NM23基因与非小细胞肺癌临床病理学特征及18F-FDG PET/CT影像特征的相关性

摘要：目的" 比较非小细胞肺癌中NM23基因表达情况不同在其临床病理学特征、18F-FDG PET/CT影像特征、生存时间的差异。方法" 选择2018年1月～2022年 12月于新疆医科大学附属医院病理确诊为非小细胞癌的107例患者的术后标本，运用免疫组化方法检测NM23表达情况，分为NM23低表达组（≤++）（n=64）与NM23高表达组（gt;++）（n=43），比较两组的临床病理学特征、18F-FDG FDG PET/CT图像上影像特征、生存期方面的差异。结果" NM23低表达组与高表达组在性别、临床分期、组织类型、分化程度、吸烟、PET/CT图像上生长部位、生存时间的差异无统计学意义（Pgt;0.05），但在原发灶分期、PET/CT图像上淋巴结转移情况的差异有统计学意义（Plt;0.05）。结论" NM23基因在非小细胞癌患者T分期、淋巴结转移方面支持其为抑癌基因。

关键词：非小细胞肺癌；NM23基因；临床病理学特征；正电子发射断层显像；生长部位；生存时间

Correlation between NM23 gene expression and the growth site and lymph node metastasis of non-small cell lung cancer in 18F-FDG PET/CT

XIA Luhua1， CHONG Le2， LI Hongyu3， GUO Peng1， DONG Zhanfei1， WANG Xinhua1， CHANG Cheng1

1Department of Nuclear Medicine，" 2Department of Ultrasound Medicine， 3Department of Breast Medicine， Tumor Hospital Affiliated to Xinjiang Medical University， Urumqi 830011， China

Abstract： Objective To compare the differences in clinicopathologic features， 18F-FDG PET/CT imaging features and survival time among non-small cell lung cancer with different NM23 gene expression profiles. Methods A total of 107 postoperative specimens of patients diagnosed with non-small cell lung cancer at the Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University from January 2018 to December 2022 were selected as the research subjects. Immunohistochemistry was used to detect the expression of NM23， and the patients were divided into two groups： NM23 low expression group （≤++） with 64 cases and NM23 high expression group （gt;++） with 43 cases. The clinical and pathological characteristics， lymph node metastasis， tumor growth site under 18F-FDG PET/CT imaging， and survival period differences between the two groups were compared. Results The low-expression group and high-expression group of the NM23 gene showed no statistically significant differences in terms of gender， clinical stage， histological type， differentiation degree， smoking， PET/CT imaging location of tumor growth and survival time （Pgt;0.05）. There were statistically significant differences" in both the primary tumor stage and the presence of lymph node metastasis on PET/CT imaging （Plt;0.05）. Conclusion NM23 gene is supported as a tumor suppressor gene in non-small cell lung cancer patients in terms of T staging and lymph node metastasis.

Keywords： non-small cell lung cancer; NM23 gene; clinicopathological features; PET/CT; growth site; survival time

肺癌为全世界范围内死亡率及发病率均较高的恶性肿瘤之一，其中小细胞肺癌（SCLC）约占15%，非小细胞肺癌（NSCLC）约占85%［1-3］。多种治疗方式结合治疗为肺癌的主要治疗方法。随着世界范围内肺癌诊治信息的快速传播与交流，国际肺癌临床诊疗规范的实施以及我国开展了多项肺癌临床试验与研究，我国肺癌的预防、诊治、监测水平取得了很大的进步。肺癌细胞的转移是一个复杂且精细的过程，受到多种基因的调控及癌细胞与宿主免疫细胞间的相互作用等多种因素的影响，探索与癌症相关的基因表达情况与临床病理学特征及生存情况有重大的意义，NM23基因在20世纪80年代作为一种癌症转移抑制基因被发现，在恶性肿瘤肿瘤如头颈部恶性肿瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、肝癌、恶性黑色素瘤等恶性肿瘤中，具有抑制癌细胞生长且促进癌细胞凋亡的能力［4-7］，但NM23与各类恶性肿瘤临床病理学特征、转移情况、生长部位及患者预后等方面的研究纳入的指标不够全面，样本量也较少，还有待进一步详细的研究［8］。本研究基于临床信息及免疫组化结果比较了NM23基因在NSCLC中的不同表达情况与临床病理学特征、淋巴结转移情况、患者生存时间的相关性，以期为NSCLC患者诊断及治疗提供更多有价值的信息。

