金标法与酶联免疫法测定HIV抗体的临床意义

【摘要】目的：分析金标法与酶联免疫法测定人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体的临床意义。方法：研究对象为2021年1月—2023年6月期间我疾控中心筛查高风险场所人群1459人，涉及宾馆、酒店、KTV、洗浴中心、足疗店，对所有人员先用金标法初筛检测HIV抗体，然后实施酶联免疫法予以复查，分析不同方法的检查结果。结果：1459人最后确证试验表明阳性人数12人，两种检查方法的诊断效能比较差异较小，无统计学意义（P>0.05）。结论：金标法与酶联免疫法均可用于HIV抗体的检测，通过将两者联合使用，可进一步减少假阳性，为艾滋病患者的诊治提供重要依据。

【关键词】艾滋病；HIV抗体；金标法；酶联免疫法；检测价值

Clinical significance research of gold labeling and enzyme-linked immunosorbent assay for detecting HIV antibodies

GAO Zhibin

Zibo Linzi District Center for Disease Control and Prevention， Zibo， Shandong 255400， China

【Abstract】Objective：To analyze the clinical significance of gold standard method and enzyme-linked immunoassay for detecting human immunodeficiency virus （HIV） antibodies.Methods：The study objects were 1459 high risk population screened by our CDC from January 2021 to June 2023，involving guesthouses，hotels，KTV，bath center and foot therapy shops.All personnel were first screened to detect HIV antibodies using the gold standard method，then implemented enzyme-linked immunization method to review，and the examination results of different methods were analyzed.Results：The final confirmatory test of 1459 individuals showed that there were 12 positive cases，and the diagnostic efficacy of the two examination methods was relatively small，with no statistical significance （P>0.05）.Conclusion：Both gold standard method and enzyme-linked immunoassay method can be used for the detection of HIV antibody.By combining the two methods，the false positives can be further reduced and provide an important basis for the diagnosis and treatment of AIDS patients.

【Key？Words】AIDS； HIV antibody； Gold standard method； Enzyme-linked immunoassay； Test value

艾滋病是常见的一类传染性疾病，结合有关艾滋病的研究分析，其可通过性接触、血液、母婴等方式传播。艾滋病可使人体产生严重的免疫缺陷，由于缺乏免疫力的抵抗，感染将更难治愈，并可导致患者75+zfgfZWm4OykWuLsxVtXooxhyrgS1RZBd8VHtIKlQ=死亡[1]。进行艾滋病检测主要的作用是筛查艾滋病，能够帮助患者尽早明确是否感染艾滋病病毒，并及时采取治疗措施，积极控制疾病进展，提高患者的生存质量，还有助于防止艾滋病进一步蔓延。此外，已经明确感染的患者进行艾滋病检测，其检测结果能够提供相关参考依据，有助于治疗[2]。通过对HIV抗体的免疫检测可作为艾滋病诊断与治疗的重要依据[3]。依据卫生部在2020年颁布的《全国艾滋病检测技术规范（2020年修订版）》中的相关要求，HIV抗体免疫检测需要实施初筛、复检和确认，不同阶段可使用的检测技术也较多。我疾控中心通过对相关人员实施金标法与酶联免疫法测定HIV抗体，证实将两者联合应用，更有利于保证艾滋病诊断的准确性，规避假阳性，现就有关资料予以分析，旨在更好地指导HIV抗体的检测。

1资料与方法

1.1一般资料

研究对象为2021年1月—2023年6月期间我疾控中心筛查高风险场所人群1459人，涉及宾馆、酒店、KTV、洗浴中心、足疗店，其中2021年检测总人数为668人，2022年检测总人数为460人，2023年检测总人数为331人，其中包括男性959人，女性500人，年龄在20～48岁，平均年龄（34.80±4.35）岁。不同人员均在我疾控中心完成HIV抗体检测，且初筛、复检试验相关数据均有详细记录。

