中药阳起石壮阳作用实验研究
2010-06-01杨明辉王久源张蜀武杨苏文戴德银李泽兴
杨明辉 ,王久源 ,张蜀武,杨苏文,戴德银 ,李泽兴
(1.中国人民解放军452医院,四川 成都 610021; 2.成都中医药大学,四川 成都 610061)
阳起石是传统温肾壮阳药,被历代医家推崇为治疗阳痿的要药,笔者曾对阳起石的温肾作用进行了研究,发现其具有温肾作用且呈一定的量效关系[1]。在此对阳起石的壮阳作用进行了研究,现报道如下。
1 材料
仪器:FJ-200δ检测分析仪(西安262厂);TMP-1型上皿式电子天平(湖南仪器厂仪表总厂天平厂)。
动物:昆明种小白鼠,雌雄兼有,体重(28±5)g;昆明种幼年雄性小白鼠,体重9~14 g。均由四川抗菌素工业研究所动物房提供。
试药:阳起石,购自成都市中药材公司,经成都中医药大学药学院中药鉴定教研室、西南冶金地质斟探公司地质研究所共同鉴定为绢云母化透闪石岩,含铁透闪石岩,为药用正品阳起石;男宝(天津力生制药厂,批号为200506054);甲基睾丸素片(成都制药二厂);黄酒,豌豆淀粉,蒸馏水,生理盐水(NS)。睾酮放射免疫药盒(天津德普公司),内含睾酮抗血清、125I睾酮、睾酮标准品、沉淀溶液,其中睾酮标准品共6瓶,零标准品A为4.0 mL,其余标准B-F每瓶为1.0 mL,各标准品基质为处理过的人血清(分别含有0,0.2,1.4,8.0,16.0 ng/mL 的睾酮 );沉淀溶液组分为羊抗兔 γ 球蛋白(GARGG)和聚乙二醇(PEG)的生理盐水溶液。
2 方法与结果
2.1 试验药物制备
阳起石末[2]:将阳起石刷净表面,砸碎,碎至约1 cm大小,单层,置陶瓷盘中,用箱式电阻炉在700℃恒温加热,待样品变红时再煅15~25 min,至红透取出,黄酒淬,反复煅、淬7次,阳起石与黄酒比例为5∶1(均按质量计算,以下同),将煅淬后的阳起石阴干,研成细末,过100目筛,备用。
淀粉胶体助溶剂:将豌豆淀粉过100目筛,筛后淀粉溶解于蒸馏水中(事先用烧杯盛好蒸馏水,淀粉均匀投放,自然溶解,淀粉与蒸馏水比例为3∶100),将烧杯加热,边加热边用玻棒轻轻搅拌,以溶液沸腾为度,制成淀粉胶体助溶剂。
各药物混悬液:取各种试验药物,均以淀粉胶体助溶剂为溶剂,配制各种质量浓度的药物混悬液,即高(200 g/L)、低(100 g/L)质量浓度的阳起石混悬液,男宝(药末过100目筛)混悬液(16 g/L),甲基睾丸素混悬液(甲基睾丸素片研末,过100目筛,0.4 g/L)。
2.2 对小鼠交尾作用和血清睾酮水平的影响
动物分组:取昆明种小白鼠,在实验环境下适应3 d,随机分为5组,即正常对照组(A组)、淀粉溶剂组(B组)、阳起石高剂量组(C1组)、阳起石低剂量组(C2组)和男宝组(D组),每组10只雄鼠、50只雌鼠,将每只雄鼠同时与5只雌鼠同笼饲养。
给药方法:各给药组均灌胃给药(从雌雄小鼠同笼之日起,只对雄鼠灌胃给药),A组灌胃给予等容量NS,每天1次,连续10 d,每次灌药容积均为0.5 mL。
雌性小鼠阴栓出现情况:从雌雄小鼠同笼之日起,每天上午检查各组雌性小鼠有无阴栓现象出现,将出现阴栓现象的雌性小鼠从笼中取出,计算各组雌性小鼠阴栓出现率。结果见表1。可见,高剂量阳起石、淀粉溶剂、男宝均能明显提高雌性小鼠阴栓出现率。
表1 各组雌性小鼠阴栓出现率比较
