杜仲壮骨胶囊的薄层色谱鉴别

2010-06-01李玉兰李春花

中国药业 2010年8期

李玉兰，李春花，汪霞

（1.湖南省涟源市第二人民医院，湖南涟源 417124；2.湖南省涟源市人民医院，湖南涟源 417124；3.湖南省娄底市药品检验所，湖南娄底 417000）

杜仲壮骨胶囊由杜仲、人参、三七、淫羊藿、川芎、当归等组方，具有益气健脾、养肝壮腰、活血通络、强健筋骨、祛风除湿之功效，临床用于治疗风湿痹痛、筋骨无力、屈伸不利、步履艰难、腰膝疼痛、畏寒喜温等症。该药品收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂（第十二册）》，原标准中仅有化学鉴别反应及制剂通则项下检测内容，专属性不强，难以控制药品质量。为保证药品质量，确保疗效，参照有关文献[1-2]，笔者对其质量控制方法进行了研究，现将其定性鉴别方法报道如下。

1 仪器与试药

紫外光灯（上海顾村电光仪器厂）；定量点样毛细管（上海东名玻璃仪器有限公司）。硅胶G（青岛海浪硅胶干燥剂厂）；人参对照药材（批号为 917-9905）、三七对照药材（批号为 120941-200405）、人参皂苷 Rb1对照品（批号为 110704-200318）、人参皂苷 Rg1对照品（批号为110703-200424）、人参皂苷 Re对照品（批号为 110754-200421）、三七皂苷 R1对照品（批号为 110745-200312）、川芎对照药材（批号为120918-200608）、当归对照药材（批号为120927-200613）、淫羊藿苷对照品（批号为110737-200413），均购自中国药品生物制品检定所；杜仲壮骨胶囊（甘肃岷海制药有限责任公司，批号为080601）；所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 三七、人参

取样品3.6 g，加甲醇50 mL，加热回流提取30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水15 mL，用三氯甲烷振摇提取2次，每次10 mL，弃去三氯甲烷液，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次10 mL，合并正丁醇提取液，用1%氢氧化钠溶液洗涤2次，每次15 mL，再用正丁醇饱和的水洗至中性，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液；取三七对照药材1.0 g及人参对照药材1.0 g，分别同法制成对照药材溶液；取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rg1对照品、三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1 mL各含0.5 mg的混合溶液，作为对照品溶液；另取按相同制备工艺制成的缺三七、人参的阴性样品，再同法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述6种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱和对照品溶液色谱相应位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照品溶液色谱则无此斑点（见图1）。

2.2 当归、川芎

取样品4.5 g，加乙醚30 mL，加热回流提取30 min，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液；取当归、川芎对照药材各0.5 g，分别加乙醚25 mL同法制成对照药材溶液；再取按相同制备工艺制成的缺当归、川芎的阴性样品，再同法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述4种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（9 ∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对照品溶液色谱则无此斑点（见图2）。

2.3 淫羊藿

取样品5 g，加甲醇50 mL超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，用乙酸乙酯20 mL分2次提取，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液；取淫羊藿苷对照品加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液；另取按相同制备工艺制成的缺淫羊藿的阴性样品，再同法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（7∶2.5∶0.25）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，于105℃烘约10 min，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，而阴性对照品溶液色谱则无此斑点（见图 3）。