1.2方法

对所有人员先采取金标法完成HIV抗体初筛检测，然后对所有人员再实施酶联免疫法予以复查，最后通过确证试验得到最终结果，详细检查方法如下。

金标法：疾控中心工作人员采集不同人员的静脉血液，采血过程中需要做好防护措施，避免接触不同筛查人员的血液，抽取血液3mL，并将血样装到试管中。本次所使用的人类免疫缺陷病毒（HIV1+2型）抗体诊断试剂盒（金标法）来源于北京万泰生物药业股份有限公司，严格按照详细说明书完成初筛、比对与分析，其中HIV抗体阳性判断标准：同时出现质控线、检测线两条红线，如果检测后无质控线则属于无效测试，视情况重复进行金标法检测。

酶联免疫法：人类免疫缺陷病毒（HIV）抗原抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）、质控血清均来源于北京万泰生物药业股份有限公司。采集不同人员的血样，血样需要凝集超过30min。利用稀释液稀释酶复合物，符合要求后加血清及阴、阳性的对照，后续经过孵育、洗板加底物，避光反应、加终止液等完成整个反应，反应完成后需要及时分析并读取结果，结合具体数值结果判断HIV抗体的阳性或者阴性。

对于酶联免疫法检测后的阳性、阴性人员，需要实施确证试验，具体可使用免疫印迹试验完成验证。

1.3观察指标

（1）不同检测方法对HIV抗体的检测结果；（2）不同检测方法对HIV抗体检测的诊断效能，其中诊断准确率=（真阴性人数+真阳性人数）/（真阳性人数+假阳性人数+假阴性人数+真阴性人数）×100.00%；灵敏度=真阳性人数/（真阳性人数+假阴性人数）×100.00%；特异度=真阴性人数/（真阴性人数+假阳性人数）×100.00%。

1.4统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行x2检验，计量资料采用（x±s）表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1不同检测方法对HIV抗体的检测结果

金标法与酶联免疫法测定HIV抗体阳性检出率比较差异较小，无统计学意义（P>0.05），如表1所示。

2.2不同检测方法对HIV抗体检测的诊断效能

金标法诊断准确率为99.93%（1458/1459），灵敏度为100.00%（12/12），特异性为99.93%（1446/1447）；酶联免疫法诊断准确率为100.00%（1459/1459），灵敏度为100.00%（12/12），特异性为100.00%（1447/1447）。金标法与酶联免疫法测定HIV抗体的诊断效能存在一致性，差异较小（P>0.05），相关数据见表2。

3讨论

艾滋病作为一种危害性较大的传染性疾病，通过对其筛查与诊断，有利于更好地指导艾滋病治疗，改善我国艾滋病发病与治疗现状[4]。HIV抗体检测是筛查相关人员有无感染艾滋病的常用方法之一，结合有关HIV抗体筛查的研究，如果HIV抗体为阳性，则需要进一步开展确诊实验的，这是因为初筛阳性中可能存在假阳性情况。通过确诊实验后显示为阳性者则可确诊为艾滋病。对于确诊感染艾滋病病毒患者则需要及时做好规范治疗，并重视对患者病毒水平、CD4细胞等监测，从而保证患者预后[5]。

对于一些高风险场所从业人员进行HIV抗体筛查，则可避免相关人员本身存在艾滋病并通过相关途径导致他人的感染，影响到整体艾滋病控制现状。HIV抗体检测技术是进行艾滋病筛查的常用方法，具体筛查中需要经过初筛、复检和确认，从而保证实际检验结果的可靠性[6]。不同方法在具体HIV抗体检测原理、方法等方面存在差异性，其中使用率较高的为金标法、酶联免疫吸附试验。

