探讨 MMP9和 CD44V5表达与肺鳞癌浸润转移的关系

冯汉飞

肺鳞状细胞癌是我国常见的肺部恶性肿瘤之一,肺癌术后转移是肺癌患者死亡的主要原因,探讨与肺癌转移相关的生物学标记备受关注[1]。研究表明 MMP9(基质金属蛋白水解酶)和 CD44V5(细胞黏附分子)在人类多种恶性肿瘤中有较高水平的表达并与肿瘤的浸润转移有关。不同病理组织学分级和生物学标记的肺鳞状细胞癌治疗和预后有一定差异,因此对肺鳞状细胞癌进行 MMP9和 CD44V5标记测定很有必要,对这两种标记物进行联合标记测定,则预测肺鳞状细胞癌复发的准确率更高。如联合标记均为阳性者,在术后的进一步治疗、复查、随访等均应采取更为积极的态度,而联合标记均为阴性者提示预后良好。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集本院 2000年 6月—2009年 12月肺鳞状细胞癌 (其他各类型癌不作统计)手术切除标本 87例。其中男 62例,女 25例,年龄 32～75岁,平均年龄 (59.63±3.27)岁。标本用 10%甲醛溶液固定,行蜡包埋组织块,制成 4μm切片。全部患者术前均未经过任何抗癌治疗。

1.2 方法

1.2.1 免疫组化 免疫组化技术采用常规 S-P法。鼠抗人MMP9、CD44V5,单克隆抗体和 S-P试剂盒 (超微)购自福建省迈新生物技术开发公司。所有染色均用已知阳性片作阳性对照。

1.2.2 分级标准 根据 《中国肿瘤病理学分类》对肺鳞状细胞癌的分级法[2],将 87例肺鳞状细胞癌分为高分化鳞状细胞癌 9例 (10.35%),中分化鳞状细胞癌 14例 (16.10%)、低分化鳞状细胞癌64例 (73.55%)。肺炎性假瘤10例作为对照组。

1.2.3 结果判断标准 以 MMP9标记细胞的细胞质内出现棕色颗粒为阳性细胞,CD44V5标记细胞的细胞膜出现棕色颗粒为阳性细胞。根据表达阳性细胞在同类细胞中所占比例将结果分为阴性、弱阳性、阳性 3个等级,＜5%的细胞呈阳性反应为阴性 (-),5%～10%的细胞呈阳性反应为弱阳性 (±),＞20%的细胞呈阳性反应为阳性 (+)。

1.2.4 数值测量计算步骤 石蜡组织块 4μm切片,MMP9和CD44V5标记,在显微镜下 (400倍视野)观察,固定各测量条件,经摄像系统提取图像,对 87例肺鳞状细胞癌每例在上、下、左、右、中间各连续测量 20个细胞 (相互融合或重叠者不作统计),检测每例肺鳞状细胞癌阳性细胞标记的结果。

2 结果

2.1 肺鳞状细胞癌中 MMP9和 CD44V5联合标记 87例肺鳞状细胞癌组织中 MMP9和 CD44V5联合表达阳性为 40.23%(35/87),弱阳性为 22.99%(20/87),阴性为 36.78%(32/87)。

2.2 MMP9和 CD44V5标记肺鳞状细胞癌与临床病理分级的关系 通过对 87例肺鳞状细胞癌进行 MMP9和 CD44V5联合标记,肺高分化鳞状细胞癌阳性 11.12%(1/9)、阴性88.88%(8/9);中分化鳞状细胞癌阳性 21.43%(3/14)、弱阳性 35.72%(5/14)、阴性 42.85%(6/14);低分化鳞状细胞癌阳性 48.43%(31/64)、弱阳性 23.44%(15/64)、阴性28.13%(18/64)。有淋巴结转移 3l例,为 35.64%(31/87)。联合标记阳性与年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小无关,与肺鳞状细胞癌分化程度、浸润、淋巴结转移有关。

