制备方法,制得去厚朴阴性供试品溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述 3种溶液各 5μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以环己烷-乙酸乙酯(4∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照样品溶液在与对照药材色谱相应的位置上,无相同颜色的斑点,无干扰(见图2)。

图1 陈皮的薄层色谱图Fig 1 Thin layer chromatogram of Pericarpium citri reticulatae

图2 厚朴的薄层色谱图Fig 2 Thin layer chromatogram of Magnolia bark

2.3 茯苓的薄层色谱鉴别 取小儿吐泻宁散 18 g,研细,加甲醇 50 ml,超声处理 30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加二氯甲烷使溶解,滤过,滤液浓缩至 1 ml,作为供试品溶液[2,3]。处方中除去茯苓,按供试品溶液制备方法,制得去茯苓阴性供试品溶液。取茯苓对照药材 2 g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述 3种溶液各 5μl,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以石油醚(60-90℃)-乙醚(3∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照样品溶液在与对照药材色谱相应的位置上,无相同颜色的斑点,无干扰(见图3)。

图3 茯苓的薄层色谱图Fig 3 Thin layer chromatogram of Indian Bread

2.4 甘草的薄层色谱鉴别 取小儿吐泻宁散 6 g,研细,加乙醚 40 ml,置水浴上加热回流 1 h,滤过,药渣加甲醇 30 ml,置水浴上加热回流 1 h,滤过,滤液蒸干,残渣加水 30 ml使溶解,水溶液用正丁醇萃取3次,每次 15 ml,合并正丁醇液,用水洗涤 3次,每次15 ml,弃去水液,将正丁醇液置水浴上蒸干,残渣加甲醇 1 ml使溶解[2-7]。另取甘草对照药材 1 g,同法制备对照药材溶液。处方中除去甘草,按供试品溶液制备方法,制得去甘草阴性供试品溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录ⅥB)试验,取上述 3种溶液各 5μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-冰醋酸-水 (4∶1∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照样品溶液在与对照药材色谱相应的位置上,无相同颜色的斑点,无干扰(见图4)。

图4 甘草的薄层色谱图Fig 4 Thin layer chromatogram of Radix Glycyrrhiza

3 讨论

3.1 在厚朴的薄层鉴别中,曾参照 2005年版药典一部“厚朴”药材项下的鉴别方法,但由于本试验研究的是复方制剂,其他成分对其鉴别有影响,没有达到良好的分离。同时,药典上所使用的展开剂中含有苯,苯的毒性较大,对人体有危害,因此试验最终选用了本文的薄层鉴别条件,在此条件下,供试品与对照药材在相应的位置上,显相同颜色的斑点;而阴性供试品没有相应的斑点,表明本方法专属性较强,可作为小儿吐泻宁散中厚朴的定性鉴别的方法。

3.2 在陈皮的鉴别中,曾参照 2005年版药典一部“陈皮”药材项下的方法,但在陈皮的展开剂中含有甲苯,甲苯也为毒性试剂,因此试验参考资料[2-5],将展开剂换为二氯甲烷-甲醇,同时直接在 365 nm下检视,省去了药典中的显色过程,简化了试验操作。

3.3 本试验采用薄层色谱法对小儿吐泻宁散中的陈皮、厚朴、茯苓、甘草四味药材进行了定性鉴别,试验结果表明:所建立的方法专属性较强、分离效果良好,阴性均无干扰,可为将来修订小儿吐泻宁散质量标准提供依据。

[1] 卫生部药典委员会.卫生部药品标准中药成方制剂(第4册)[M].北京:化学工业出版社,1991:16.

[2] 国家药典委员会.中国药典 2005年第一部[M].北京:化学工业出版社,2005:59,132,176.

[3] 寇昆明,张超.藿香正气片中白芷、陈皮、茯苓的薄层色谱鉴别[J].基层中药杂志,2001,15(2):28.

[4] 宋丽军,赵文昌,黄爱萍.木香顺气丸薄层色谱鉴别研究[J].广东药学,2002,12(3):5-6.

[5] 江英桥.热毒宁口服液薄层色谱鉴别的研究[J].现代食品与药品杂志,2006,16(3):47-49.

[6] 葛迎社,汪忠华.小柴胡片中黄芩、甘草的薄层定性鉴别[J].中国药业,2003,12(11):61.

[7] 张明艳.香陈颗粒的薄层色谱鉴别[J].时珍国医国药,2006,17(7):1261-1262.