伏立康唑与羟丙基－β－环糊精包合常数的测定

2010-04-09朱春霞

中国药业 2010年20期

赵庆，朱春霞

（1.江苏省南京市药品检验所，江苏南京 210015； 2.南京圣和药业有限公司，江苏南京 210038）

伏立康唑（voriconazole）是高亲脂性三唑类广谱抗真菌药物，在水中溶解度为0.2mg/mL（pH=3）且不稳定（其水解逆羟醛产物可重组为一种不活泼的对映体），因此难以开发成注射剂。笔者采用相溶解度法测定了伏立康唑与羟丙基-β-环糊精（HP-β-CD）的包合常数，旨在为国内医药企业研发伏立康唑静脉给药制剂和HP-β-CD的应用提供参考。

1 仪器与试药

UV2401型紫外分光光度计（日本岛津）；BS200S型电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。伏立康唑对照品（纯度为99.9％，自制）和原药（纯度为 99.5％，自制）；HP-β-CD（批号为20030520，西安德立生物化工有限公司）。

2 方法与结果

2.1 相溶解度法原理

环糊精包合物的包合常数（K值）是决定环糊精包合性质的一个重要参数，通过 K值的测定能对包合平衡作出定量描述，K值的大小反映了环糊精（CD）与药物分子（G）形成包合物（CD-G）时的结合能力强弱[1-2]。环糊精和药物在水溶液中的包合是一个平衡过程，符合质量作用定律。环糊精与药物形成1∶1包合物的平衡过程可用公式Ⅰ表示：

CD+G⇌CD-G

K=[CD-G]/[CD][G] （公式Ⅰ）

式中[CD-G]，[CD]，[G]分别代表平衡时包合物、游离环糊精和药物的浓度。环糊精和药物的起始浓度[CD]0和[G]0，可表示为：

[CD]0=[CD]+[CD-G]=[CD]+K[CD][G] （公式Ⅱ）

[G]0=[G]+[CD-G]=[G]+K[CD][G] （公式Ⅲ）

用相溶解度法测定 K值目前在药学领域应用较广泛。假设环糊精与药物分子形成1∶1的包合物，在无环糊精时药物的固有溶解度为S0；药物被环糊精包合后溶解度增加，即[CD-G]=[G]0-S0。由公式Ⅰ～Ⅲ可得：

K=（[G]0-S0）/｛[CD]0-（[G]0-S0）｝S0（公式Ⅳ）

[G]0=KS0/（1+KS0）[CD]0+S0（公式Ⅴ）

以[G]0对[CD]0作图，其斜率为 K S0/（1+K S0），截距为S0，故得：

K=斜率/截距（1-斜率）（公式Ⅵ）

2.2 标准曲线绘制

取伏立康唑适量，分别用甲醇稀释成含伏立康唑5，10，20，30，40，60μg/mL的溶液，于255 nm波长处测定吸光度，以质量浓度对吸光度绘制标准曲线（见图1），回归方程为 Y=0.022 8X+ 0.001 9，r=0.999 9（n=6）。

图1 伏立康唑标准曲线图

2.3 包合常数测定

将HP-β-CD配成质量浓度为200 g/L的水溶液，备用。分别称取100mg伏立康唑，置8个10mL具塞试管中，依次加入相同质量浓度、不同体积的HP-β-CD水溶液（1，2，3，4，5，6，7，8 mL），用蒸馏水定容，将定容过的过饱和溶液超声30 min，静置24h，待固液平衡后过滤，取滤液1mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀释定容，取上述溶液2.5mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀释定容。于255 nm波长处测定吸光度，计算出伏立康唑的溶解度，以HP-β-CD的质量浓度为横坐标、伏立康唑溶解度为纵坐标进行线性回归，回归方程为 Y=0.255 3X+2.109 3，r=0.998 6（n=8）。结果见表1及图2。因此，K=斜率/截距（1-斜率）=0.255 3/[0.002 109 3（1-0.255 3）]=162.5 L/mol。