妇炎净颗粒提取工艺的研究

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(1.南京妇幼保健院，江苏 南京 210029；2.南京中医药大学，江苏 南京 210029)

妇炎净方是我院的临床验方，主要由三棱、莪术、蒲黄等多味中药组成，该方主要用于慢性盆腔炎、盆腔包块的治疗。经多年的临床观察，其具有独特疗效，能使患者的炎症愈合、疼痛缓解、包块消失。为更好地发扬该方的优良疗效，更方便地服务患者，拟研制妇炎净颗粒，考虑其以合剂长期应用于临床，本制剂提取工艺设计为部分药味提取挥发油后，再与余下部分合并水提。本文对水提部分的工艺进行正交法优选，由于水提部分药材中多味含有黄酮类成分，且黄酮类成分不仅对心血管、消化系统有作用，还具有抗炎、抗病毒等多种作用[1],因此以总黄酮的量作为工艺考察的指标，文献多以甲醇为溶剂在紫外或可见光区测定其含量[2-3]，本文采用UV法，方法简便实用，重复性好，可操作性强。

1 仪器与试药

紫外可见分光光度计Spectrum 754型(上海分析仪器总厂);芦丁(20080315):中国药品生物制品检定所；药材：均购自南京市药材公司，经鉴定符合《中国药典》2005版规定；试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 正交试验设计[4-5]根据有关浸提理论及预试验结果，提取工艺与药材煎煮时间、煎煮次数、加水量等因素有较密切的关系，为选择最佳水提工艺条件，选用L9(34)正交表，各因素、水平见表1。

根据专业知识和实际经验，各试验的提取次数与提取时间及加水量的关系，如表2。

根据表2，若实验因素水平为A2B2C2即表示该号实验提取总时间为3.0 h，分2次提取，第1次加10倍量水，沸后煎煮1.5 h，第2次加8倍量水，沸后煎煮1.5 h,依次类推，量取体积。依照原处方，各次实验药材量为276 g。精密取滤液1.0 mL,置于25 mL容量瓶中，余按标线项下操作，测其总黄酮的量。

表1 工艺因素水平

表2 各号试验时间和加水量的分配关系

表3 正交试验数据及其计算分析结果

2.2 标准曲线的绘制 精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品10.12 mg,于50 mL容量瓶中，加适量甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得对照品贮备液，精密吸取1.0，2.0，3.0,4.0,5.0，6.0 mL,分别置于25 mL容量瓶中，加5%NaNO21 mL,放置6 min,续加入10%Al(NO3)31 mL，放置6 min,再加入5%NaOH试液10 mL，并加水置刻度，摇匀，放置15 min，以相应的试剂作空白对照，以UV-754在500 nm处测定各样品的吸收度,Y=10.592X+0.011 9(r=0.999 7),芦丁浓度在0.008 09～0.097 075 mg/mL之间呈良好的线性关系。

2.3 结果 根据正交表，共进行9次试验，有关实验数据及其计算分析结果，见表3。利用方差分析对表3中各因素的数据进行分析,结果见表4。

表4 方差分析

由表4的方差分析表可以看出，因素A加水量的影响具有显著性；因素B煎煮时间和因素C煎煮次数的影响均不显著。从表3极差直观分析，我们确定最佳水提取工艺A1B2C2，即:第1次加水9倍量，煎煮1.5 h，第2次加6倍量水，煎煮1.5 h，滤过，合并煎液。

2.4 工艺验证 根据正交试验结果，按此最佳工艺条件放大试验,投料3批进行工艺验证，结果表明该工艺提取较好。

3 讨论

3.1 从实验结果看，所选择的3个因素中加水量的影响具有显著性，因此在实际操作中应严格控制这个因素。

3.2 根据本方中药材的性质，采用水提工艺，可有效地提出其中大部分有效成分，水煎工艺优选曾进行浸泡试验考察，结果表明煎前浸泡0.5、1 h，总黄酮的量相差甚小,为节省工时，均选择浸泡0.5 h。

[1]王宪楷.天然药物化学[M].北京:人民卫生出版社,1990:276.

[2]侯世祥,邓定刚,蒋学华,等.复方中药制剂中总黄酮含量测定方法探讨[J].华西药学杂志,1993,8(3):131.

[3]丛维涛,崔 健,陈 新,等.不同产地槐角的质量分析[J].吉林中医药,2005,25(6):51.

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