中药薄层析在实际工作中的问题

孙黎明

辽宁鞍山市药品检验所，辽宁 鞍山 114006

1 样品的预处理与供试液制备

在基层的一些检验人员认为薄层的固定项可即用即弃，不怕供试液中杂质的污染，因而样品无需精制、净化，就缩短或简化提取过程，而实际工作中由于中成药成分极为复杂，未知成分多，常相互干扰或背景污染难以得到满意的分离效果。

2 薄层色谱的点样

点样是出现问题较多的一个环节，它是薄层色谱分析的第一部，也是极为关键的一步，因为不良的点样技术是最主要的误差来源。

2.1 上样超负荷问题较普遍

这个问题有一定客观因素，因为近年来一些药厂在投料时采取低限投料、及低级别原料药投料，导致检验难度增大，一些检验人员为得到较好的检验结果加大点样量，导致上样容积过大，这是他们对于上样容积超负荷严重后果的认识不足。因为上样量不适当的加大并不会提高斑点分辨率，相反由于样品浓度过大产生拖尾效应，严重的干扰检验结果。

2.2 薄层板点样原点过大

A样的同时样品在原点位置已呈环形展开，即所谓上样环效应，如样品在溶剂中溶解度很大，原点心将变成空心环，这种效应对随后的线形展开、定量测定会造成很不利的影响。

2.3 薄层板原点的机械损伤

在工作中一些检验人员常在点样过程中点破薄层板，而点样器对薄层板表面的机械损伤对色谱质量尤其是定量分析将造成灾难性影响。

3 吸附剂与展开剂对薄层色谱的影响

吸附剂活性是由其表面拥有众多的硅醇基活泼性及游离型硅醇基决定硅胶的活性（1）硅醇基为亲水性集团，易吸附水而成为水合硅醇基。自制薄层板在105℃烘干，就是使水合硅醇基而活化；而一些实验人员在实验过程中不活化或活化板暴露空气中时间过长（一般不超过10分钟）从而使活化硅胶吸附空气中水蒸气分子降低活性，导致分离度下降，使样品检识度降低，甚至难于辨认。

薄层色谱实际上是一个三维的层析过程，溶剂蒸气在展开箱中参与色谱展开，并起着重要作用。常规薄层色谱中，常用多组分溶剂展开，不同溶剂分子在吸附区相互竞争，产生取代效应。如硅胶是亲水性吸附，它首先对溶剂中极性大的分子有更大亲和力，所以被吸附的各组分浓度与气体空间和溶剂液相组成差别很大，如不控制，情况会很复杂。换言之，薄层板没有预吸附，混合溶剂系统中一部分溶剂分子有选择的吸附在薄层板上形成因定相，同时在板上形成溶剂梯度而直接形象层析过程，如药典收载的人参薄层鉴别，在展开箱中预平衡15分钟比未预平衡直接展开多得的色谱分离度明显提高，且重现性好。

4 影响薄层色谱的其他因素

除上述影响因素外，温度、操作熟练程度及器材、试剂均对薄层色谱有影响。温度影响首先在于展开剂中有了溶剂因沸点、蒸气压、相对密度不同，而蒸发程度各异，因而展开箱中展开剂、蒸发比例也发生变化，必然直接影响层析结果，另外含水的展开剂在放置分层或展开时有机相中水的比例也不同，从而不同程度的改变了展开剂极性影响分离度。如果用了不合格的薄层板，所得的薄层色谱是一个难以辨认的、扭曲的图谱，此外在调研中还发现一些单位的所用的部分试剂过于陈旧，这将直接影响薄层色谱的分离能力，如甲酸乙酯，在多次开瓶后因吸收空气中水分而水解，在大黄的薄层色谱中如用这样的甲酸乙酯做展开剂，那么色谱的分离度将明显下降。

讨论：我们应在环境、技术、器材及试剂等各个环节上加以重视、研究，进一步规范操作，才能得到满意的分析结果。

[1]周同惠等.纸色谱和薄层色谱[M].北京：科技出版社，1989，(1)7.