结合有关酶联免疫吸附试验、金标法在HIV抗体检测方面的应用，两种检测方法均可较快得到检验结果，通过HIV抗体检测筛查出不同受检者有无艾滋病风险。部分学者指出，HIV抗体检测中，金标法满足疾控中心实验室检测要求，具有较高的诊断特异性、灵敏度与准确率，操作简单，可较快出结果，但是其在操作中，如果加血样过量很容易引起假阳性，即使操作规范，但是从金标法本身检验原理方面分析，该方法在使用中易出现假阳性结果。部分学者指出，金标法在HIV抗体检测中无法满足大样本量的检测需要，使得金标法在HIV抗体检测方面的应用受到影响[7]。

HIV抗体使用酶联免疫吸附试验检测过程中，早期使用的是间接酶联免疫吸附试验检测方法，敏感性、特异性一般，此后经过不断发展，酶联免疫吸附试验检测HIV抗体过程中，不仅提高了检测的特异性与灵敏度，同时还能缩短HIV病毒感染者的窗口期，保证了HIV抗体整体检测效果。酶联免疫吸附试验检测HIV抗体过程中可进行较多样本的检测，但是整个操作过程较繁琐，涉及多个环节，对工作人员的要求较高，耗时也明显增加[8]。

本研究中通过对高风险场所人员进行HIV抗体筛查，具体筛查中先使用金标法，这主要是因为金标法检测操作更加便捷，能够更快出结果，但是考虑到金标法检测后存在假阳性可能，故而在复检试验中采取酶联免疫吸附试验，通过两种不同检查方法的对比，可更好地保证诊断结果，降低单一方法在应用中可能出现的误诊、漏诊情况。结合确证试验分析，金标法在HIV抗体检测中有1例为假阳性，而酶联免疫吸附试验检测后的整体诊断准确率、特异性、灵敏度均达到100.00%。由此可见，在HIV抗体检测中，同时应用金标法与酶联免疫法可保证实际诊断结果。实际在HIV抗体检测中，考虑到联合检查的成本以及工作量问题，可先用金标法初筛检测出HIV抗体阳性，再用酶联免疫法复查，并依据确证试验得到最终阳性人数。通过两种方法的互相对照，优势互补，保证HIV抗体检测的准确性，降低可能出现的HIV抗体假阳性。

疾控中心在进行HIV抗体检测过程中，需要掌握不同HIV抗体检测的原理、操作步骤，并保证各项操作均符合质控要求，与此同时，不同疾控中心还需要考虑自身实验室条件能否满足相关HIV抗体检测要求，避免实验室环境因素对实际检验结果造成影响。实际在HIV抗体检测中还需要考虑部分筛查者可能存在的窗口期问题，结合前期筛查结果，嘱咐部分高风险人员定期进行HIV抗体检测。

综上所述，金标法与酶联免疫法均可用于HIV抗体的检测，通过将两者联合使用，可进一步减少假阳性，为艾滋病患者的诊治提供重要依据。

参考文献

[1] 郭志飞.酶联免疫法和金标法检测HIV抗体的价值对比[J].中国实用医药，2022，17（6）：116-119.

[2] 王才会.酶联免疫法筛查HIV抗体应用于艾滋病诊断的价值研究[J].中国实用医药，2021，16（27）：78-80.

[3] 段蕾静.HIV-1新发感染检测试剂盒（重组捕获酶联免疫法）的研制[D].北京：中国疾病预防控制中心，2020.

[4] 余天会.金标法检测肺炎衣原体抗体的临床效果分析[J].世界复合医学，2021，7（4）：82-84.

[5] 任花萍，张晓冬，陈有明.分析酶联免疫法筛查HIV抗体的艾滋病诊断价值[J].医学食疗与健康，2020，18（23）：175-176.

[6] 郑勇，郭春梅.产检和术前检查应用快速检测HIV的临床意义[J].中国城乡企业卫生，2020，35（2）：93-94.

[7] 吴保民.胶体金法及酶联免疫法应用于艾滋病抗体检测的结果分析[J].世界最新医学信息文摘，2018，18（40）：135.

[8] 汤琰，辛辛，张勇，等.HIVTP同步金标法快速检测结果的比较分析[J].中国艾滋病性病，2020，26（4）：416-418.