1" 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年1月～2022年12月于新疆医科大学附属医院NM23表达阳性的107例NSCLC患者临床病例资料，其中女性26例，男性81例，年龄53～74（62.37±5.53）岁；病理类型：鳞癌53例，腺癌54例。纳入标准： NSCLC患者术后标本，经病理明确诊断为NSCLC；有NM23基因免疫组化检测结果者；签署了留取标本知情同意书。排除标准：病理诊断为SCLC及其他类型肺肿瘤标本及肺良性疾病标本。本研究通过医院伦理学审批［伦理审批号（K-2022021）］。

1.2" 方法

1.2.1" 实验仪器" 显微镜摄像装置（102M型）；摊片烤片机（Slidetec HEAT型）；CO2培养箱（HH.CP-160型）；全自动石蜡切片机（CUT 6062型）；医学图像分析系统（EPSON STYLUS PHOTO 915型）。

1.2.2" 实验试剂" "NM23鼠抗人单克隆抗体（北京奥维亚生物技术有限公司），免疫组织化学试剂盒、PBS缓冲液、NM23抗体稀释液、粘片剂（福州迈新生物技术开发有限公司）。

1.2.3" 实验要求" 阴性（-）对照，使用磷酸（PO4-）盐缓冲液一抗；阴性对照（-）为对比相同染色条件下的阳性（+）样片，以上操作均严格按照操作说明书进行。

1.2.4" 实验方法" "S-P免疫组化，NSCLC石蜡切片EnVision法。

1.2.5" 实验判定方法" "分析NM23在NSCLC中的表达差异，根据评分分为NM23低表达组（n=64）与NM23高表达组（n=43）。评分依据：①阳性细胞数量评分：肿瘤细胞中出现棕黄色颗粒为阳性（阴性为0分，lt;25%为1分，25%～50%为2分，51%～75%为3分，gt;75%为4分）。②细胞染色程度标准：NSCLC肺癌细胞（不着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分）。NM23低表达组：①+② ≤7分； NM23高表达组：①+② gt;7分。

1.2.6" 患者18F-FDG PET/CT检查方法" "PET/CT（飞利浦GEMINI TF PET/CT）；显像剂：18F-FDG显像剂；空腹血糖≤6.0 mmol/L，注射显像剂前禁食至少6 h，注射18F-FDG显像剂量为0.1 mCi/kg体质量；显像剂注射完成后要求患者安静平卧45～60 min；检查体位取仰卧位；扫描范围为头顶至大腿根部；检查时间约20 min，图像数据传输后在 Medex 工作站观察图像。

1.3" 统计学分析

采用SPSS27.0软件进行统计学分析，计数资料以n（%）表示，组间比较采用χ2检验，以Plt;0.05为差异有统计学意义。

2" 结果

2.1" 临床病理学特征比较

NM23基因低表达≤（++）组与NM23高表达gt;（++）组在性别、临床分期、组织类型、分化程度、吸烟情况的差异均无统计学意义（Pgt;0.05）；但原发灶分期的差异有统计学意义（Plt;0.001，表1）。

2.2" 18F-FDG PET/CT图像上生长部位比较

NM23基因低表达组与NM23基因高表达组在NSCLC生长在右肺上、中、下叶的表达差异、以及肺癌生长在左肺上叶与下叶表达情况差异均无统计学意义（Pgt;0.05，表2）。

2.3" "18F-FDG PET/CT图像淋巴结转移情况

NM23基因低表达组与NM23基因高表达组在NSCLC淋巴结转移情况差异有统计学意义（Plt;0.001，表3）， 18F-FDG PET/CT在NSCLC中淋巴结转移图像（图1）。

