HPLC法测定枇杷和杨梅中维生素C的含量

朱庆珍

（苏州农业职业技术学院实训中心，江苏苏州215008）

HPLC法测定枇杷和杨梅中维生素C的含量

朱庆珍

（苏州农业职业技术学院实训中心，江苏苏州215008）

建立枇杷和杨梅中VC含量测定的高效液相色谱法。采用Kromasil100-5C18柱（4.6 mm×250 mm,5 μm），流动相为0.1%草酸溶液，检测波长254 nm，线性范围9.64 mg/L～48.20 mg/L，相关系数0.9999，检测限为0.69 ng，枇杷的加标回收率为94.0%～104.6%，杨梅的加标回收率为93.7%～108.4%。

高效液相色谱法；VC；枇杷；杨梅

Abstract：A method for determination of Vitam C in Loquat and Myrica rubra by High Performance Liquid Chromatography was established,Kromasil100-5C18column（4.6 mm×250 mm,5 μm）was used.The mobile phase was 0.1%Oxalic acid,Detected at 254 nm by Ultraviolet detector,Linear range was 9.64 mg/L-48.20 mg/L（r=0.9999）,the Detection limit was 0.69 ng,The recoveries of Loquat was 94.0%-104.6%and of Myrica rubra was 93.7%-108.4%.

Key words：High Performance Liquid Chromatography;Vitam C;Loquat;Myrica rubra

枇杷是我国南方特有的珍稀水果,其果肉柔软多汁，酸甜适度，味道鲜美，被誉为“果中之皇”。枇杷不但味道鲜美，营养丰富，而且有很高的保健价值。《本草纲目》记载“枇杷能润五脏，滋心肺”，中医传统认为，枇杷果有祛痰止咳、生津润肺、清热健胃之功效。而现代医学更证明，枇杷果中含有丰富的维生素、苦杏仁甙和白芦梨醇等防癌、抗癌物质。

杨梅原产我国温带、亚热带湿润气候的山区，主要分布在长江流域以南、海南岛以北，即北纬20度至31度之间，与柑桔、枇杷、茶树、毛竹等分布相仿。杨梅营养价值高，是天然的绿色保健食品。据测定：优质杨梅果肉的含糖量为12%～13%，含酸量为0.5%～1.1%，富含纤维素、矿质元素、维生素和一定量的蛋白质、脂肪、果胶及8种对人体有益的氨基酸，其果实中钙、磷、铁含量要高出其他水果10多倍。杨梅生长在远离大城市的山区，极少或没有被大气污染，栽培管理粗放，病虫危害较少，具有“绿色无公害水果”之美誉。

枇杷和杨梅因其提取液有颜色，采用滴定和比色法测定其中的VC有干扰，本文采用高效液相色谱法测定其中的VC含量，既简单快速，又无干扰，准确度又高。

1 样品与方法

1.1 样品、试剂与仪器

枇杷：苏州东山的冠玉枇杷；杨梅：苏州东山的大叶细地杨梅。草酸与VC标准品：市售；水：二次去离子水；液相色谱仪：戴安公司DIONEX高效液相色谱仪，P680HPLC泵，PDA100检测器，色谱柱：Kromasil100-5C18柱，流动相：0.1%的草酸溶液；流速：1.0 mL/min；检测波长：254 nm。

1.2 方法

1.2.1 标准品的配制

准确称取VC标准品0.0482 g置100 mL量瓶中，加1%的草酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。作为标准贮备液。

1.2.2 样品的处理

取一定量的枇杷和杨梅果肉置1%的草酸溶液中研磨（草酸的量以将样品覆盖为宜，因枇杷果肉较滑而难以研磨，应用纱布将果肉包裹起来放入草酸溶液中研磨），定容后，离心分离，取上清液经0.45 μm的滤膜过滤后进样。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

VC在245 nm波长处有最大吸收。张秀梅[1]等测定菠萝中的VC采用240 nm，庞燕军[2]、张培[3]等测定饮料和食品中的VC采用262 nm,刘长建[4]测定青椒中的VC采用254 nm。分别于3种波长处测定了枇杷和杨梅中的VC，结果见表1。

表1 不同波长下枇杷和杨梅中VC的测定结果Table 1 Test result of vitamin C in Loquat and Myrica rubra on different wavelengths

试验结果表明，3种波长测定结果没有明显差异。采用254 nm波长为测定波长。

2.2 提取液浓度的选择

VC在酸性条件下较稳定，所以采用草酸溶液来提取。开始时用0.1%的草酸溶液提取，测定结果明显偏低，后来采用1%的草酸溶液研磨提取，定容后离心分离，取得了良好的结果。

2.3 线性与范围

准确量取 2.2.1 标准品贮备液 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL置50 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀后分别进样10 μL，记录色谱图，以峰面积与相应的标准品浓度作线性回归，得到线性回归方程为Y=0.3942X-0.6812，相关系数r=0.9999（n=5），线性范围为9.64 mg/L～48.20 mg/L。

2.4 检测限

当信噪比约为3时，VC的检测限为0.69 ng。

2.5 回收率

取一定量的枇杷和杨梅果肉置1%草酸中，加入一定量的VC标准溶液共同研磨，测定回收率。结果枇杷的加标回收率为94.0%～104.6%，杨梅的加标回收率为93.7%～108.4%。

2.6 样品的测定

按1.2.2方法测定枇杷和杨梅中的VC含量，结果见表2，色谱图见图1、图2、图3。

表2 枇杷和杨梅中维生素C含量的测定结果Table 2 The amount of vitamin Cin Loquat and Myrica rubra on 254 nm mg/100 g

3 结论

用该法测定枇杷和杨梅中的VC含量不受样品颜色的影响，方便，快速，无干扰，线性良好，准确度高。

[1]张秀梅，杜丽清，谢江辉，等.高效液相色谱法测定菠萝果实维生素 C 含量[J].福建果树，2007(1)：20-22

[2]庞燕军，陈靖，曹春英，等.高效液相色谱法测定食品和饮料中的维生素C含量[J].现代中西医结合杂志，2009，18(5)：555-556

[3]张培，冯慧予.高效液相色谱法测定保健食品和饮料中的维生素C[J].中国食品卫生杂志，2008，20(4)：311-313

[4]刘长建.青椒中维生素C的高效液相色谱分析[J].大连轻工业学院学报，2004,23(3)：229-230

Determination of Vitam C in Loquat and Myrica rubra by High Performance Liquid Chromatography

ZHU Qing-zhen
（Suzhou Polytechnic Institute of Agriculture Teaching and Training Center，Suzhou 215008，Jiangsu,China）

2009-08-11

朱庆珍（1963—），女（汉），高级工程师，研究生，主要从事化工分析与药物分析工作。