消咳宁片质量标准研究

熊灿琼，吴 娟

（贵州省毕节地区药品检验所，贵州 毕节 551700）

消咳宁片由盐酸麻黄碱、甘草浸膏、苦杏仁、石膏、碳酸钙组成，具有止咳祛痰的作用，用于感冒、咳嗽、气管炎、支气管哮喘等，原质量标准中盐酸麻黄碱的含量采用非水滴定法测定[1-2]，余下组分采用一般的理化鉴别。为更好地控制产品质量，笔者采用薄层色谱（TLC）法鉴别消咳宁片中甘草浸膏和苦杏仁，高效液相色谱（HPLC）法测定其盐酸麻黄碱的含量，建立了可靠、准确、专属性强的质量控制方法。

1 仪器与试药

LC-10ATvp型高效液相色谱仪（岛津），SPD-10Avp型检测器。甘草对照药材，甘草酸铵、苦杏仁苷、盐酸麻黄碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号分别为904-8801，110731-200511，110820-200403，171241-200303）；消咳宁片（市售品，批号分别为 060219，20070202，070301.025）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 TLC鉴别

苦杏仁：取样品15片的细粉，加乙醚50 mL，加热回流1 h，弃去乙醚液，药渣用25 mL乙醚洗涤后挥干，加甲醇30 mL，加热回流1 h，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液；按处方取不含苦杏仁的余下药材同法制备阴性对照品溶液；另取苦杏仁苷对照品，加甲醇制成每1 mL含2 mg的溶液，作为对照品溶液。照TLC法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）5～10℃放置12 h的下层溶液为展开剂，展开，取出，立即喷以磷钼酸硫酸溶液，在105℃烘约4 min。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液无干扰（见图1 A）。

甘草浸膏：取苦杏仁鉴别项下的供试品溶液蒸干，残渣加水40 mL使溶解，用正丁醇提取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用水洗涤3次，蒸干，残渣加甲醇3 mL使溶解，作为供试品溶液；按处方取不含甘草浸膏的药材成分同法制备阴性对照品溶液；另取甘草对照药材1 g，同法制成对照药材溶液；再取甘草酸铵对照品，加甲醇制成每1 mL含2 mg的溶液，作为对照品溶液。照TLC法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述4种溶液各2 μL，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15∶1∶1∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘约4 min，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对照品溶液无干扰（见图1 B）。

图1 薄层色谱图

2.2 盐酸麻黄碱含量测定

2.2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Diamonsil C18柱（150 mm ×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈 -0.1%磷酸（9 ∶88）；检测波长：207 nm；进样量：20 μL。在此条件下，理论塔板数按盐酸麻黄碱峰计算不低于3 000，分离度为4.9，色谱图见图2。

图2 高效液相色谱图

2.2.2 溶液制备

精密称取减压干燥至恒重的盐酸麻黄碱对照品0.018 12 g，置100 mL量瓶中，加甲醇适量，超声40 min使溶解，加甲醇至刻度，摇匀，作为贮备液，精密量取2 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。精密称取样品细粉适量（约相当于1/4片的细粉），置25 mL量瓶中，加甲醇适量，超声40 min使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 mL置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。按处方比例量取不含盐酸麻黄碱的阴性对照品，按上述方法制备阴性对照品溶液。

2.2.3 方法学考察

线性关系考察：精密吸取对照品贮备液（181.2 μg/mL）1，2，3，4，5 mL，分别置50 mL量瓶中，精密吸取20 μL注入液相色谱仪，测定峰面积，以进样质量浓度（X）对峰面积（Y）进行线性回归，得回归方程 Y=2.230 8 ×104X-4 892.1 ×103，r=0.999 8（n=5）。结果表明，盐酸麻黄碱质量浓度在3.624～18.120 μg/mL范围内与峰面积有良好的线性关系。

稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液，分别于0，1，3，4，6 h时测定。结果峰面积的 RSD=1.9%（n=5），表明供试品溶液在6 h内稳定。

精密度试验：精密吸取对照品溶液，按上述色谱条件重复进样5次。结果峰面积的 RSD=1.0%（n=5），表明仪器精密度良好。

重现性试验：取同一批（批号为060219）样品6份，按供试品溶液制备方法制备并按上述色谱条件测定。结果平均含量9.6 mg/粒，RSD=1.86%（n=6），表明方法重现性良好。

加样回收试验：精密称取已知含量的样品（批号为060219，含量 9.6 mg/粒）9份，每份约 0.016 g，精密加入对照品贮备液（181.2 μg/mL）5，8，10 mL 各 3 份，按供试品溶液的制备方法制备溶液并依法测定，计算回收率，结果见表1。

表1 盐酸麻黄碱加样回收试验结果（n=9）

2.2.4 样品含量测定

取3批样品，按上述方法制备溶液并依法测定，再以原标准方法测定其含量。结果见表2。

表2 样品含量测定结果

3 讨论

经查阅相关文献[3-6]，消咳宁片中盐酸麻黄碱为直接投料，曾采用0.1 mol/L盐酸溶液超声提取、甲醇超声直接提取及加热回流3种方法制备供试品溶液，并分别测其含量，结果相差不算大，但甲醇直接超声提取方法最简单，故采用甲醇直接超声提取。在乙腈-0.1%磷酸溶液比例为9∶88时，出峰时间约为6 min，峰形较好，且该检测条件下分离较好。本文增加两个主要成分的薄层色谱鉴别，使方法专属性更强。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2005：140，59，244.

[2]WS-10001-（HD-1343）-2003，化学药品地方标准上升国家标准[S].

[3]WS3-B-2362-97，卫生部药品标准[S].

[4]张立峰，赵国强，刘灿仿，等.HPLC法测定小儿咳喘灵颗粒中盐酸麻黄碱的含量[J]. 中国药师，2008，97（2）：209.

[5]刘艳丽，宋雪峰，郭迎霞，等.HPLC法测定腰腿痛丸中盐酸麻黄碱的含量[J]. 中国药师，2008，100（5）：599.

[6]田 静，许亚林，陶 金，等.HPLC法测定小儿化痰止咳冲剂中盐酸麻黄碱的含量[J]. 中国药事，2006，20（1）：53-54.