高效液相色谱法测定益髓颗粒中士的宁的含量

2009-04-05，，

长春中医药大学学报 2009年4期

关键词：液相色谱仪三氯甲烷量瓶

，，

(吉林省食品药品检验所，吉林长春 130033)

益髓颗粒为熟地黄、枸杞子、丹参、马钱子粉等18味中药组成的复方中药制剂。为了更好的控制其质量，保障用药安全有效，本文采用HPLC法测定制剂中主要活性成分之一士的宁的含量，该方法简便、专属性强、重现性好[1-2]。

1 实验材料

Agilent 1100 series型高效液相色谱仪，士的宁对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110705-200306；纯度97%)；乙腈为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件[3]色谱柱Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：乙腈-0.01 mol/L庚烷磺酸钠与0.02 mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值2.8)(21∶79)；流速：1.0 mL/min；柱温35℃；检测波长260 nm，理论板数按士的宁峰计算>4 000。

2.2 供试品溶液取装量差异项下的本品内容物，研细，取2.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液3 mL，混匀，放置1 h，精密加三氯甲烷25 mL，密塞，称定重量，置水浴中回流提取2 h，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀,用铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液15 mL，蒸至约2 mL，置5 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 阴性对照溶液取不含马钱子粉的处方，按制备工艺制成阴性样品，阴性对照溶液。

2.4 对照品溶液的制备精密称取士的宁对照品6 mg,置10 mL量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取1.5 mL，置5 mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.5 线性关系的考察精密称取士的宁对照品6 mg,置10 mL量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取1.5 mL,置5 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度。分别精密吸取2，6，10，14，18 μL测定，以对照品进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=2 055.564X-18.940(r=0.999 97)，士的宁在0.077～0.695 μg范围内呈良好的线性关系。

2.6 精密度试验精密吸取供试品溶液10 μL,注入液相色谱仪，重复进样6次，测定其色谱峰面积值，结果RSD=0.8%，表明所用仪器具良好的精密性。

2.7 稳定性试验取同一供试品溶液，分别于0，2，4，8，24 h测定，结果士的宁峰面积RSD为1.1%，表明24 h内供试品溶液中士的宁的含量基本稳定。

2.8 重复性试验取同一批样品，依法独立测定6次，结果RSD=1.4%，表明本法具良好的重复性。

2.9 回收率试验精密称取已知含量的供试品(含量为0.161 8 mg/g)6份,分别精密加入对照品溶液(0.006 36 m/mL)25 mL,依法测定，按含量测定方法操作，计算回收率，结果士的宁平均回收率为97.09%，RSD为0.8%，表明本法回收率较好。

2.10 样品测定取3批样品,依法制备供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定峰面积，计算含量。结果3批样品中士的宁分别含量为0.161，0.141，0.080 mg/g。