2.4" 生存时间比较

NM23基因低表达组与NM23基因高表达组在NSCLC患者生存时间的差异无统计学意义（Pgt;0.05）。

2.5" NM23表达的NSCLC患者术后病理图

术后证实NM23基因表达阳性的NSCLC病理图，每张切片分别随机选择5个低倍（×200）和高倍视野（×400）（图2）。

3" 讨论

有学者在鼠黑色素瘤cDNA库中发现了NM23基因［9］，其具有转移抑制潜能［10-14］，研究NM23基因的抑癌作用是非常重要的，尤其应关注其与LC临床病理学特征及预后情况方面的价值。本研究结果显示，NSCLC中NM23基因高与低表达组在原发灶分期（T1～T2期vs T3～T4期）、淋巴结转移情况（转移vs 未转移）的差异有统计学意义，在肿瘤生长部位及30月生存时间方面的差异无统计学意义。

本研究显示，NM23基因低表达组与NM23基因高表达组在原发灶分期，即T分期上差异有统计学意义，这与既往研究［15］报道的NM23基因高表达与T分期呈负相关关系的研究结果一致。NM23基因表达越高，癌灶越小；NM23基因表达越低，癌灶越大，说明NM23基因在癌症发生发展过程中起抑制作用。淋巴结转移一般被认为是癌症转移的阶段性标志，NSCLC转移首先浸润的是淋巴结，然后才是血行转移至其他部位，了解淋巴结的转移情况不仅为NSCLC患者选择治疗方案的重要参考依据，也是判断患者预后情况的重要指标。以往研究发现NM23蛋白的升高表达与多种恶性肿瘤的转移能力降低相关，尤其在淋巴结转移方面［16-18］，本研究显示NM23的高表达能够抑制淋巴结的转移，这与既往研究［19-20］结果一致。

一项荟萃分析显示，NM23可能被用作NSCLC的预后指标，该研究发现NM23阳性的NSCLC患者的5年生存率高于NM23阴性患者，NM23阳性的NSCLC患者的5年肿瘤转移率比NM23阴性患者低，NM23是有利的NSCLC预后的正面指标，NM23表达与NSCLC的进展相关［21］，这与另一项研究［22］结果一致，NM23表达可以作为NSCLC可靠且独立的预后指标。本研究结果显示，NM23表达与NSCLC生存时间的差异无统计学意义，与其研究结果不一致，可能与随访时间不够长，样本量较小，患者自身基础情况、术后治疗方案差异、术后患者心理情况等有关，或与NSCLC自身特点相关，在早期就可出现血行转移，对预后情况影响较大。

国内外学者对NM23基因的持续研究，充分肯定了NM23基因在肿瘤转移抑制方面的重要作用［23-25］。本研究结果支持NM23基因为NSCLC抑癌基因，其抑制细胞增殖及转移的能力可能与PI3K/AKT/mTOR信号通路受到抑制有关［26-29］。

本研究创新之处在于加入了NM23表达情况在18F-FDG PET/CT图像上生长部位的比较，结果显示NM23表达情况与肿瘤生长的部位不相关。后续研究中将会深入探索NM23基因与其他基因联合表达情况与LC临床病理学特征、淋巴结转移、生长部位、生存情况的研究，为寻找新的肿瘤标志物及靶基因奠定理论基础。但由于受免疫组化获得的信息及临床病理学特征有限，本研究仅纳入NM23基因作为研究目的基因，很多可能引起NSCLC患者淋巴结转移的其他高风险基因没有被纳入研究，本研究的局限性为仅纳入了单一的NM23基因表达情况不同时与NSCLC患者的病理学特征、淋巴结转移、生存时间的比较情况。

综上所述，本研究认为NM23基因的高表达在NSCLC原发灶大小、淋巴结转移方面发挥着抑制作用，能够为NSCLC的临床诊治工作提供有用的信息，未来NM23可能在NSCLC的诊断和预后中作为一种有价值的生物标志物。

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（编辑：林" 萍）

基金项目：新疆维吾尔自治区科技支疆项目计划（指令性）项目（2022E02050）

作者简介：夏露花，博士，副主任医师， E-mail： xialuhuahua@163.com

通信作者：常" 诚，主治医师， E-mail： chch011@126.com