3 讨论

3.1 肺鳞状细胞癌的转移复发分为浸润转移和肿瘤细胞脱落远处转移两种。近年研究表明,MMP9标记阳性与浸润转移相关,CD44V5标记阳性则与远处转移相关。肿瘤细胞在侵袭、转移过程中必须破坏细胞外基质和基质膜等一系列自然屏障[3]。MMP9主要功能为降解Ⅳ型胶原,在肿瘤细胞突破基底膜屏障和浸润转移中起重要作用,阳性表达与肿瘤侵袭密切相关。CD44V5与细胞黏附有关,阳性表达可改变肿瘤细胞表面黏附分子的构成和功能,有助于肿瘤细胞获得转移潜能。MMP9和 CD44V5促进浸润转移作用机制可能是表达 MMP9和CD44V5的癌细胞与淋巴管或血管内某种配体结合,使浸润转移至那里的肿瘤细胞更加稳定地寄宿与生长,在近处或远处形成肿瘤结节。

3.2 MMP9存在于细胞质内,它的来源可能是癌细胞本身复制的产物,MMP9增多释放到细胞外,破坏了细胞基质防御系统,侵略了癌周组织,为癌细胞增殖扩大争取空间。细胞膜的黏附分子有多种,而 CD44V5是其中一种,它给恶性肿瘤患者带来不幸,是一种细胞分离分子,它的出现可能是癌细胞自身复制转录至细胞膜,也可能是其他细胞复制释放出体液被癌细胞某种配体吸附在癌细胞膜上,CD44V5物质的增加,细胞的黏附性降低,亲和力脆弱,使癌细胞易脱落随血管或淋巴管形成转移癌。如有某种药物或方法能够阻止 MMP9和 CD44V5的产生,人们埘防治癌症将有新的突破。

3.3 对 87例肺鳞状细胞癌进行 MMP9和 CD44V5联合标记与临床病理及治疗关系,肺鳞状细胞癌 MMP9和 CD44V5标记均为阴性 36.78%(32/87),手术切除干净后不需化疗。肺鳞状细胞癌的 MMP9和 CD44V5联合标记弱阳性 22.99%(20/87),手术切除后必须追踪观察。肺鳞状细胞癌 MMP9和CD44V5联合标记阳性 40.23%(35/87),必须采取积极有效的治疗措施,密切随防。因此在肺鳞状细胞癌手术切除后,根据各患者 MMP9和 CD44V5联合标记阴性和阳性的结果,进行合理的治疗,才能收到理想的效果。

3.4 随着肺鳞状细胞癌恶性程度增高,MMP9和 CD44V5联合标记的阳性结果增多,肺鳞状细胞癌阳性 35例、弱阳性 20例、阴性 32例,有淋巴结转移 31例为 35.64%(31/87)。肺鳞状细胞癌的恶性程度越高,MMP9和 CD44V5的阳性率越多,淋巴结转移的机会越大。通过对 87例肺鳞状细胞癌进行MMP9和 CD44V5联合标记,得出肺鳞状细胞癌阴性和阳性结果,可为肺鳞状细胞癌的术后治疗和预后提供较客观的依据。

3.5 肺炎性假瘤 10例,作为对照组,进行基质金属蛋白水解酶 MMP9和细胞黏附分子 CD44V5联合标记测定均为阴性,手术切除干净则无后顾之忧,对肺炎性假瘤的治疗及预后判断很有意义。

1 邱小芬,王孝养,张增锋,等.非小细胞肺癌中 CD44V 6的表达[J].临床与实验病理学杂志,2003,19(4):413.

2 张友会,刘复生,刘彤华,等.中国肿瘤病理学分类 [M].北京:科学技术文献出版社,2001,2:107.

3 范松青,魏启动,李美容,等.MMP2、MMP9、TIMPl和 TIMP2在乳腺癌中的表达及临床意义 [J].诊断病理学杂志,2003,10(2):99.