雄性小鼠血清睾酮含量测定:末次给药24 h后摘取雄性小鼠眼球,取血,置肝素抗凝试管中,按文献[3]方法及放射免疫盒使用说明,用双抗法测定血清睾酮含量,试验由华西医科大学126实验室协助完成。结果见表2。可见,与A组相比,高剂量阳起石、男宝可使雄性小鼠血清睾酮含量升高但无统计学意义(P>0.05),而低剂阳起石则可降低雄性小鼠血清睾酮含量但无统计学意义(P>0.05),阳起石高剂量组与低剂量组雄性小鼠血清睾酮含量有明显的差异(P <0.05)。
2.3 对幼年雄性小鼠的促雄激素样作用
动物分组:取昆明种幼年雄性小鼠,在实验环境下适应3 d,随机分为5组,即正常对照组(A 组)、淀粉溶剂组(B组)、阳起石高剂量组(C1组)、阳起石低剂量组(C2组)和甲基睾丸素组(E组),每组10只。
给药方法:各组小鼠均灌胃给药,A组给予等容量NS(0.4 mL),每天 1 次,连续10 d。
观察方法及结果:于试验前1 d和试验末次给药后24 h称取小鼠体重,比较体重变化;末次给药后24 h,拉颈处死小鼠,摘取睾丸、前列腺-贮精囊,称取湿重。结果见表3。可见,A组幼年雄性小鼠体重增长较其他组好,尤其与C2组、B组、E组相比更明显;各组间前列腺-贮精囊、睾丸的湿重无明显差异。
表2 雄性小鼠血清睾酮含量测定结果
表3 阳起石对幼年雄性小鼠的促雄激素样作用(X±s)
3 讨论
男性性功能减退的原因复杂,包括社会心理、生理变化、疾病等多种因素,最终导致血清睾酮缺如、减少或作用不能发挥。雄激素的重要作用是在胚胎期诱导男性内、外生殖器的分化,在青春期促进男性第二性征的出现,以及在成人后维持男性的性功能和生育能力。天然的雄激素主要有睾酮和作用较弱的雄烯二酮。有研究证明,雄激素对男性性欲的产生和性功能的维持十分重要,越是低级的动物,性行为越容易受性激素的影响[4]。睾酮也是女性性驱动的重要激素,双盲试验证明,使用不引起男性化剂量的雄激素可使大多数性功能障碍的女性恢复性冲动[5]。本研究结果显示,高剂量阳起石通过提高小鼠血清睾酮含量而显著提高小鼠交尾次数。该现象并不是雄激素的直接作用,因为灌胃给药的天然激素在通过肝脏时99%被灭活[6],而且矿物药本身也不含雄激素,淀粉溶剂也无增加血清睾酮的作用。睾丸中雄激素的合成和分泌受下丘脑-垂体前叶的调节,垂体促性腺激素可以促进睾丸的生长发育,并促进其合成和分泌雄性激素,故凡能影响(兴奋)下丘脑-垂体前叶功能的药物,亦可间接促进睾九、前列腺-贮精囊的发育、增大。为此,专门进行了阳起石对幼年雄性小鼠的促雄性激素样作用研究,但与正常组相比,各组结果均无明显差异,故可认为阳起石对幼年雄性小鼠无促雄性激素样作用。
[1]杨明辉,王久源,张蜀武,等.中药阳起石温肾作用实验研究[J].中国药业,2010,19(3):9-10.
[2]邝安堃.某些助阳药对于大剂量皮质激素所致耗竭现象的影响[J].中华内科杂志,1963(11):113.
[3]朱忠勇.实用医学检验学[M].北京:人民军医出版社,1992:922-928.
[4]黄平治,李永海.男性性功能障碍[M].北京:科学技术文献出版社,1992:12.
[5]马永江.雄激素的临床应用[J].临床男性学杂志,1986,1(1):57.
[6]夏丽英.补肾药片药理作用研究[J].山东中医学院学报,1985,9(2):2.