清宣止咳颗粒对急性支气管炎模型大鼠的影响

2010-10-18湖南省岳阳职业技术学院414000阮斌胡还甫余林岚

首都食品与医药 2010年6期

湖南省岳阳职业技术学院（414000）阮斌胡还甫余林岚

急性气管—支气管炎是儿科常见、多发的肺系疾病，属中医咳嗽范畴。清宣止咳颗粒根据中医理论，结合临床实践经验，精心筛选药物，经科学工艺制备而成。现对其治疗急性支气管炎的作用机理进行探索，将其对急性支气管炎模型大鼠的影响结果报道如下：

1 实验方法

1.1 造模与分组选日龄3周的幼年Wistar大鼠60只，♀♂各半，随机分成6组：①正常组；②模型组；③、④、⑤清宣止咳颗粒高、中、低剂量组；⑥风寒咳嗽冲剂（为阳性对照药，由云南铭鼎药业有限公司生产）组；将②、③、④、⑤、⑥组大鼠放入500ml密闭的玻璃容器内，50g卷烟末燃烧烟熏，同时通入O2（含5%CO2），持续1h，每天1次，连续烟熏21天，同时鼻滴奈氏卡他菌（3亿/ml）5滴，每周1次，共3次[1][2]。

1.2 给药方法与造模同时给药。模型组、正常对照组分别灌服生理盐水0.5ml／天，其余组给药量见结果，灌胃量为10ml/kg，连续21天[3]。

1.3 指标检测

1.3.1 病理学检查造模21天后，于最后1次给药后1h处死大鼠，取血加肝素抗凝备用，用于细胞内杀菌试验和白细胞趋向化功能试验。将大白鼠处死后，立即把各组动物的气管、支气管、连带肺组织一并固定于10%福尔马林溶液中，72h后，取出气管、支气管组织块，包埋切片，HE染色，于显微镜下观察。

1.3.2 细胞内杀菌试验[2]①取血并加肝素抗凝血，分离出白细胞用Hank＇s液配制成5×106/ml细胞悬液[4]。②用8ml Hank＇s液加2ml新鲜鼠血清配成20%新鲜血清调理素。③金黄色葡萄球菌，本院微生物教研室保留菌株，取金黄色葡萄球菌将其配制成1×108/ml细菌悬液。

④按如下操作

⑤计算

1.3.3 白细胞趋向化功能试验（琼脂糖平皿法）按琼脂糖平皿法制备琼脂糖平皿，每平皿打24孔，孔距为2.4mm，每行3孔测定一个样本。中间孔加白细胞悬液5μl，外孔加大肠杆菌24h液体培养物过滤液5μl，同孔加RPMI-1640培养液5μl作对照。

将上述平皿加盖后，放入湿盒内，置37℃温育3h。取出后每皿加3ml甲醇30min处理，继续加47%中性福尔马林溶液3ml固定，取出完整的琼脂层，粘附固定在平皿底层的细胞用瑞氏染液染色，水洗，待干。用400倍生物显微镜测微尺测量中间孔向两侧移行的距离。以中间孔细胞向外孔（趋化因子）移行的距离为A，向内孔（培养液对照）移行的距离为B，按下式计算移动指数[3]。